何 媛，周小娟，蔣 欽

(九江學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科，江西 九江 332000)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種臨床常見的自身免疫性疾病，可累及皮膚、心臟、大腦、腎臟等多器官系統(tǒng)[1]，常見的并發(fā)癥有動靜脈血栓，腎臟病變，溶血性貧血等。SLE可表達多種自身抗體，并在一定程度上可表達抗心磷脂抗體(anticardiolinpin antibody，ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoprotein Ⅰ antibody，β2-GP Ⅰ-Ab)[2]。關(guān)于SLE并發(fā)血栓的發(fā)病機制，尚無統(tǒng)一定論。本研究通過檢測不同亞型ACA和β2-GP Ⅰ-Ab在SLE患者中的表達，分析其在SLE合并血栓患者中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1研究對象：選擇2016年2月～2019年2月在我院風(fēng)濕免疫科門診和住院的SLE患者128例，均符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)[3]，排除其它免疫系統(tǒng)疾病且就診前3個月內(nèi)未給予激素以及免疫抑制劑等藥物治療的患者。根據(jù)是否具有血栓并發(fā)癥分成有血栓SLE組(n=56)和無血栓SLE組(n=72)。血栓由多普勒超聲、造影、影像學(xué)或組織病理學(xué)等檢查證實。排除標(biāo)準(zhǔn)：①就診前3個月內(nèi)給予激素以及免疫抑制劑等藥物治療；②合并其他免疫系統(tǒng)疾?。虎酆喜⑻悄虿?、高血脂癥和(或)高血壓等心血管疾病；④合并肝功能損害；⑤腫瘤患者；⑥因骨折等原因臥床患者。

健康對照組為我院體檢中心體檢者50例,經(jīng)體檢排除心、腎、肺、肝等器質(zhì)性疾病和糖尿病、高血壓病、各種腫瘤、炎性反應(yīng)和自身免疫性疾病等。本次研究經(jīng)過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會同意。各組年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),有可比性。詳見表1。

表1 各組一般資料比較

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集：所有待測者清晨空腹抽靜脈血4 ml，血液凝固后以轉(zhuǎn)速3 000 r/min，離心5 min，分離出血清。

1.2.2檢測方法：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測免疫球蛋白A(IgA)-ACA、免疫球蛋白G(IgG)-ACA、免疫球蛋白(IgM)-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab。均使用德國歐蒙公司生產(chǎn)的試劑，嚴(yán)格按照操作說明書操作，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出濃度。其中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA>12 RU/ml為陽性，β2-GP Ⅰ-Ab>20 RU/ml為陽性。

2 結(jié)果

2.1各組中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab陽性表達：與健康對照組相比，有血栓SLE組和無血栓SLE組IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab四個指標(biāo)陽性率均更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而有血栓SLE組該四個檢測指標(biāo)陽性率則高于無血栓SLE組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab陽性率比較[例(%)]

2.2各組中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab水平比較：IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab水平比較結(jié)果為有血栓SLE組>無血栓SLE組>健康對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 各組中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab水平比較

3 討論

SLE是一種自身免疫性疾病，是“繼發(fā)性抗磷脂綜合征”的典型代表?？沽字C合征臨床特點為抗磷脂抗體陽性引起動靜脈血栓形成，血小板減少，習(xí)慣性流產(chǎn)等?？沽字贵w主要包括ACA、β2-GPⅠ-Ab、狼瘡抗凝物，具有異質(zhì)性。本研究通過對SLE并發(fā)血栓患者血清中ACA、β2-GPⅠ-Ab檢測，觀察其在SLE并發(fā)血栓疾病中的臨床作用。

ACA是包括IgA、IgG、IgM或者該三型免疫球蛋白的混合物。ACA也是一種自身抗體，可見于SLE等其他自身免疫性疾病中，其主要靶抗原有β2-GPⅠ、凝血酶原、蛋白C、膜聯(lián)蛋白V及高分子量激肽原等。既往多項研究表明ACA與血栓形成相關(guān)[4-5]。在本研究中根據(jù)有無血栓癥狀，分別檢測了不同組別SLE患者和健康對照者IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA。和健康對照組相比，有血栓SLE組和無血栓SLE組IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA陽性率和含量水平均要高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而有血栓SLE組該三個指標(biāo)則高于無血栓SLE組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。說明ACA 是SLE患者發(fā)生動靜脈血栓的危險因素。其發(fā)生機制可能為ACA一方面抑制分泌血液中抗組織纖溶酶原激活物，另一方面促進釋放纖溶酶原抑制物，使血液中纖維蛋白增加，患者機體處于高凝狀態(tài)，進而導(dǎo)致血栓形成。此外，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)不管是在血栓組還在無血栓組SLE患者中，IgG-ACA的陽性率在三種亞型中均最大，分別為60.71%和22.22%，而IgA-ACA陽性率最小，與張文蘭等研究報道相符[6]。其可能原因為IgG-ACA半衰期長，免疫調(diào)理作用強，發(fā)揮主要免疫應(yīng)答作用，而IgA-ACA由于在巨噬細胞、淋巴細胞缺乏相應(yīng)受體，其免疫應(yīng)答作用受限。

β2-GPⅠ于1961年發(fā)現(xiàn)，是一種磷脂結(jié)合蛋白，目前被認(rèn)為是抗磷脂抗體在臨床上關(guān)系最密切的抗原靶點。它與相應(yīng)的抗體——β2-GPⅠ-Ab相互結(jié)合，在抗磷脂綜合征的發(fā)病機制中發(fā)揮著重要的作用[7]。關(guān)于β2-GPⅠ-Ab和血栓疾病的關(guān)系，一直是近年的研究熱點，亦有很多研究證明兩者之間存在關(guān)系[6,8-9]。其機制可能為β2-GPⅠ-Ab既能通過降低抗凝血酶Ⅲ活性抑制凝血反應(yīng)；還可干擾抗凝系統(tǒng)，活化蛋白C抗凝作用；另外，可通過活化血管內(nèi)皮細胞及單核細胞，表達各種促凝物質(zhì)[10]。本研究中檢測的是有無血栓SLE組和健康對照組總的β2-GPⅠ-Ab，發(fā)現(xiàn)β2-GPⅠ-Ab的陽性率和含量水平結(jié)果為有血栓SLE組>無血栓SLE組>健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這和各組中各型ACA的陽性率與水平結(jié)果相似。Belen E研究活動期SLE 患者發(fā)現(xiàn)，ACA、β2-GPⅠ-Ab 陽性比ACA、β2-GPⅠ-Ab陰性患者的血栓發(fā)生率高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)[11]，與本研究相符。

關(guān)于ACA與β2-GPⅠ-Ab二者的關(guān)系，有研究表明β2-GPⅠ-Ab在 ACA 與抗原結(jié)合中發(fā)揮著重要作用，ACA 通過β2-GPⅠ-Ab與內(nèi)皮細胞或血小板上帶負(fù)電的磷脂、蛋白磷脂復(fù)合物或磷脂結(jié)合蛋白(如凝血酶原、蛋白 C、蛋白 S 等)結(jié)合，增強組織因子表達，促進血小板激活和聚集，導(dǎo)致高凝狀態(tài)，形成血栓[12]。

本研究顯示，有血栓SLE組和無血栓SLE組IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GPⅠ-Ab的陽性率和水平均比健康對照組高，提示IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GPⅠ-Ab參與了SLE疾病發(fā)病。同時，有血栓SLE組中以上四個檢測指標(biāo)不管陽性率還是含量均高于無血栓SLE組，進一步表明IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GPⅠ-Ab與SLE并發(fā)血栓密切相關(guān)，與張文蘭等研究報道相符[6]。秦韜等研究亦稱ACA和β2-GPⅠ-Ab陽性患者出現(xiàn)SLE并發(fā)血栓的風(fēng)險明顯高于ACA和β2-GPⅠ-Ab陰性患者[13]。

綜上所述， IgA、IgG、IgM型ACA與β2-GPⅠ-Ab可能參與SLE患者血栓形成過程，聯(lián)合和定量檢測抗心磷脂抗體和β2-GPⅠ-Ab有助于評估和預(yù)測SLE合并血栓狀態(tài)。