蔣婷 劉軍 竇現鵬 陳國統(tǒng)

摘要：目的：探討乙型肝炎病毒（HBV）酶免檢測和核酸檢測的在無償獻血者篩查的應用效果。方法：，研究時間2019年2月-2021年5月進行無償獻血的1940名研究對象血清標本，所有研究對象均接受酶聯(lián)免疫實驗檢測和核酸檢測;以金標準檢查為標準，比較兩種檢查方式的結果，敏感度、特異度、準確率。結果：NAT檢測敏感度、特異度、準確率均高于ELISA檢測，比較差異有統(tǒng)計學意義，P<0.05。結論：探討乙型肝炎病毒（HBV）核酸檢測的準確度高，特異度、敏感度高，能夠及時反應患者獻血者的HBV病毒感染情況，對臨床的診療無償獻血者篩查，保證臨床用血安全具有積極的作用。

關鍵詞：乙型肝炎病毒;酶免檢測;核酸檢測

乙型肝炎是一種具有傳染，高發(fā)病率的一種疾病。乙型 肝 炎 病 毒 （ hepatitis B virus，HBV） 以血液傳播為主要傳播途徑，因此對于獻血者進行乙型肝炎篩查是避免乙型肝炎病毒傳播，保證輸血安全的重要途徑。在臨床針對HBV病毒的篩查中，酶聯(lián)免疫吸附試驗 （enzyme - linked immunosor- bent assay，ELISA） 是常用的檢測手段，其特點具有價格低，檢查速度快，靈敏度高等特點。但是此種方法容易受到機體的HBV病毒感染的窗口期，病毒滴度低等多種因素影響而對檢查結果有影響。而乙型肝炎病毒核糖核酸（hepatitis B virus deoxyribonucleic acid，HBV - DNA）是通過病毒的DNA的復制、存在等直接反映的重要標準，可以更直觀的了解病毒的復制、傳染情況，更利于臨床對疾病的診療及監(jiān)測評估。本文主要探討乙型肝炎病毒（HBV）酶免檢測和核酸檢測的應用效果，研究時間2019年2月-2021年5月，進行無償獻血的1940名研究對象血清標本，現整理如下。

1資料與方法

1.1一般信息

研究時間2019年2月-2021年5月，進行無償獻血的1940名研究對象血清標本，年齡20-65歲，平均（48.91±3.26）歲;男性1000名，女性940名;所有人員均知情且同意。

1.2方法

所有研究對象均采取2分血液樣本，其中一份進行酶免檢測， 陽性判斷標準： HBsAg > 0. 5 ng/ml，HBsAb >0.5 ng/ml，HBeAg >0.5 ng/ml，HBeAb >0.77 U/ml，HBcAb >4.57 U/ml。

另一份進行NAT檢測，進行低溫離心機下離心并在2～6 ℃冰箱保存待檢，先做 HBsAg 酶免試驗篩查后再按上述實驗規(guī)則標準篩選出的核酸標本在72 h 內完成 HBV 核酸檢測。核酸檢測實驗采用8混樣模式中的核酸檢測方法，為了確保檢測的準確性，嚴格按照核酸檢測實驗操作規(guī)程和試劑說明書中的要求進行檢測。陽性判斷標準： HBV -DNA 含量 （lg） >2. 7。

1. 3 觀察指標

以金標試紙法為參考，分析 ELISA、NAT 檢測HBV 的敏感度、特異度、準確度。

1.4統(tǒng)計學處理

通過統(tǒng)計學處理軟件SPSS24.0，完成數據分析，以（x±s）表示計量資料，并進行t檢驗;以百分比表示計數資料，χ2檢驗。以P<0.05的差異表示具有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1兩種檢測與金標準結果統(tǒng)計

2.2兩種檢測敏感度、特異度、準確率比較

NAT檢查敏感度、特異度、準確率均高于ELISA檢查，比較差異有統(tǒng)計學意義，P<0.05。

3討論

目前臨床利于輸血治療的血液來源主要為無償獻血，對于無償獻血的血源的健康性是保障輸血安全的重點。乙型肝炎是常見的一種血液傳染性疾病，對人體造成的損傷大。隨著近年來乙型肝炎的發(fā)病率呈現逐年上升的趨勢，對乙型肝炎病毒的有效檢測是保證輸血治療安全的重點。

目前臨床對于乙型肝炎病毒的檢測主要采用酶聯(lián)免疫檢測，ELISA檢測是通過抗體-抗原的特異性反應，檢出制定病毒的存在，但ELISA檢測抗體有一定的濃度要求，病毒進入人體后機體產生免疫應答反應，需經歷一段時間的病毒復制和抗體的產生才能被檢出，因此，該方法的檢測“窗口期”相對長一些，一旦檢查結果顯示為陽性，判斷則為乙型肝炎病毒感染。但是在實際的應用中，可能會存在血液樣本非典型血清轉陽、病毒變異以及低滴度抗原產生的情況，增加了漏檢風險。NAT是利用PCR擴增的原理，將血液樣本中的病毒核酸進行擴增，使其含量增加到可以檢測出的水平的方法，若血液中存在未知病毒，則可通過核酸檢測技術檢測出病毒的存在，應用以來，由于其靈敏度較高，特異性好，在臨床廣為應用，但NAT技術對檢測人員的操作水平和血液樣本要求較高，出現假陽性的比例較大。

本次研究結果顯示，NAT檢查敏感度、特異度、準確率均高于ELISA檢查，比較差異有統(tǒng)計學意義，P<0.05。說明探討乙型肝炎病毒（HBV）核酸檢測的準確度高，特異度、敏感度高，能夠及時反應患者無償獻血者的HBV病毒感染情況，對臨床的診療保證臨床用血安全具有積極的作用。

現階段我國血站的檢測流程主要為首先使用兩種以上的酶免試劑對血液樣本進行酶免檢測，確定為合格的樣本再進行一種試劑的核酸檢測，這種方法不僅能夠避免因試劑間差異和靈敏度不同造成的誤漏，而且能夠檢測出因處于窗口期病毒抗體量少造成的漏檢問題，同時，由于核酸檢測的成本較高，也在一定程度上節(jié)約試劑成本。這就要求我們檢驗人員應加強對檢測工作的重視，加強檢測技術和知識的學習與培訓，通過豐富的檢測經驗合理利用兩種檢測技術，不斷提高血液檢測結果的準確性，確保血液供給的安全。

參考文獻

[1]張輝，吳冬生，方敏，等 . 熒光定量PCR法與酶聯(lián)免疫吸附試驗在乙型肝炎病毒檢測中的應用[J].解放軍預防醫(yī)學雜志，2017，35 （11）： 1459 -1461.

[2]高永慶. 化學發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測乙型肝炎病毒標志物比較 [J]. 臨床軍醫(yī)雜志，2019，47 （2）：215 -216.

[3]龐棟，姜瑩，張翙，等. 電化學發(fā)光免疫分析法聯(lián)合核酸檢測在酶聯(lián)免疫吸附試驗雙試劑 HBsAg + / - 獻血者歸隊篩查中的應用[J].廣西醫(yī)學，2018，40 （19）： 2346 -2348.

[4]曹華琳，劉亞軍. 核酸檢測與酶聯(lián)免疫檢測對輸血相關傳染性疾病的檢測效果比較分析[J].心腦血管病防治，2019，19 （2）：171 -173.

[5]Lin Y，Gao Z X，Shen X，et al. Correlation between polymorphisms in toll - like receptor genes and the activity of hepatitis B virus among treatment - nave patients： a case - control study in a Han Chinese population[J]. BMC Infectious Diseases，2018，18 （1）： 28.

[6]張毓，孫國棟，張麗，等 . 9 例核酸反應性標本與對應 ELISA、CLIA 法檢測 HBV 的關聯(lián)分析[J].臨床輸血與檢驗，2018，20 （2）： 98 -100.