王 丹，劉亞西，周 揚(yáng)，黎 彬，聶書明

（西華師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 西南野生動(dòng)植物資源保護(hù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 四川 南充 637009）

土壤鹽漬化是當(dāng)前全球范圍內(nèi)所面臨的生態(tài)問題，嚴(yán)重威脅著生態(tài)安全和農(nóng)牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[1]。探索適宜在鹽堿地栽培生產(chǎn)且具有較高經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值的植物，是開發(fā)和利用鹽堿地資源較為經(jīng)濟(jì)有效的途徑之一[2]。多年生黑麥草(Lolium perenne)具有耐踐踏、適應(yīng)土壤范圍廣、色澤靚麗、建植速度快、抗病蟲害能力強(qiáng)等特性，目前已被廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)養(yǎng)殖、地被植物水土保持和土壤生態(tài)修復(fù)等方面[3-4]。探索黑麥草耐鹽高效的栽培模式，不僅為土壤鹽漬化地區(qū)黑麥草農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及草地改良提供科學(xué)依據(jù)，而且對(duì)鹽堿地資源高效利用及農(nóng)牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展等方面均具有重大的應(yīng)用價(jià)值。

鹽脅迫擾亂了植物細(xì)胞內(nèi)離子平衡，誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)積累過多的活性氧引起氧化脅迫，使胞內(nèi)膜脂過氧化程度加大，進(jìn)而損傷膜的完整性，從而喪失了對(duì)離子的選擇性吸收功能，最終導(dǎo)致植物的生理代謝紊亂，甚至植株死亡[5]。植物為了應(yīng)對(duì)過多活性氧的積累對(duì)其自身產(chǎn)生的傷害，進(jìn)化出一套復(fù)雜的抗氧化防御系統(tǒng)，包括各種抗氧化酶和非酶分子，來共同抵御各種環(huán)境脅迫對(duì)植物造成的不利影響[6]。有研究表明施加外源水楊酸、褪黑素、2, 4-表油菜素內(nèi)酯(2, 4-epibrassinolide, EBR)和一氧化氮信號(hào)分子等可促進(jìn)非生物脅迫條件下種子萌發(fā)[7-10]。

油菜素內(nèi)酯(brassinosteroids, BRs)是一類不僅在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用，而且在植物抗逆性方面也發(fā)揮重要作用的植物新型激素[11]。研究表明在玉米(Zea mays)種子播種前進(jìn)行BRs 浸種處理，可通過刺激植株體內(nèi)抗氧化防御功能成分，有效克服鹽堿脅迫對(duì)植株的損傷[12]。EBR 對(duì)NaCl 脅迫下紫花苜蓿(Medicago sativa)幼苗根系生長(zhǎng)抑制及氧化損傷具有緩解效應(yīng)[13-14]。在擬南芥(Arabidopsis thaliana)中發(fā)現(xiàn)鹽脅迫條件下BRs 信號(hào)可能通過調(diào)節(jié)氣孔密度和氣孔導(dǎo)度來減少葉片水分散失，進(jìn)而提高植物耐鹽性[15]。應(yīng)用EBR 提高了鹽脅迫下水稻(Oryza sativa)的抗氧化酶活性、脯氨酸和可溶性蛋白含量[16]。在鹽脅迫下噴施EBR 緩解了辣椒(Capsicum annuum)葉片中電解質(zhì)、脯氨酸和葉綠素含量的升高，進(jìn)而減輕了鹽脅迫的效果[17]。EBR 抑制了番茄(Solanum lycopersicum)植株體內(nèi)Na+從根部向地上部的運(yùn)輸，降低了多胺濃度，最終提高了番茄的耐鹽性[18]。關(guān)于EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草的影響，有研究將EBR 和鹽溶液同時(shí)加入裝有無菌黑麥草幼苗的MS 培養(yǎng)基中，結(jié)果表明EBR 可提高鹽脅迫下黑麥草幼苗的耐鹽性[19]。而針對(duì)EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草種子萌發(fā)過程的影響、如何提高黑麥草幼苗的抗鹽性及其與滲透調(diào)節(jié)和抗氧化特性之間的關(guān)系卻鮮有報(bào)道。

基于此，本研究在鹽脅迫下，分別對(duì)黑麥草種子和幼苗進(jìn)行EBR 處理，探討EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草種子萌發(fā)、淀粉酶活性、幼苗生長(zhǎng)、幼苗滲透調(diào)節(jié)和抗氧化酶特性等方面的影響，旨在為土壤鹽漬化地區(qū)黑麥草耐鹽高效栽培管理提供理論依據(jù)和生產(chǎn)實(shí)踐指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

黑麥草雅晴(Yatsyn)種子購(gòu)自百綠國(guó)際草業(yè)有限公司；EBR 購(gòu)自上海源葉生物技術(shù)有限公司，用少量無水乙醇充分溶解后，用雙蒸水分別稀釋至工作液濃度。

1.2 試驗(yàn)處理

種子處理包括CK 處理(蒸餾水)、EBR 處理(0.01 μmol·L-1EBR 溶液)、 NaCl 100 處理 (100 mmol·L-1NaCl 鹽溶液)、NaCl 100 + EBR 處理(100 mmol·L-1NaCl 和0.01 μmol·L-1EBR 溶液)、 NaCl 150 處理(150 mmol·L-1NaCl 鹽溶液)和NaCl 150 +EBR 處理(150 mmol·L-1NaCl 和0.01 μmol·L-1EBR溶液)。將種子置于使用處理溶液潤(rùn)濕的鋪有雙層濾紙的潔凈培養(yǎng)皿中進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，每處理100 粒種子，3 次重復(fù)，在光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行試驗(yàn)，溫度25 ℃，晝夜時(shí)長(zhǎng)各為12 h，相對(duì)濕度70%。

幼苗生長(zhǎng)試驗(yàn)，將出芽15 d 的幼苗移栽到直徑7 cm 的方形營(yíng)養(yǎng)缽中(營(yíng)養(yǎng)土 ∶ 蛭石 = 2 ∶ 1，V ∶ V)，置于植物培養(yǎng)間中，光照16 h，溫度(26 ± 2) ℃，黑暗8 h，溫度(24 ± 2) ℃，相對(duì)濕度70%。對(duì)生長(zhǎng)60 d的黑麥草幼苗進(jìn)行葉片正面噴施，每天早上對(duì)每株葉片正面均勻噴施，連續(xù)噴施3 d。噴施完成的第2 天，進(jìn)行澆灌處理，為鹽脅迫處理的開始。試驗(yàn)處理包括CK 處理(噴施相同體積的蒸餾水，澆灌蒸餾水)、EBR 處理(噴施含0.1 μmol·L-1EBR 溶液，澆灌蒸餾水)、NaCl 處理(噴施相同體積的蒸餾水，澆灌含250 mmol·L-1NaCl 鹽溶液)和NaCl + EBR 處理(噴施含0. 1 μmol·L-1EBR 溶液，澆灌含250 mmol·L-1NaCl 鹽溶液)，在培養(yǎng)間進(jìn)行正常栽培管理。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

種子發(fā)芽處理第3 天時(shí)，取樣測(cè)定種子淀粉含量和α 淀粉酶活性，處理第5 天統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽勢(shì)，第12 天統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽數(shù)、株高、活力指數(shù)、鮮重、根系活力。幼苗脅迫處理第10 天取樣進(jìn)行抗氧化酶活性、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、可溶性蛋白、可溶性糖含量、葉綠素含量等生理指標(biāo)測(cè)定。

抗氧化酶活性、可溶性糖和可溶性蛋白含量等指標(biāo)的測(cè)定取植株葉片為試驗(yàn)材料[16]；根系活力應(yīng)用TTC 還原法測(cè)定，具體操作參考李合生[20]的測(cè)定步驟；淀粉含量、α-淀粉酶活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、 過氧化物酶(peroxidase, POD)活性、過氧化氫酶(catalase, CAT)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)活性、可溶性糖(soluble sugar, SS)含量和可溶性蛋白(soluble protein, SP)含量測(cè)定方法根據(jù)蘇州格銳思生物科技公司的試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定。丙二醛含量通過與硫代巴比妥酸(TBA)反應(yīng)，然后進(jìn)行比色的方法測(cè)定，參考李合生[20]的測(cè)定步驟。

各發(fā)芽指標(biāo)計(jì)算公式如下：

式中:Gt為第t天的發(fā)芽數(shù)，Dt為相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)。

活力指數(shù)(vitality index，VI) =GI×S。

式中:GI為發(fā)芽指數(shù)，S為發(fā)芽t時(shí)間的根長(zhǎng)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用Excel 2010 軟件處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)并作圖，應(yīng)用SPSS 19.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，利用Duncan’s 多重比較進(jìn)行差異顯著性分析(P＜ 0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草種子萌發(fā)的影響

與對(duì)照相比，150 mmol·L-1NaCl 脅迫顯著降低了黑麥草種子的發(fā)芽率(P＜ 0.05)，而外源EBR 處理后黑麥草種子的發(fā)芽率較該濃度鹽脅迫顯著提高(P＜ 0.05) (表1)。100 和150 mmol·L-1NaCl 脅迫下種子的發(fā)芽勢(shì)分別比對(duì)照降低了17.96%和31.15%(P＜ 0.05)；外源EBR 處理后發(fā)芽勢(shì)分別較各自濃度鹽脅迫提高了10.95%和9.57% (P＜ 0.05)。100 和150 mmol·L-1NaCl 脅迫下種子的活力指數(shù)分別比對(duì)照降低了48.99%和70.70% (P＜ 0.05)，外源EBR 處理后種子活力指數(shù)分別較各自濃度鹽脅迫提高了23.86%和22.82% (P＜ 0.05)。100 和150 mmol·L-1NaCl脅迫下黑麥草的株高顯著降低(P＜ 0.05)，而且150 mmol·L-1NaCl 脅迫下株高降低更明顯，外源EBR處理100 mmol·L-1NaCl 后株高較該濃度鹽脅迫處理顯著升高(P＜ 0.05)。這些結(jié)果表明100 和150 mmol·L-1NaCl 脅迫均顯著抑制了黑麥草種子的萌發(fā)和生長(zhǎng)(P＜ 0.05)，而外源EBR 處理可以緩解NaCl脅迫對(duì)黑麥草種子萌發(fā)的抑制作用。

100 mmol·L-1NaCl 和150 mmol·L-1NaCl 處理下黑麥草α-淀粉酶活性比對(duì)照分別降低了27.51%和53.44% (P＜ 0.05)，表明鹽脅迫抑制了黑麥草α-淀粉酶的活性(表1)。100 mmol·L-1NaCl + 0.01 μmol·L-1EBR 處理比100 mmol·L-1NaCl 處理的α-淀粉酶活性顯著提高15.61% (P＜ 0.05)；而150 mmol·L-1NaCl +0.01 μmol·L-1EBR 處理的α-淀粉酶活性與150 mmol·L-1NaCl 處理的無顯著差異(P ＞0.05)。鹽脅迫處理抑制了種子萌發(fā)過程中淀粉的分解，100 mmol·L-1NaCl 脅迫處理下，外源EBR 處理比無EBR脅迫處理組的淀粉含量顯著降低12.75% (P＜ 0.05)。以上結(jié)果表明EBR 能夠提高100 mmol·L-1NaCl 脅迫下黑麥草種子的α-淀粉酶活性，并進(jìn)一步促進(jìn)淀粉的代謝分解。

表1 外源油菜素內(nèi)酯對(duì)NaCl 脅迫下黑麥草種子萌發(fā)期指標(biāo)的影響Table 1 Effect of exogenous 2, 4-epibrassinolide on germination indexes of ryegrass seeds under NaCl stress

2.2 外源EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草鮮重和根系活力的影響

鹽脅迫顯著抑制了黑麥草的鮮重(P＜ 0.05)，100 和150 mmol·L-1NaCl 脅迫下鮮重分別比對(duì)照降低了分別比對(duì)照降低了10.17% 和42.73% (圖1)。150 mmol·L-1NaCl 脅迫下，外源添加EBR 處理比未添加EBR 處理鮮重提高了21.37%(P＜ 0.05)。與此同時(shí)，100 和150 mmol·L-1NaCl 脅迫處理下根系活力分別比對(duì)照降低了17.32%和60.02% (P＜ 0.05)；而在150 mmol·L-1NaCl 處理下添加EBR 處理比未添加EBR 處理下根系活力顯著提高了42.91% (P＜ 0.05)。

圖1 外源油菜素內(nèi)酯對(duì)NaCl 脅迫下黑麥草鮮重和根系活力的影響Figure 1 Effect of exogenous 2, 4-epibrassinolide on fresh weight and root activity of ryegrass under NaCl stress

2.3 外源EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草幼苗葉片的丙二醛含量和抗氧化酶活性的影響

250 mmol·L-1NaCl 脅迫顯著增加了黑麥草幼苗體內(nèi)膜脂過氧化產(chǎn)物MDA 的含量(P＜ 0.05)，NaCl處理10 d 后，MDA 含量比對(duì)照顯著增加了38.42% (P＜0.05)；外源EBR 處理黑麥草幼苗體內(nèi)MDA 含量比NaCl 處理顯著降低了14.57% (P＜ 0.05) (圖2)。

與對(duì)照相比，250 mmol·L-1NaCl 脅迫下，黑麥草幼苗體內(nèi)SOD、CAT、POD 和GPX 活性顯著升高(P＜0.05)，而外源EBR 和NaCl 共同處理下進(jìn)一步提高了黑麥草幼苗體內(nèi)抗氧化酶活性(圖2)。NaCl 處理10 d后，SOD、CAT、POD 和GPX 活性分別比對(duì)照提高了21.42%、13.87%、10.67%和33.96%；外源EBR 和NaCl共同處理下SOD、CAT、POD 和GPX 活性比NaCl脅迫處理提高了12.6%、 5.11%、 8.73%和4.44%。以上結(jié)果表明外源EBR 可以進(jìn)一步提高NaCl 處理下黑麥草幼苗體內(nèi)抗氧化酶活性來降低MDA 含量。

圖2 外源油菜素內(nèi)酯對(duì)NaCl 脅迫下黑麥草幼苗葉片丙二醛含量和抗氧化酶活性的影響Figure 2 Effect of exogenous 2, 4-epibrassinolide on malondialdehyde and antioxidant enzyme activity in ryegrass seedling leaves under NaCl stress

2.4 外源EBR 對(duì)鹽脅迫下黑麥草幼苗葉片可溶性糖、可溶性蛋白和葉綠素含量的影響

250 mmol·L-1NaCl 脅迫顯著增加了黑麥草幼苗體內(nèi)可溶性糖和可溶性蛋白含量(P＜ 0.05)，NaCl 處理10 d 后，可溶性糖和可溶性蛋白含量分別比對(duì)照增加了28.98%和31.56% (圖3)。外源EBR 和NaCl共同處理下黑麥草幼苗體內(nèi)可溶性糖和可溶性蛋白含量分別比NaCl 處理提高了13.9%和8.31%。

在正常生長(zhǎng)條件下，外源噴施EBR 輕微增加了NaCl 脅迫下的黑麥草幼苗體內(nèi)葉綠素a 含量；250 mmol·L-1NaCl 脅迫下，黑麥草幼苗體內(nèi)葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類胡蘿卜素含量顯著下降(P＜ 0.05)，EBR 在一定程度上可以抑制NaCl 脅迫導(dǎo)致的葉綠素含量下降(圖3)。NaCl 處理10 d 后，葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類胡蘿卜素含量分別比對(duì)照降低了46.54%、48.25%、43.79%和46.97%；EBR 和NaCl共同處理下黑麥草幼苗體內(nèi)葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類胡蘿卜素含量比NaCl 處理提高了24.74%、25.18%、24.86%和8.49%。表明250 mmol·L-1NaCl脅迫下，添加外源EBR 能顯著改善NaCl 脅迫對(duì)黑麥草光合色素的影響。

圖3 外源油菜素內(nèi)酯對(duì)NaCl 脅迫下黑麥草幼苗葉片可溶性糖、可溶性蛋白和葉綠素含量的影響Figure 3 Effect of exogenous 2, 4-epibrassinolide on soluble sugar, soluble protein, and chlorophyll content in ryegrass seedling leaves under NaCl stress

3 討論與結(jié)論

植物在生長(zhǎng)的不同階段對(duì)脅迫的耐受性不同，對(duì)于大多數(shù)植物而言，種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)階段對(duì)脅迫最為敏感[21]。黑麥草種子萌發(fā)時(shí)對(duì)鹽脅迫敏感，而且隨著脅迫程度的增加，傷害程度也加重[22]。目前有研究報(bào)道表明應(yīng)用水楊酸、褪黑素、EBR、一氧化氮等外源物質(zhì)可以促進(jìn)非生物脅迫條件下種子萌發(fā)[7-10]。Wang 等[23]研究表明，BRs 通過與乙烯合成的相互作用來減輕鹽脅迫對(duì)黃瓜(Cucumis sativus)種子萌發(fā)的抑制作用。其他研究表明，BRs與根發(fā)育的許多方面有關(guān)，如分生組織大小的維持、根毛的形成、側(cè)根的發(fā)生、重力反應(yīng)、菌根的形成和豆科植物的結(jié)瘤等[24]。本研究表明，鹽脅迫降低了黑麥草種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、活力指數(shù)以及發(fā)芽后的鮮重和根系活力，而EBR 緩解了鹽脅迫對(duì)黑麥草種子這些指標(biāo)的影響。鹽脅迫也抑制了黑麥草種子α-淀粉酶的活性，進(jìn)而導(dǎo)致淀粉含量顯著高于對(duì)照。EBR 提高了鹽脅迫下黑麥草種子的α-淀粉酶活性，進(jìn)一步促進(jìn)了淀粉的代謝分解，最終降低了黑麥草的淀粉含量。

植物對(duì)鹽脅迫的適應(yīng)性和耐受性涉及復(fù)雜的生理生化反應(yīng)、代謝途徑和信號(hào)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，包括分子、代謝和生理水平上對(duì)鹽脅迫的各種適應(yīng)性反應(yīng)[25-26]。有研究表明，鹽脅迫能導(dǎo)致植株幼苗活性氧代謝失調(diào)并引發(fā)膜脂過氧化作用，進(jìn)而使得植株幼苗生長(zhǎng)受到抑制[27]。本研究利用有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土種植黑麥草幼苗，通過葉面噴施EBR 顯著緩解了250 mmol·L-1NaCl 處理對(duì)黑麥草幼苗生長(zhǎng)的抑制效果。正常生長(zhǎng)條件下植物體內(nèi)的活性氧代謝處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，當(dāng)植物遭受逆境脅迫時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生過多的活性氧(reactive oxygen species，ROS)，進(jìn)而對(duì)植物造成傷害。鹽脅迫下產(chǎn)生的過多ROS 能引起植株細(xì)胞膜脂過氧化，MDA 是膜脂過氧化產(chǎn)物，其含量的高低是反映細(xì)胞膜脂過氧化作用強(qiáng)弱和質(zhì)膜破壞程度的重要指標(biāo)[18]。本研究中NaCl 脅迫顯著提高了黑麥草體內(nèi)MDA 含量，而添加EBR 顯著降低了NaCl脅迫下黑麥草體內(nèi)MDA 的含量，表明NaCl 脅迫增加了黑麥草體內(nèi)膜脂過氧化程度，而EBR 降低了NaCl 脅迫下黑麥草體內(nèi)膜脂過氧化程度，進(jìn)而對(duì)黑麥草體內(nèi)細(xì)胞完整性起到較好的保護(hù)作用。植物在進(jìn)化過程中形成了活性氧清除系統(tǒng)用于防御脅迫產(chǎn)生的活性氧傷害。活性氧清除的主要酶類，能有效地清除植物體內(nèi)過量的自由基，增強(qiáng)植物適應(yīng)脅迫的能力。本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，黑麥草體內(nèi)的SOD、POD、CAT、APX 等主要保護(hù)酶在鹽脅迫下活性增強(qiáng)，經(jīng)EBR 處理后，這些酶的活性進(jìn)一步增強(qiáng)，進(jìn)而可以有效清除鹽脅迫下引起的過多活性氧對(duì)黑麥草細(xì)胞的傷害，這與EBR 顯著降低了NaCl 脅迫下黑麥草體內(nèi)膜脂過氧化產(chǎn)物MDA 含量的結(jié)果相一致。這些結(jié)果也與BRs 能通過調(diào)控滲透物質(zhì)含量和抗氧化酶系統(tǒng)等緩解鹽脅迫對(duì)燕麥(Avena sativa)種子萌發(fā)的傷害結(jié)果一致[9]。

在鹽脅迫下的黑麥草幼苗經(jīng)EBR 處理后，其體內(nèi)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)可溶性蛋白和可溶性糖等含量明顯增加，滲透調(diào)節(jié)能力增強(qiáng)，進(jìn)一步降低了鹽脅迫引起的傷害[12]。外源EBR 降低了NaCl 依賴性脂質(zhì)過氧化的程度，提高了葉片細(xì)胞的滲透勢(shì)；鹽脅迫下EBR 的保護(hù)作用可能與EBR 的抗氧化作用有關(guān)，通過維持細(xì)胞內(nèi)離子平衡來調(diào)節(jié)植物保持水分平衡的能力[28]。本研究表明，EBR 處理促進(jìn)了黑麥草體內(nèi)可溶性糖和可溶性蛋白等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的積累，從而增強(qiáng)了植株在NaCl 脅迫下滲透調(diào)節(jié)的能力，最終減輕了鹽脅迫對(duì)植株造成的傷害。Oliveira 等[29]研究表明，EBR 處理改善了離子平衡，減輕了鹽脅迫對(duì)尾葉桉(Eucalyptus urophylla)幼苗的傷害程度，提高了組織的營(yíng)養(yǎng)成分含量?？芙瓭蛶熒卸Y[13]研究表明，EBR 能減輕鹽脅迫對(duì)苜蓿幼苗的光抑制作用，加快有機(jī)物的合成，維持植株體內(nèi)離子代謝平衡，進(jìn)而增強(qiáng)苜蓿幼苗的耐鹽性。

葉綠素在植物光合作用過程中發(fā)揮著吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化光能的作用，而且植物葉綠素含量的高低與光合作用強(qiáng)弱直接相關(guān)[21]。鹽脅迫會(huì)導(dǎo)致植物細(xì)胞中鹽離子的積累，造成葉綠素代謝平衡被破壞，進(jìn)而導(dǎo)致葉綠素降解速度加快，嚴(yán)重時(shí)還可能破壞葉綠體結(jié)構(gòu)，最終影響植物光合作用能力的強(qiáng)弱[21,30]。本研究中，鹽脅迫使葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類胡蘿卜素含量均顯著下降，而應(yīng)用EBR 明顯緩解了光合色素含量的下降。表明EBR 可以通過緩解鹽脅迫下光合色素含量的下降來提高黑麥草幼苗的抗鹽性。

綜上所述，本研究結(jié)果表明應(yīng)用0.01 μmol·L-1EBR 溶液對(duì)黑麥草進(jìn)行浸種處理，可以有效緩解100 mmol·L-1NaCl 脅迫對(duì)黑麥草種子發(fā)芽勢(shì)和活力指數(shù)的影響，并提高了α-淀粉酶活性和根系活力。通過對(duì)黑麥草幼苗葉片噴施0.1 μmol·L-1EBR 溶液減輕了250 mmol·L-1NaCl 脅迫對(duì)黑麥草幼苗的傷害程度，本研究結(jié)果表明EBR 可能主要通過以下幾方面來緩解鹽脅迫對(duì)植物造成的傷害：一是EBR 提高了鹽脅迫下黑麥草幼苗可溶性糖和可溶性蛋白含量，從而增強(qiáng)了鹽脅迫下黑麥草幼苗的滲透調(diào)節(jié)能力；二是EBR 通過緩解鹽脅迫下光合色素含量的下降來提高黑麥草幼苗的抗鹽性；三是EBR 增強(qiáng)了鹽脅迫下黑麥草幼苗的抗氧化酶活性，進(jìn)而有效減輕過多活性氧對(duì)黑麥草細(xì)胞造成的傷害，從而降低了膜脂過氧化產(chǎn)物丙二醛的含量，最終減輕了鹽脅迫對(duì)植株造成的傷害。