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        黔產(chǎn)金釵石斛莖和花中浸出物測定

        2020-09-02 09:58:08楊婷婷劉秀平黃芯琦
        貴州科學(xué) 2020年5期

        楊婷婷,鐘 可,劉秀平,黃芯琦,韓 楷

        (貴州中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院,貴州 貴陽 550025)

        金釵石斛(DendrobiumnobileLindl.)為蘭科石斛屬植物,是2015版《中國藥典》收載的石斛藥材來源之一,具有生津益胃,清熱養(yǎng)陰的功效[1]。藥理研究表明,金釵石斛具有抗腫瘤、降血糖、增強機體免疫力等作用[2,3]。貴州省赤水市是我國金釵石斛的道地產(chǎn)區(qū)之一,生產(chǎn)的金釵石斛獲得了石斛類國家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品。金釵石斛以新鮮或干燥的草質(zhì)莖入藥,但市場上有金釵石斛花茶作為保健品使用[4]。為進(jìn)一步探究黔產(chǎn)金釵石斛的質(zhì)量,本文以貴州赤水產(chǎn)金釵石斛的莖和花為研究對象,對莖和花中的浸出物含量進(jìn)行測定,為金釵石斛的質(zhì)量研究提供參考。

        1 儀器與試藥

        1.1 儀器與試劑

        儀器:電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊公司,GZX-9070MBE)、數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海雙捷實驗設(shè)備有限公司,DRHH-S8)、分析天平(萬分之一,梅特勒-托利多上海有限公司,ME204E)、稱量紙、冷凝管(20 mL、25 mL、50 mL)、錐形瓶(250 ml)、漏斗、燒杯、蒸發(fā)皿、干燥器、膠頭滴管、玻璃棒、移液管、濾紙。

        試劑:無水乙醇、娃哈哈純凈水。

        1.2 供試藥材

        實驗樣品采集于貴州省赤水市金釵石斛仿野生種植基地,采集地點:貴州赤水旺隆鎮(zhèn);北緯28°30′50″;東經(jīng)105°52′43″;海拔 510 m。經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院鐘可副教授鑒定為蘭科植物金釵石斛(DendrobiumnobieLindl)。將金釵石斛莖除去雜質(zhì)和鮮葉,用開水略燙,將搓凈葉鞘后剪成1~3 cm的小段于烘箱中60 ℃干燥,粉碎過4號篩,置干燥容器中備用;將金釵石斛花分別陰干、曬干、30 ℃烘干、60 ℃烘干,粉碎過3號篩,置干燥容器中備用。

        表1 金釵石斛樣品來源Tab.1 Sources of Dendrobium nobile samples

        2 方法與結(jié)果

        2.1 水溶性浸出物測定

        2.1.1 方法

        冷浸法:取供試品(14號樣品,5月份采收二年生金釵石斛莖)約4 g,精密稱定,置250 mL的錐形瓶中,精密加水100 mL,密塞,冷浸,前6 h內(nèi)時時振搖,再靜置18 h,用干燥濾器(濾紙)迅速濾過,精密量取續(xù)濾液20 mL,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴上蒸干,于105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷卻30 min,迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外,以干燥品計算供試品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

        熱浸法:取供試品(14號樣品,5月份采收二年生金釵石斛莖)約4 g,精密稱定,置250 mL的錐形瓶中,精密加水100 mL,密塞,稱定重量,靜置1 h后,連接回流冷凝管,加熱至沸騰,并保持微沸1 h放冷后,取下錐形瓶,密塞,再稱定重量,用水補足減失的重量,搖勻,用干燥濾器濾過,精密量取濾液25 mL,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴上蒸干,于105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷卻30 min,迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外,以干燥品計算供試品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

        2.1.2 結(jié)果與分析

        水溶性浸出物冷浸法及熱浸法測定結(jié)果見表2、表3。

        表2 水溶性浸出物冷浸法測定結(jié)果(n=3)Tab.2 Determination results of water-soluble extracts by cold-leaching method (n=3)

        由表2、表3水溶性浸出物測定可知,冷浸法浸出物平均含量為18.23%,熱浸法浸出物平均含量為17.95%。因此金釵石斛的水溶性浸出物含量測定冷浸法效果優(yōu)于熱浸法。

        表3 水溶性浸出物熱浸法測定結(jié)果(n=3)Tab.3 Determination results of water-soluble extracts by hot-leaching method (n=3)

        2.2 醇溶性浸出物測定

        2.2.1 方法

        冷浸法:以濃度分別為10%、20%、30%、50%、75%、90%、100%的乙醇為溶劑,其余照2.1.1冷浸法項下操作,以干燥品計算供試品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

        熱浸法:以濃度分別為10%、20%、30%、50%、75%、90%、100%的乙醇為溶劑,其余照2.1.1熱浸法項下操作,以干燥品計算供試品中水溶性浸出物含量的百分值(%)。

        2.2.2 結(jié)果與分析

        醇溶性浸出物冷浸法及熱浸法測定結(jié)果見表4、表5。

        表4 醇溶性浸出物冷浸法測定結(jié)果(n=3)Tab.4 Determination results of ethanol-soluble extracts by cold-leaching method (n=3)

        表5 醇溶性浸出物熱浸法測定結(jié)果 (n=3)Tab.5 Determination results of ethanol-soluble extracts by hot-leaching method(n=3)

        由表4可知,醇溶性浸出物冷浸法以30%乙醇為溶劑提取的浸出物含量最高,為18.92%;由表5可知,醇溶性浸出物熱浸法以20%乙醇為溶劑的浸出物含量最高,為20.91%。因此在醇溶性浸出物測定中,20%乙醇為溶劑的熱浸法效果更佳。

        根據(jù)以上金釵石斛的水溶性浸出物和醇溶性浸出物測定結(jié)果,醇溶性浸出物測定以20%乙醇為溶劑的浸出物含量高于水溶性浸出物測定冷浸法的浸出物含量。因此金釵石斛浸出物的最佳測定法為以20%乙醇為溶劑的醇溶性浸出物熱浸法。

        3 黔產(chǎn)金釵石斛莖和花浸出物的含量測定結(jié)果

        照以下最佳方法測定樣品:取樣品約4 g,精密稱定,置250 mL的錐形瓶中,精密加20%乙醇100 mL,密塞,稱定重量,靜置1 h后,連接回流冷凝管,加熱至沸騰,并保持微沸l(wèi) h放冷后,取下錐形瓶,密塞,再稱定重量,用20%乙醇補足減失的重量,搖勻,用干燥濾器濾過,精密量取濾液25 mL,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴上蒸干,于105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷卻30 min,迅速精密稱定重量。計算樣品中浸出物含量的百分值(%)。結(jié)果見表6。

        表6 金釵石斛莖和花浸出物測定結(jié)果(n=2)Tab.6 Determination results of stem and flower extracts of Dendrobium nobile (n=2)

        續(xù)表6

        浸出物含量測定結(jié)果表明,不同采收時間的金釵石斛莖中浸出物的含量,2月份最高,為35.14%。不同生長年限的金釵石斛莖中浸出物的平均含量大小為:一年生(27.33%)>三年生(23.99%)>二年生(23.90%)。金釵石斛莖中浸出物的平均含量為25.07%,金釵石斛花中浸出物的平均含量高于莖的浸出物平均含量。不同干燥方式的金釵石斛花中浸出物含量大小為:陰干>60 ℃烘干>30 ℃烘干>曬干。

        4 結(jié)論

        金釵石斛水溶性和醇溶性浸出物實驗結(jié)果表明:在水溶性浸出物測定中,冷浸法效果優(yōu)于熱浸法,浸出物含量最高,為18.23%。醇溶性浸出物的測定,采用不同濃度的乙醇試劑進(jìn)行實驗,以20%乙醇為溶劑的熱浸法浸出物的含量最高,為20.91%。因此對于金釵石斛浸出物測定最佳方法是醇溶性熱浸法,溶劑為20%乙醇。

        通過測定36批不同采收月份的金釵石斛莖的浸出物含量,2月份最高,為35.14%。不同生長年限的金釵石斛莖中浸出物的含量大小為:一年生>三年生>二年生,建議2月份采收一年生金釵石斛莖質(zhì)量最佳。不同干燥方式的金釵石斛花中浸出物含量測定結(jié)果表明:采用陰干法的樣品浸出物含量最高,為33.03%,曬干含量最低,為28.56%。故金釵石斛花不建議采用暴曬的方式進(jìn)行干燥。此外,金釵石斛花中的浸出物含量高于金釵石斛莖中的平均含量,表明金釵石斛花有廣闊的開發(fā)前景。本實驗測定黔產(chǎn)金釵石斛莖和花的浸出物含量,對于研究黔產(chǎn)金釵石斛的質(zhì)量以及金釵石斛花的資源開發(fā)利用提供了有價值的參考資料。

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