李杰 覃智芳 何成龍 黃鴻 何沙金 顏彥

【摘要】目的：分析自發(fā)性高血壓大鼠主動脈結(jié)構(gòu)重構(gòu)的microRNA-195和BCL-2、Bax作用機制。方法：選取SPF/VAF級16只雄性SHR大鼠及16只Wistar大鼠，隨機分16只SHR大鼠為兩組，即實驗組和對照組，每組8只；分16只Wistar大鼠為兩組，即實驗組和對照組，每組8只。實驗組SHR大鼠、Wistar大鼠均灌服10mg/kg/d貝那普利，4周為1療程，共干預(yù)2個療程。結(jié)果：干預(yù)前SHR實驗組、SHR對照組大鼠的尾動脈收縮壓、舒張壓均顯著高于Wistar實驗組、Wistar對照組（P<0.05），干預(yù)后SHR實驗組、SHR對照組大鼠的尾動脈收縮壓、舒張壓均顯著高于Wistar實驗組、Wistar對照組（P<0.05），而SHR實驗組大鼠的尾動脈收縮壓、舒張壓均顯著低于SHR對照組（P<0.05）。Wistar組大鼠具有均一的主動脈內(nèi)膜，其與平滑肌細(xì)胞均沒有增生，中膜層彈力纖維、血管管壁均沒有增厚，具有有序的排列；SHR對照組大鼠具有不均勻增厚的主動脈內(nèi)膜、紊亂的結(jié)構(gòu)，血管中膜平滑肌細(xì)胞、彈力纖維、血管壁分別增生肥厚、增厚、增厚。SHR實驗組、Wistar實驗組、Wistar對照組大鼠的主動脈心態(tài)結(jié)構(gòu)之間的差異均不顯著。干預(yù)后SHR實驗組大鼠的主動脈microRNA-195表達顯著高于SHR對照組（P<0.05），Wistar實驗組大鼠的主動脈microRNA-195表達顯著高于Wistar對照組（P<0.05）；SHR實驗組大鼠的microRNA-195顯著高于Wistar實驗組（P<0.05）。SHR實驗組大鼠的主動脈BCL2 mRNA表達顯著低于SHR對照組（P<0.05）；Wistar實驗組大鼠的主動脈BCL2 mRNA顯著低于Wistar對照組（P<0.05）。SHR實驗組大鼠的主動脈Bax mRNA表達顯著高于SHR對照組、Wistar實驗組、Wistar對照組（P<0.05），SHR對照組大鼠的主動脈Bax mRNA表達顯著高于Wistar對照組（P<0.05）。干預(yù)后SHR實驗組、SHR對照組大鼠的主動脈BCL2蛋白表達均顯著高于Wistar實驗組（P<0.05），SHR實驗組大鼠的主動脈BCL2蛋白表達顯著低于SHR對照組（P<0.05），Wistar實驗組大鼠的主動脈BCL2蛋白表達顯著低于Wistar對照組（P<0.05）。結(jié)論：microRNA-195可能通過對BCL2/Bax表達進行調(diào)節(jié)對SHR大鼠的主動脈結(jié)構(gòu)性重構(gòu)進行抑制，貝那普利干預(yù)可能能夠促進microRNA-195表達。

【關(guān)鍵詞】自發(fā)性高血壓大鼠 主動脈結(jié)構(gòu)重構(gòu) microRNA-195 BCL2/Bax 作用機制

本研究分析了自發(fā)性高血壓大鼠主動脈結(jié)構(gòu)重構(gòu)的microRNA-195和BCL-2、Bax作用機制，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

實驗動物：購買16只雄性SHR大鼠及16只Wistar大鼠，均為8周齡，平均體質(zhì)量分別為（200±10）g、（260±10）g。在我院動物實驗中心SPF級動物房飼養(yǎng)，將環(huán)境溫度、光照周期、濕度分別設(shè)定為20℃-240C、12/12h、55%-65%，讓其標(biāo)準(zhǔn)實驗室飲食，自由飲水。

1.2 方法

隨機分16只SHR大鼠為兩組，即實驗組和對照組，每組8只；分16只Wistar大鼠為兩組，即實驗組和對照組，每組8只。實驗組SHR大鼠、Wistar大鼠均灌服10mg/kg/d貝那普利[1]，4周為1療程，共干預(yù)2個療程。

1.3 觀察指標(biāo)

干預(yù)前后分別對各組鼠尾動脈血壓進行測量，干預(yù)2個療程后股動脈放血將大鼠處死，HE染色對主動脈形態(tài)學(xué)改變進行觀察，運用實時熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）法對其microRNA-195和BCL-2、Bax mRNA表達進行檢測，運用免疫印跡法（Western blot）對BCL-2、Bax蛋白表達量進行測量降[2-7]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS21.0，計量資料用（x±s）表示，用t檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠干預(yù)前后的尾動脈血壓變化情況比較

干預(yù)前SHR實驗組、SHR對照組大鼠的尾動脈收縮壓、舒張壓均顯著高于Wistar實驗組、Wistar對照組（P<0.05），干預(yù)后SHR實驗組、SHR對照組大鼠的尾動脈收縮壓、舒張壓均顯著高于Wistar實驗組、Wistar對照組（P<0.05），而SHR實驗組大鼠的尾動脈收縮壓、舒張壓均顯著低于SHR對照組（P<0.05），具體見表1。

2.2 各組大鼠的主動脈形態(tài)結(jié)構(gòu)比較

Wistar組大鼠具有均一的主動脈內(nèi)膜，其與平滑肌細(xì)胞均沒有增生，中膜層彈力纖維、血管管壁均沒有增厚，具有有序的排列；SHR對照組大鼠具有不均勻增厚的主動脈內(nèi)膜、紊亂的結(jié)構(gòu)，血管中膜平滑肌細(xì)胞、彈力纖維、血管壁分別增生肥厚、增厚、增厚。SHR實驗組、Wistar實驗組、Wistar對照組大鼠的主動脈心態(tài)結(jié)構(gòu)之間的差異均不顯著。具體見圖1。

2.3各 組大鼠干預(yù)后動脈皿croRNA-195和BCL-2、Bax mRNA表達比較

干預(yù)后SHR實驗組大鼠的主動脈microRNA-195表達顯著高于SHR對照組（P<0.05），Wistar實驗組大鼠的主動脈microRNA-195表達顯著高于Wistar對照組（P<0.05）；SHR實驗組大鼠的microRNA-195顯著高于Wistar實驗組（P<0.05）。SHR實驗組大鼠的主動脈BCL2 mRNA表達顯著低于SHR對照組（P<0.05）；Wistar實驗組大鼠的主動脈BCL2 mRNA顯著低于Wistar對照組（P<0.05）。SHR實驗組大鼠的主動脈Bax mRNA表達顯著高于SHR對照組、Wistar實驗組、Wistar對照組（P<0.05），SHR對照組大鼠的主動脈Bax mRNA表達顯著高于Wistar對照組（P<0.05）。具體見圖2-圖4。

2.4 各組大鼠干預(yù)后的BCL2、Bax蛋白表達差異比較

干預(yù)后SHR實驗組、SHR對照組大鼠的主動脈BCL2蛋白表達均顯著高于Wistar實驗組（P<0.05），SHR實驗組大鼠的主動脈BCL-2蛋白表達顯著低于SUR對照組（P<0.05），Wistar實驗組大鼠的主動脈BCL2蛋白表達顯著低于Wistar對照組（P<0.05）；SUR實驗組、SUR對照組、Wistar實驗組、Wistar對照組大鼠的主動脈Bax表達之間的差異均不顯著（P>0.05）。具體見圖5-圖6。

3 討論

本研究結(jié)果表明，microRNA-195可能通過對BCL-2、Bax表達進行調(diào)節(jié)對SUR大鼠的主動脈結(jié)構(gòu)性重構(gòu)進行抑制，貝那普利干預(yù)可能能夠促進microRNA-195表達，值得臨床充分重視。

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