張官華

（金湖縣中醫(yī)院，江蘇 淮安 211600）

0 引言

ELISA法又稱為酶聯(lián)免疫吸附法，最早于1917年被國外專家用來定量檢測IgG抗體，直到1966年，開始用來檢測樣品抗原以及微量物質。在實驗室中，化學發(fā)光法屬于一種使用較多的發(fā)光免疫技術，在臨床免疫檢驗學中應用較廣。作為乙類傳染病，病毒性肝炎和艾滋病在全世界范圍內都有著較高的發(fā)病率。艾滋病主要是人體免疫缺陷病毒導致的，當前研究發(fā)現(xiàn)此病毒分為兩種，分別是HIV-1型與HIV-2型[1]。作為病毒性肝炎的一種，丙型肝炎病毒會導致丙型肝炎的出現(xiàn)，這也是引起慢性肝炎和肝硬化的重要原因。梅毒則是由于梅毒螺旋體感染導致的。近些年來，艾滋病、梅毒以及丙肝疾病發(fā)病率不斷上升，而艾滋病及梅毒的傳染趨勢更加明顯。由于艾滋病具有較長的潛伏期，如果沒有第一時間發(fā)現(xiàn)，得不到及時的治療，會導致更多的人感染，所以前期的診斷對于控制疾病有著重要的作用[2-3]。本文為了探究檢測血清中HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體和丙肝抗體的有效方法，分別對ELISA法和CLIA法進行對比。

1 資料與方法

1.1 一般資料。對我院收治的患者進行檢測，共有1188例，所有患者在2018年2月至2019年7月在金湖縣中醫(yī)院接受治療，共抽取1188例血液樣本。所有患者均已自愿簽訂知情同意書，此次研究也已經通過了金湖縣中醫(yī)院倫理委員會的審查批準。其中有女516例，男672例，平均年齡（37.21±7.21）歲。

1.2 方法。使用儀器：全自動化學發(fā)光儀由日本希森美康生產，型號為sysmexHISCL-5000；全自動蛋白印跡儀，由瑞士帝肯生產，型號為Tecan；全自動酶聯(lián)免疫分析儀，由瑞士哈美頓生產，型號為HamiltonFAME-2420；洗板機與酶標儀由上海新波公司生產；平板混合器、U型微量反應板、吸頭以及加樣器由北京萬泰公司生產。使用試劑：有珠海麗珠生產的人類面議缺陷病毒抗原抗體診斷試劑盒；上?？迫A生產的丙肝抗體檢查試劑盒；由新加坡MP公司生產的HIV-1+2抗體免疫印跡試劑；達安基因公司生產的丙肝病毒核酸定量檢測試劑盒；日本富土瑞必歐株式會社生產的TPPA試劑盒，由北京萬泰公司生產的梅毒抗體ELISA試劑盒，由美國雅培公司生產的梅毒抗體CLIA法試劑盒。

1.3 檢測方法。通過計算機對樣本進行隨機編號，根據(jù)編號對血清樣本進行分裝，期間注意不要對樣本進行重復冷凍。在完成取樣后將樣本放置在零下20℃的冰箱中進行保存，并在檢測之前取出。整個檢測過程由專業(yè)的技師嚴格參照試劑盒說明書以及相關檢測規(guī)范進行操作，并根據(jù)實驗室檢測規(guī)范做好初篩、復檢以及確證等工作。HIV-1/HIV-2抗體檢測以Westernblot檢測結果作為金標準；丙肝抗體檢測以PCR檢測結果作為檢測金標準；梅毒抗體檢測以TPPA檢測結果作為金標準。

1.4 觀察指標。對血液樣本分別采用ELISA法和CLIA法檢測血清中的HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體和丙肝抗體，對比兩種方法檢測效果。

2 結果

2.1 ELISA法和CLIA法檢測HIV-1/HIV-2抗體效果對比。HIV-1/HIV-2抗體檢測以Westernblot檢測結果作為金標準，共有6例患者顯示HIV陽性，占比為0.51%，ELISA法檢測顯示陽性患者5例，占比為0.42%，CLIA法檢測顯示陽性患者6例，占比為0.51%，見表1。

表1 ELISA法和CLIA法檢測HIV-1/HIV-2抗體效果對比

2.2 ELISA法和CLIA法檢測HCV抗體效果對比。丙肝抗體檢測以PCR檢測結果作為檢測金標準，共有56例患者梅毒抗體檢測顯示陽性，占比為4.71%，ELISA法檢測顯示陽性患者47例，占比為3.96%，CLIA法檢測顯示陽性患者51例，占比為4.29%，見表2。

表2 ELISA法和CLIA法檢測HCV抗體效果對比

2.3 ELISA法和CLIA法檢測梅毒抗體效果對比。梅毒抗體檢測以TPPA檢測結果作為金標準，共有34例患者顯示陽性，占比為2.86%，ELISA法檢測顯示陽性患者31例，占比為2.61%，CLIA法檢測顯示陽性患者33例，占比為2.78%。采用ELISA法對CLIA法檢測結果顯示陰性的標本進行檢測，結果也顯示為陰性，但是檢測顯示陽性的患者，ELISA法只有部分檢測出陽性。

3 討論

信息網絡時代的發(fā)展進一步促進了社會的發(fā)展，但是也在一定程度上改變了人們的價值觀，很多人性保護意識薄弱，每年因為不潔性交感染梅毒、艾滋病的患者在不斷增加，另外，梅毒診斷難度較大，由于一般實驗室很難做到查TP，所以在臨床上很少使用，有關研究調查顯示，我國近些年艾滋病、梅毒以及丙肝的患者數(shù)量呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，特別是艾滋病患者數(shù)量增長更快[4]。艾滋病、梅毒以及丙肝的及早治療對改善患者預后以及感染人數(shù)的控制有著重要的意義，因此疾病的早期臨床診斷尤為重要，當前臨床主要以Westernblot、PCR以及TPPA檢測方法為主，隨著醫(yī)學技術的不斷發(fā)展，ELISA法以及CLIA法也得到廣泛的應用，對提升臨床檢測準確率起到了重要作用。

雖然Westernblot、PCR以及TPPA在診斷HIV-1/HIV-2、HCV以及梅毒的診斷過程中，其準確性、特異度以及敏感度比較高，作為當前疾病診斷的金標準，但是這幾類檢測方法成本較高，且操作過程更加復雜，檢測周期較長，對臨床的診斷治療造成了較大的限制。ELISA法是通過檢測酶標抗原或抗體來進行檢測，這一類物質除了能夠確?？贵w免疫活性外，還能使酶生物活性得到保留，對提高檢測精度具有重要的作用[5]。CLIA作為一種發(fā)光免疫技術，主要通過結合免疫反應與發(fā)光系統(tǒng)，通過檢測抗原或抗體，來作為診斷的重要依據(jù)，兩種方法在臨床上均有著廣泛的應用。然而在實際應用中，ELISA法手工操作較多，無法實現(xiàn)全自動化操作，且試劑屬于定型試劑，無法作為定量試劑來檢測使用，檢測時間較長，花費精力更多，缺乏良好的重復性。與ELISA法相比，CLIA法擁有更簡單的操作，檢測時間也更短，重復性更強，且能夠實現(xiàn)定量檢測。

此次研究中通過對ELISA法與CLIA法檢測血清中的HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體和丙肝抗體，結果顯示，對于CLIA法檢測出來的陰性標本，采用ELISA法進行檢測后也為陰性，但是對于CLIA法檢測出來的陽性標本，采用ELISA法進行檢測后并不是所有標本都表現(xiàn)陽性，兩種檢測方法與金標準均具有較高的一致性，但是CLIA法要高于ELISA法。

綜上所述，臨床在HIV-1/HIV-2、梅毒和丙肝診斷中，應將CLIA法作為首選檢測方法，必要情況下可以結合兩種方法進行檢測，使漏診率和誤診率得到最大限度的降低。