李愛英

（泰安市泰山景區(qū)疾病控制中心，山東 泰安 271000）

0 引言

目前社會廣泛關(guān)注的民生問題之一為生活飲水衛(wèi)生問題。水是人體不可缺少的物質(zhì)之一，水可發(fā)揮持續(xù)細(xì)胞形態(tài)、加速機體廢物排泄、調(diào)節(jié)組織細(xì)胞液等作用。隨著飲水和飲食，把水中的各種元素通過消化道吸收入人體的各個器官。而被污染的水體含有農(nóng)藥、多氯聯(lián)苯、多環(huán)芳烴、汞、鉻、鉛、砷、放射性元素、致病細(xì)菌等有害物質(zhì)，它們被確認(rèn)對健康不利，具有致癌、致畸、致突變作用或有毒性[1-2]。這些物質(zhì)可以通過飲用水和食物鏈等途徑進(jìn)入人體，并在人體積累，造成危害。本文對生活飲用水微生物檢驗方法與評價標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行全面分析，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 生活飲用水微生物檢驗的基本概述

在生活飲用水中，“微生物檢驗”在使用過程中，檢驗對象主要是飲用水中的微生物種類和含量，即將檢測數(shù)據(jù)與國家飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化要求相比對，由此就飲用水是否符合飲用標(biāo)準(zhǔn)作出精準(zhǔn)判斷。飲用水作為人體新陳代謝不可或缺的重要物質(zhì)之一，具有促進(jìn)血液循環(huán)、加速新陳代謝、快速排泄體內(nèi)廢物以及調(diào)節(jié)組織細(xì)胞液等功能，但隨著工業(yè)化建設(shè)進(jìn)程的不斷推進(jìn)，飲用水供水區(qū)域環(huán)境的日益惡劣化在滋生各種病菌的同時，致病病原體進(jìn)入人體的概率在明顯增加，長此以往在危害人體生命安全的同時也不利于國家可持續(xù)發(fā)展目標(biāo)的實現(xiàn)，為此將“微生物檢驗”方式合理化運用于生活飲用水衛(wèi)生檢測中，對促進(jìn)國民健康發(fā)展具有重要意義[3-4]。

2 生活飲用水微生物檢驗資料和方法剖析

2.1 一般資料。在生活飲用水微生物檢驗時，為保證檢驗數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)化，檢驗機構(gòu)工作人員需將選取的生活飲用水樣本進(jìn)行等分操作，后在嚴(yán)格遵照實驗室相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)化要求下，先后通過不同的微生物檢驗方式對樣本進(jìn)行全面檢測。檢驗工作結(jié)束后，工作人員需以《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法水樣采集與保存》中的相關(guān)數(shù)據(jù)為參照，系統(tǒng)化剖析和評價檢驗結(jié)果[5]。

2.2 檢驗方式

（1）濾膜法：作為微生物檢驗中一種常用方式，濾膜法主要用以檢驗水源中總大腸菌群，為確保檢驗工作的規(guī)范化開展，在正式檢驗前工作人員需準(zhǔn)備好如下檢驗儀器，即——載玻片、錐形瓶、濾器、顯微鏡、0.45μm孔徑濾膜、試管、冰箱、天平、刻度吸管、抽濾設(shè)備、鑷子、平皿、恒溫培養(yǎng)箱。經(jīng)調(diào)查當(dāng)前濾膜法在檢驗時，為保證檢驗工作的高效化開展，檢驗工作人員需做好如下工作，即分別為水樣滅菌、水樣過濾和水樣培養(yǎng)。在水樣滅菌中，常用的兩種滅菌方式主要是濾器滅菌、濾膜滅菌，具體來講前者主要是指將濾膜放置到燒杯后加入蒸餾水，之后進(jìn)行煮沸操作，并在煮沸三次后進(jìn)行滅菌處理，需注意的是通常來講兩次煮沸之后檢驗工作人員需進(jìn)行換水操作，并在嚴(yán)格控制滅菌時長（15 min）的同時使用試劑清理燒杯內(nèi)的殘留物，至于濾器滅菌，則具體是指點燃酒精棉球火焰滅菌作業(yè)；在水樣過濾中，過濾操作流程主要是“用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣處—將濾膜粗糙面朝上貼到滅菌濾床—固定濾器—加入100 mL水樣本—打開濾器閥門—在-0.5大氣壓下進(jìn)行抽濾”；在水樣培養(yǎng)時，檢驗工作人員需明確在完成水樣過濾后到取下濾器前，工作人員需先抽氣五秒后再管好閥門取下濾器，之后通過用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣處置于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，需注意的是此時朝上的面是還存留細(xì)菌的面，且需要保證濾膜與培養(yǎng)基的完美切合，最后將倒置的培養(yǎng)皿放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)（24±2）h[6-7]。

（2）多管發(fā)酵法：除濾膜法外，在生活飲用水細(xì)菌含量檢測過程中，常用的微生物檢驗方式還包括多管發(fā)酵法，通常來講這種方式則主要用于總大腸菌群的測定。在正式檢驗前工作人員需準(zhǔn)備好如下檢驗儀器，即—刻度吸管、錐形瓶、顯微鏡、平皿、載玻片、天平、小導(dǎo)管、中試管、恒溫培養(yǎng)箱[8-9]。

就目前來看在進(jìn)行檢驗時，為保證檢驗結(jié)果的精準(zhǔn)度和數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，檢驗工作人員需嚴(yán)格按照實驗室相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)化要求，由此為后期相關(guān)部門的戰(zhàn)略調(diào)整提供了重要參考。在實施多管發(fā)酵法時，檢驗工作人員需嚴(yán)格按照如下操作流程，即：取10 mL水樣加入10 mL雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，將1 mL水樣分別置于10 mL單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和9 mL無菌生理鹽水（保證兩者混合的均勻性）中，混勻后吸取1 mL（相當(dāng)于0.1 mL水樣）加入10 mL單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，并接種處理不同稀釋度；在進(jìn)行檢驗時，通常來講稀釋程度需根據(jù)檢驗樣本的污染度進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，即通常來講對于<1 mL的水樣本，為保證檢驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，工作人員需保證稀釋工作的規(guī)范化開展，即通過給予10倍稀釋，而后隨機選擇1 mL進(jìn)行接種；接種完成后，將接種結(jié)束后的樣本置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后取出，再依據(jù)試管有無出現(xiàn)產(chǎn)氣產(chǎn)酸現(xiàn)象就大腸菌群陰性和陽性做出判斷，即若無產(chǎn)氣產(chǎn)酸現(xiàn)象則表示大腸菌群為陰性，反之為陽性；對于檢測出大腸菌群為陽性的試管，在后續(xù)操作時工作人員需將其放置在伊紅美藍(lán)瓊脂板上進(jìn)行轉(zhuǎn)種，待轉(zhuǎn)種工作結(jié)束后將其放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，并實時觀察菌落形態(tài)；將紫黑色合并金屬光澤或無金屬關(guān)澤與淡紫紅色，中心部位顏色較深的菌落進(jìn)行染色，并通過鏡檢進(jìn)行證實；染色完畢后，若證實為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則需要置入乳糖蛋白胨中進(jìn)行培養(yǎng)，隨后將接種管置于恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過后若出現(xiàn)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的現(xiàn)象，則表明大腸桿菌群為陽性[10-11]。

2.3 評定標(biāo)準(zhǔn)。在研究過程中，工作人員需系統(tǒng)化記錄檢驗數(shù)據(jù)（飲用水中大腸桿菌、雜菌、耐熱大腸菌群與大腸埃希菌等微生物的檢出率），并以《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》、《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》為依據(jù)，對生活飲用水衛(wèi)生狀況作出合理化判斷。

2.4 統(tǒng)計學(xué)分析。本次研究數(shù)據(jù)分析的工具為SPSS 20.0統(tǒng)計軟件包，計量資料以“（±s）”表示，展開t檢驗；計數(shù)資料以“%”表示，行χ2檢驗；若兩組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義，則表現(xiàn)為P<0.05。

3 結(jié)果分析

通過表1分析可知，在檢驗過程中，觀察組采用多管發(fā)酵法檢驗，其中20例為雜菌檢，檢出率占總量的80%；22例為大腸桿菌，檢出率占總量的88%；23 例為大腸埃希菌，檢出率占總量的92%；21例為耐熱大腸桿菌，檢出率占總量的84%。

表1 兩組水樣微生物檢出率比對表[n（%）]

在對照組中采用濾膜法檢驗，其中18例為雜菌檢，檢出率占總量的72%；19例為大腸桿菌，檢出率占總量的76%；17例為大腸埃希菌，檢出率占總量的68%；16例為耐熱大腸菌群，檢測率占總量的64%。通過分析可知對照組中微生物檢出量少于觀察組，比較后兩組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

綜合而言，經(jīng)濟(jì)快速化發(fā)展在改善人們物質(zhì)生活水平的同時，飲用水衛(wèi)生不達(dá)標(biāo)現(xiàn)象的普遍化，在增加各種疾病發(fā)病率的同時也不利于區(qū)域穩(wěn)定性格局的構(gòu)建，嚴(yán)重阻礙了國家的可持續(xù)發(fā)展。作為民生問題中的重點關(guān)注對象，近年來飲用水衛(wèi)生也受到了各界的高度關(guān)注，提高水資源質(zhì)量和安全性逐漸成為了推動區(qū)域可持續(xù)發(fā)展，保障周邊民眾生命財產(chǎn)安全的重要保障，為此將“微生物檢驗”方式合理化應(yīng)用于飲用水衛(wèi)生檢測中現(xiàn)已迫在眉睫。