王天梅，陳松樹，李丹丹，王華磊※，李金玲，羅春麗

（1.貴州大學農(nóng)學院，貴州 貴陽 550025；2.貴州省藥用植物繁育與種植重點實驗室，貴州 貴陽 550025）

黃精是百合科（Liliaceae）黃精屬（Polygonatum Mill）多種植物干燥根莖的總稱[1]，其味甘，性平；歸脾、肺、腎經(jīng)，具有補氣養(yǎng)陰、健脾、潤肺和益腎的功效[2]。2020版《中國藥典》收錄的黃精來源于滇黃精（P.kingianum.）、多花黃精（P.cyrtonema.）和黃精（P sibiricum.）3個基原，《名醫(yī)別錄》中記載藥用黃精久服輕身延年不饑，在民間還是一種使用面較廣的傳統(tǒng)藥食同源植物[3]。黃精含有多種化學成分，主要包括多糖、甾體皂苷、黃酮、三萜、生物堿、木脂素、植物甾醇及揮發(fā)油等[4]，目前，對黃精栽培技術(shù)[5]、炮制加工[6]、藥用成分[7]及藥理作用[8]的研究報道較多，對不同產(chǎn)地黃精營養(yǎng)成分比較的研究鮮有報道。

因黃精栽培仍主要依靠采集野生黃精的根莖繁殖，導致種質(zhì)混亂，優(yōu)劣不一[3]，且該屬植物的實生苗和成長的植株，有時在葉形上和葉序有較大變化[1]，難以區(qū)分，以次充好和以假亂真的現(xiàn)象較為嚴重。隨著黃精人工栽培面積的快速增長，無論從食品安全的角度還是滿足“健康中國”人民日益增長的美好生活需要，把控黃精質(zhì)量、合理區(qū)別使用[9]都至關(guān)重要。貴州地區(qū)濕潤、雨熱同季的氣候條件及豐富的林地資源為黃精提供了較適宜的生長環(huán)境，四川樂山地區(qū)在特定地理環(huán)境條件下形成了多種氣候類型，是木材、茶葉和中藥材等作物的主產(chǎn)區(qū)。基于此，本研究以貴州六枝等4個黃精產(chǎn)區(qū)及四川樂山的多花黃精為試材，著重研究了其食用和藥用成分，以期為進一步開展黃精質(zhì)量評價提供一定參考。

1 材料

1.1 樣品采集與處理

表1 多花黃精樣品信息表Table 1 The sample information sheet from different origins

表1 多花黃精樣品信息表Table 1 The sample information sheet from different origins

編號Numbering折干率（%）Discount rate 1 貴州六枝 Liuzhi,Guizhou Province 25.72 2 貴州興義 Xingyi,Guizhou Province 22.10 3 貴州遵義 Zunyi,Guizhou Province 20.69 4 貴州石阡 Shiqian,Guizhou Province 22.91 5 四川樂山 Leshan,Sichuan Province 16.53材料來源Material source

1.2 儀器與試劑

儀器：TP-214電子分析天平（Denver公司），101-4型電熱鼓風干燥箱（北京科偉永興儀器有限公司），Multiskan全波長酶標儀（Thermo公司），SQ8200型超聲波清洗器（上海冠特超聲儀器有限公司），紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；

試劑：氨基酸（AA）含量檢測試劑盒（BC1575）、淀粉含量檢測試劑盒（BC0705）、還原糖含量檢測試劑盒（BC0230）、雙縮脲法蛋白質(zhì)含量檢測試劑盒（BC3185）均購自北京索萊寶科技有限公司；葡萄糖對照品（D0806AS）購自大連美侖生物技術(shù)有限公司；人參皂苷Rb1（MUST-20060101）購自成都曼思特生物科技有限公司；蘆?。∕UST-17111601，質(zhì)量分數(shù)≥98%）、沒食子酸（810H022）、福林酚（1216O033）均購自北京索萊寶科技有限公司。

2 試驗方法

2.1 營養(yǎng)成分含量測定

營養(yǎng)成分含量主要測定總氨基酸、總蛋白質(zhì)、淀粉及還原糖含量，測定方法均是參照試劑盒方法測定。

2.1.1 總蛋白質(zhì)含量測定 組織樣本：按照組織質(zhì)量（g）：提取液按體積（mL）為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）冰浴勻漿，10 000 rpm，4℃離心10min，取上清液，參照試劑盒方法測定其含量。

2.1.2 總氨基酸含量測定 稱取約0.1g組織，加氨基酸（AA）含量檢測試劑盒（BC1575）中的試劑一1mL，室溫下充分研磨，轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，10 000 r/min，4℃離心10 min，取上清液，參照試劑盒方法測定其含量。

2.1.3 還原糖含量測定 配制濃度為1.0 mg/mL的葡萄糖對照品溶液，于540 nm波長處測定吸光度，以吸光度為橫坐標，標準品濃度為縱坐標繪制標準曲線。試驗結(jié)果表明，標準品溶液濃度在0.05~0.25 mg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，標準曲線為y=0.3816x-0.0123，R2=0.9907。

供試品溶液制備：稱取0.2 g黃精根莖組織加入2 mL還原糖含量檢測試劑盒（BC0230）中的試劑一，冰浴勻漿。轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中（防止加熱時水分散失），80℃水浴中40 min并且震蕩8~10次，8 000 g，常溫離心10 min，取上清液，參照上述標曲測定吸光度。

深靜脈血栓（DVT）是由于人體血液在深靜脈中發(fā)生異常凝結(jié)而產(chǎn)生的，最常發(fā)于人體下肢部位。若患者處于DVT發(fā)病急性期時未能及時得到有效治療，則部分血栓便會有脫落的危險，嚴重時甚至引起其肺部、腦部等主要器官發(fā)生栓塞，危及患者生命；雖然大部分患者不會有生命危險，但其患肢通常有腫脹、疼痛等癥狀，嚴重地影響到其日后生存質(zhì)量。

2.1.4 淀粉含量測定 配制濃度為1.0 mg/mL的葡萄糖對照品溶液，于540 nm波長處測定吸光度，以標準品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。試驗結(jié)果表明，標準品溶液濃度在0.02~0.40 mg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，標準曲線為y=2.1305x+0.1515，R2=0.9885。

供試品溶液制備：稱取約0.1 g樣本于研缽中研碎，加入1 mL淀粉含量檢測試劑盒（BC0705）中的試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30 min，3 000 g，常溫離心5 min，棄上清液，留沉淀。沉淀中加入0.5 mL雙蒸水，放入沸水浴中糊化15 min（蓋緊，以防止水分散失）。冷卻后，加入0.35 mL上述試劑盒中的試劑二，常溫提取15min，振蕩3~5次。加入0.85 mL雙蒸水，混勻，3 000g，常溫離心10 min，取上清液待測。

2.2 藥用成分含量測定

2.2.1 浸出物 參照2020版《中國藥典》浸出物測定方法。取供試品約2 g，精密稱定，置于100 mL的錐形瓶中，精密加80%的乙醇50 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用80%的乙醇補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25 mL，置于己干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置于干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量（%）。

2.2.2 多糖含量測定 參照2020版《中國藥典》多糖測定方法。配制質(zhì)量濃度為0.44 g/L-1的無水葡萄糖標準品溶液，采用蒽酮-硫酸顯色，在582 nm波長處測定吸光度。試驗結(jié)果表明，標準品溶液濃度在0.044~0.264 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，標準曲線為y=3.6558x+0.0379，R2=0.9961。

供試品溶液制備：取60℃干燥至恒重的黃精細粉約0.25 g，精密稱定，置于圓底燒瓶中，加80%的乙醇150 mL，置于水浴中加熱回流1 h，趁熱過濾，殘渣用80%的熱乙醇洗滌3次，每次10 mL，將殘渣及濾紙置于錐形瓶中，加水150 mL，置于沸水浴中加熱回流1h，趁熱過濾，殘渣及濾液用熱水洗滌4次，每次10 mL，合并濾液與洗液，放冷，轉(zhuǎn)移至250 mL的量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置于10 mL具塞的干燥試管中，參照標準曲線的制備項下方法測定吸光度。

2.2.3 總黃酮含量測定 參照陳怡等[10]的方法測定。配制質(zhì)量濃度為0.100 mg/mL的蘆丁標準品溶液，精確量取標準液0、1、2、3、4、5 mL置于10 mL容量瓶中，加70%的乙醇至5 mL，加0.05 g mL-1的亞硝酸鈉溶液0.3 mL，搖勻后放置6 min加0.1 g mL-1硝酸鋁0.3 mL，搖勻后放置6 min加0.04 g mL-1的氫氧化鈉4 mL，搖勻定容后，放置15 min，立即置于500 nm下測定其吸光度。以標準品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，標準品溶液濃度在0.10~0.50mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，標準曲線為y=0.5494x-0.0002，R2=0.9982。精密稱取黃精粉末0.5 g至50 mL離心管中，加入70%的乙醇15 mL，在60℃、50 Hz條件下進行超聲波輔助提取50 min，提取液經(jīng)抽濾后定容至50 mL容量瓶中。取1 mL供試液，照標曲方法測定黃精總黃酮含量。

2.2.4 總皂苷含量測定 參照焦劼[11]的方法測定。配制質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的人參皂苷Rb1標準品溶液，準確吸取該標準液60、120、180、240、300、360、420L，置于具塞刻度試管中，揮盡溶劑后加入5%的香草醛-冰醋酸溶液（現(xiàn)用現(xiàn)配）0.2 mL，冰浴加入0.8 mL高氯酸，搖勻后依次于60℃水浴加熱15 min，冰浴2 min，加入冰醋酸5 mL，搖勻，靜置5 min后于550 nm波長處測定吸光度。以標準品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。試驗結(jié)果表明，標準品溶液濃度在0~0.043 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，標準曲線為y=0.8187x+0.0077，R2=0.9992。精密稱取黃精粉末1.00 g，加入80%的乙醇15mL，60℃超聲提取30 min，提取2次，合并濾液至50 mL容量瓶中，加80%的無水乙醇溶解并稀釋到刻度搖勻。吸取供試液100L 揮干，依照上述標準曲線方法測定黃精總皂苷含量。

2.2.5 總酚含量測定 參照馮庭輝等[12]的方法測定。配制質(zhì)量濃度為0.264 mg/mL的沒食子酸標準品溶液，分別精密吸取對照品溶液0、20、40、60、80、100、120、140、160、200L置于5 mL容量瓶中，依次加入蒸餾水3.2 mL，福林酚顯色劑200L，充分振蕩后靜置6~8min，加入15%的Na2CO3溶液500L。搖勻，在室溫下避光放置反應2 h。在765 nm波長處測定吸光值。以標準品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。試驗結(jié)果表明，標準品溶液濃度在0~0.053mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，標準曲線為y=13.434x+0.0612，R2=0.9991。精確稱取黃精粉末0.5 g于試管中，加入70%的乙醇25mL，超聲提取30 min，取上清液。合并3次提取上清液，濃縮至1 mL。準確吸取40L供試液，依照上述標準曲線方法測定黃精總酚含量。

2.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)處理采用Microsoft Excel 2007進行，利用SPSS 26.0統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行方差分析和顯著性檢驗。

3 結(jié)果與分析

3.1 主要營養(yǎng)成分含量比較

黃精性味甘甜，含有大量淀粉、糖類、蛋白質(zhì)以及氨基酸，可生食亦可作為藥膳進補。5個產(chǎn)地黃精的總氨基酸、總蛋白質(zhì)、還原糖和淀粉含量見表2。上述4種成分平均含量分別為13.357 mg/g、42.673 mg/g、26.405 mg/g和36.405 mg/g。總蛋白質(zhì)的變異系數(shù)最小，為14.879%，含量在38.547~48.460 mg/g之間，表明總蛋白質(zhì)作為黃精的主要食用成分，在不同品種間差異最小，含量相對最為穩(wěn)定；其次為總氨基酸，變異系數(shù)為27.153%，變幅在9.527~18.745 mg/g；淀粉變異系數(shù)為30.844%，變幅在22.140~58.905 mg/g；變異系數(shù)最高的是還原糖含量，達53.087%，變幅在9.717~49.047 mg/g，表明還原糖含量在不同產(chǎn)地間差異最大。

表2 不同產(chǎn)地黃精主要營養(yǎng)成分含量Table 2 The main nutrient components offrom different origins （mg/g）

表2 不同產(chǎn)地黃精主要營養(yǎng)成分含量Table 2 The main nutrient components offrom different origins （mg/g）

注：同列不同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著，大寫字母表示0.01水平上差異極顯著，下同。Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant differences at 0.05 level,while uppercase letters indicate extremely significant differences at 0.01 level,the same as below.

材料來源Material source總氨基酸Total amino acid總蛋白質(zhì)Total protein還原糖Reducing sugar淀粉Starch總含量Total content貴州六枝Liuzhi,Guizhou Province 18.745±1.060Aa 41.533±0.696a 32.640±0.269Bb 58.905±4.035Aa 151.823貴州興義Xingyi,Guizhou Province 11.569±0.173Bc 38.547±0.129a 9.717±0.129Ee 37.880±1.330Bb 97.712貴州遵義Zunyi,Guizhou Province 9.527±0.265Bc 43.850±4.375a 49.047±0.357Aa 22.140±0.250Cc 124.564貴州石阡Shiqian,Guizhou Province 11.207±0.856Bc 40.977±3.403a 22.770±0.174Cc 32.700±0.730BCb 107.653四川樂山Leshan,Sichuan Province 15.740±0.197Ab 48.460±5.899a 17.850±0.117Dd 32.550±1.870BCb 114.600平均值A(chǔ)verage value 13.357 42.673 26.405 36.405最大值Max 19.805 55.690 49.560 62.940最小值Minimum 9.262 36.600 9.540 21.890極差Range 10.543 19.090 40.020 41.050標準差Standard deviation 3.627 6.349 14.017 11.229變異系數(shù)Coefficient of Variation/% 27.153 14.879 53.087 30.844

由表2可知，5種材料中總氨基酸以貴州六枝黃精的含量最高，顯著高于其余4種材料，與貴州興義、貴州遵義與貴州石阡黃精相比，達極顯著差異；各材料間的總蛋白質(zhì)含量無顯著差異；本試驗結(jié)果也表明，不同產(chǎn)地黃精的還原糖含量差異較大，貴州遵義黃精的還原糖含量最高，為49.047 mg/g，極顯著高于其他材料。貴州六枝黃精的淀粉含量最高，為58.905 mg/g，極顯著高于其余4種黃精，貴州興義、貴州石阡和四川樂山黃精的淀粉含量無顯著差異。

從上述研究結(jié)果來看，黃精均含有豐富的營養(yǎng)成分。從量上比較來看，貴州六枝黃精的營養(yǎng)成分總含量遠高于其余4種黃精，達151.823 mg/g，其余材料營養(yǎng)成分含量大小順序為貴州遵義＞四川樂山＞貴州石阡＞貴州興義。通過幾項營養(yǎng)成分的比較，發(fā)現(xiàn)貴州六枝的黃精具有較好功能食品開發(fā)的潛力。

3.2 主要藥用成分含量比較

5種黃精浸出物、多糖、總黃酮、總皂苷和總酚含量，見表3。上述5種成分的平均含量分別為71.413%、10.068%、0.557%、1.317%和0.328%。浸出物的變異系數(shù)最小，為7.449%，變幅在66.00~79.580%，表明浸出物含量相對最為穩(wěn)定；其次是總皂苷，其變異系數(shù)為12.790%，變幅在1.081~1.593%；總黃酮含量變異系數(shù)為14.533%，變幅在0.492~0.729%；總酚含量變異系數(shù)為36.425%，變幅在0.172~0.540%；變異系數(shù)為多糖含量最高，達47.834%，表明多糖含量在產(chǎn)地間差異最大。

表3 不同產(chǎn)地黃精主要藥用成分含量Table 3 The content of main medicinal components of from different origins （%）

表3 不同產(chǎn)地黃精主要藥用成分含量Table 3 The content of main medicinal components of from different origins （%）

材料來源Material source總酚Total phenol貴州六枝 Liuzhi,Guizhou Province 79.290±0.289Aa 19.115±0.821Aa 0.706±0.023Aa 1.154±0.055Cc 0.182±0.010Cd貴州興義 Xingyi,Guizhou Province 68.480±0.255Bc 8.781±0.138Bb 0.542±0.013Bb 1.552±0.026Aa 0.262±0.027BCc貴州遵義 Zunyi,Guizhou Province 76.460±1.310Ab 7.687±0.201Bbc 0.511±0.000Bb 1.315±0.066BCb 0.521±0.019Aa貴州石阡 Shiqian,Guizhou Province 68.300±0.250Bc 7.039±0.000Bc 0.501±0.009Bb 1.167±0.049Cc 0.336±0.001Bb四川樂山 Leshan,Sichuan Province 66.000±0.000Bd 7.716±0.200Bbc 0.524±0.005Bb 1.396±0.014ABb 0.339±0.007Bb平均值 Average value 71.413 10.068 0.557 1.317 0.328最大值 Max 79.580 19.721 0.729 1.593 0.540最小值 Minimum 66.000 7.039 0.492 1.081 0.172極差 Range 13.580 12.682 0.237 0.512 0.369標準差 Standard deviation 5.319 4.816 0.081 0.168 0.119變異系數(shù) Coefficient of Variation 7.449 47.834 14.533 12.790 36.425浸出物Extract多糖Polysaccharide總黃酮Total flavonoid總皂苷Total saponin

3.2.1 浸出物含量比較 貴州六枝黃精的浸出物含量最高，為79.290%，與貴州興義黃精（68.480%）、貴州石阡黃精（68.300%）和四川樂山黃精（66.000%）相比達極顯著水平，且顯著高于貴州遵義黃精（76.460%）。

3.2.2 多糖含量比較 供試材料中以貴州六枝黃精多糖含量最高，為19.115%，極顯著高于其余4種黃精（P＜0.01），貴州石阡黃精多糖含量最低，僅7.039%，其余材料多糖含量依次為貴州遵義黃精（7.687%）、四川樂山黃精（7.716%）和貴州興義黃精（8.781%），均達《中國藥典》質(zhì)量標準（以無水葡萄糖計，＞7.0%）。

3.2.3 總黃酮含量比較 總黃酮含量差異表現(xiàn)為貴州石阡黃精（0.501%）＜貴州遵義黃精（0.511%）＜四川樂山黃精（0.524%）＜貴州興義黃精（0.542%）＜貴州六枝黃精（0.706%），貴州六枝黃精總黃酮含量極顯著高于其余4種材料（P＜0.01），但這4種材料間差異不顯著（P＜0.05）。

3.2.4 總皂苷含量比較 貴州興義黃精的總皂苷含量最高，為1.552%，極顯著高于四川樂山黃精（1.396%）和貴州遵義黃精（1.315%），貴州六枝黃精總皂苷含量最低，僅1.154%，與貴州石阡黃精（1.167%）差異不顯著（P＜0.05）。

3.2.5 總酚含量比較 總酚含量以貴州遵義黃精含量最高，為0.521%，極顯著高于其余4種黃精，貴州六枝黃精總酚含量最低，僅0.182%，與貴州石阡黃精（0.336%）、四川樂山黃精（0.339%）和貴州興義黃精（0.262%）差異顯著（P＜0.05）。

4 結(jié)論與討論

不同產(chǎn)地的黃精中成分含量各有差異，涂明鋒等[13]對8個產(chǎn)地收集的多花黃精中浸出物、多糖、黃酮、多酚和礦質(zhì)元素的含量進行比較分析，結(jié)果顯示不同產(chǎn)地的多花黃精化學成分含量存在一定的差異。王丹等[14]以湖南和四川5個地區(qū)的多花黃精為試材，結(jié)果顯示不同產(chǎn)地黃精中多糖含量均較高，總皂苷含量居中，總黃酮含量均較低。本研究通過測定貴州4個產(chǎn)地及四川樂山地區(qū)的黃精營養(yǎng)成分和藥用成分發(fā)現(xiàn)，貴州六枝黃精的總氨基酸、淀粉、浸出物、多糖及總黃酮含量最高，貴州遵義黃精的還原糖和總酚含量最高，四川樂山黃精的總蛋白含量最高，貴州興義黃精的總皂苷含量最高，這可能與地理環(huán)境、氣候條件、海拔高度和采收季節(jié)等因素存在一定的關(guān)系。黃精中的浸出物、多糖、總黃酮、總皂苷和總酚的含量無一致性，因此以浸出物和多糖的含量作為黃精藥用成分的評價指標是不夠完善的，需要綜合多種化學成分來考慮。

除差異性成分外，本研究發(fā)現(xiàn)，貴州及四川樂山地區(qū)的黃精總蛋白質(zhì)含量均較高，但材料間差異不顯著，推測可能與各材料均是黃精的同一基原植物有關(guān)。關(guān)于黃精總蛋白質(zhì)的提取及其利用報道很少[15]，但蛋白質(zhì)對食品的感官品質(zhì)具有重要的影響，主要是對食品成分在加工、儲藏過程中物理特性的影響。因此，黃精具有較好開發(fā)功能食品的潛力。

貴州、四川等涼爽山區(qū)為黃精的生長提供了良好的生態(tài)環(huán)境，但由于各種因素的限制，導致不同產(chǎn)地間黃精的成分出現(xiàn)差異[16-18]。與黃精同以塊莖為食的甘薯，根據(jù)所含營養(yǎng)成分及含量，按照不同的用途分為淀粉加工型、酒精加工型、薯脯加工型、色素加工型、鮮食型、烤食型、莖葉菜用型、水果型和飼用型等[19]，黃精作為藥食同源植物，也含有豐富的氨基酸、淀粉、還原糖及蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，為更好地開發(fā)利用黃精，建議在生產(chǎn)上可根據(jù)營養(yǎng)成分和藥用成分的不同，分為淀粉加工型、果脯加工型和酒精加工型等。不局限于藥材領(lǐng)域，也可根據(jù)不同品種、不同產(chǎn)地的黃精所含營養(yǎng)成分的不同，在對黃精本身所含的營養(yǎng)成分了解的基礎(chǔ)上，盡可能最大程度地發(fā)揮黃精的營養(yǎng)功能。