董楠，李明智，徐德昌，陳曉敏，諶淑平，潘世杰，王玉簫，劉文婷，胡婕倫，鐘虹光，堯梅香，謝明勇，聶少平*

（1.南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中加食品科學(xué)技術(shù)聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室（南昌），江西 南昌 330047；2.江中食療科技有限公司，江西 九江 330000）

“藥食同源”食材因具有食養(yǎng)特性受到廣泛關(guān)注[1]。在“藥食同源”食材中，食用菌因具有許多保健功能，成為食療的矚目對(duì)象[2]。多糖是食用菌中發(fā)揮功效的重要活性物質(zhì)，其中，銀耳多糖（Tremella fuciformis polysaccharide）具有抗衰老、降血糖、降血脂的作用[3-4]；茯苓多糖（Poria cocos polysaccharide）具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等作用[5]；香菇多糖（lentinan）具有抗氧化、抗病毒、抗炎性損傷等作用，被廣泛應(yīng)用于臨床輔助治療腫瘤[6]；猴頭菇多糖（Hericium erinaceus polysaccharide）具有改善胃腸道功能、抗腫瘤、抗衰老、降血脂等生理功能[7]。竹蓀多糖（Dictyophora indusiata polysaccharide）在抗炎[8]、抗氧化[9-10]、抗腫瘤[11-14]等方面都有一定的效果。機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)活性與這些生理功能息息相關(guān)，這是因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)的正常運(yùn)行與否與機(jī)體各種生理和病理功能密切相關(guān)，例如炎癥、癌癥和腫瘤等的發(fā)生皆是機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂的結(jié)果[15]。然而，由于多糖的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，不同來源的多糖對(duì)不同類型免疫細(xì)胞的刺激程度可能有所差別。因此，通過調(diào)節(jié)不同來源多糖的配比，復(fù)配多糖將能發(fā)揮出更顯著的免疫調(diào)節(jié)作用[16]。

機(jī)體免疫系統(tǒng)包括特異性免疫和非特異性免疫，巨噬細(xì)胞在其中起到橋梁連接作用，生理功能廣泛。因此，巨噬細(xì)胞在機(jī)體免疫系統(tǒng)中占據(jù)重要地位。當(dāng)抗原入侵人體時(shí)，作為重要防御之一的巨噬細(xì)胞釋放的免疫介質(zhì)發(fā)揮重要作用。同理，當(dāng)人體受到機(jī)械損傷或病理刺激時(shí)，巨噬細(xì)胞被激活，吞噬能力增強(qiáng)，并分泌各種細(xì)胞因子[17-21]。因此，若要對(duì)某一功能成分進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)作用體外研究，小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7是理想模型。本試驗(yàn)以RAW264.7細(xì)胞為研究對(duì)象，構(gòu)建非炎癥模型，脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）為陽(yáng)性對(duì)照，銀耳多糖、茯苓多糖、香菇多糖、猴頭菇多糖、竹蓀多糖及其復(fù)配多糖為樣品對(duì)照，探究這5種多糖及復(fù)配多糖對(duì)巨噬細(xì)胞的細(xì)胞活力、吞噬能力、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）分泌水平的影響，評(píng)價(jià)這5種多糖及復(fù)配多糖的免疫調(diào)節(jié)活性，以期為后續(xù)進(jìn)一步的深入研究及產(chǎn)品研發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

銀耳多糖、猴頭菇多糖：江中食療科技有限公司哆糖君研究組提供；茯苓多糖、香菇多糖、竹蓀多糖：南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室制備。

小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7：中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心；DMEM（Dulbecco's modified Eagle Medium）培養(yǎng)基：中國(guó)北京Solarbio公司；胎牛血清：Biological Industries公司；脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）：中國(guó)上海碧云天生物技術(shù)有限公司；FITC-葡聚糖（FITC-Dextran）：美國(guó) Sigma公司；細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）：日本同仁化學(xué)研究所；小鼠TNF-α ELISA試劑盒：中國(guó)武漢博士德生物工程有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

3110 Series II細(xì)胞培養(yǎng)箱、Varioskan Flash多功能酶標(biāo)儀：美國(guó)Thermo公司；ZDX-35B高壓滅菌鍋：上海申安醫(yī)療器械廠 ；CKX41倒置顯微鏡：日本Olympus公司；3K15冷凍離心機(jī)：德國(guó)Sigma公司；Milli-Q50超純水凈化系統(tǒng)：Millipore公司；CytoFLEX S流式細(xì)胞儀：美國(guó)Beckman Coulter公司。

1.3 方法

1.3.1 多糖及其復(fù)配多糖溶液的配制

稱取一定量的銀耳多糖、茯苓多糖、香菇多糖、猴頭菇多糖和竹蓀多糖干燥粉末，用加入了10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基配制為質(zhì)量濃度為320 μg/mL的母液；任意2種多糖母液按1∶1體積比復(fù)配成質(zhì)量濃度為320 μg/mL的復(fù)配多糖培養(yǎng)基溶液，然后以加入了10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基作稀釋液，將多糖及復(fù)配多糖母液分別稀釋為 160、80、40、20、10、5 μg/mL的溶液備用。復(fù)配方式及命名如表1所示。

表1 食用菌多糖復(fù)配方式及命名Table 1 The compounding method and naming of edible fungi polysaccharides

1.3.2 5種食用菌多糖總糖含量的測(cè)定

總糖含量利用苯酚硫酸法測(cè)定[22]，稍作修改，具體操作如下：配制0.25 mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別吸取 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL，各用水補(bǔ)足至 1.0 mL，加入3%苯酚0.5 mL，混勻，最后緩慢加入濃硫酸5.0 mL，混合均勻后（21±2）℃反應(yīng)30 min于490 nm處測(cè)定吸光度，以1.0 mL水按同樣操作作為空白，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

各取1 mL濃度為0.1 mg/mL的多糖待測(cè)樣品溶液，根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定方法測(cè)定其吸光度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣品總糖含量。

1.3.3 RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)與傳代

小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7于DMEM完全培養(yǎng)基（含10%胎牛血清、100 U/mL鏈霉素和100 U/mL青霉素）中培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶置于37℃、5% CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶底部約80%時(shí)進(jìn)行傳代，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用于后續(xù)試驗(yàn)[23]。

1.3.4 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RAW264.7細(xì)胞接種于96孔板中，接種密度為 105個(gè)/mL，每孔 100 μL，37℃培養(yǎng) 4 h～12 h待細(xì)胞貼壁后棄去培養(yǎng)液。將細(xì)胞分為正常對(duì)照組、樣品組和陽(yáng)性組，正常對(duì)照組加入100 μL培養(yǎng)基，樣品組加入100 μL用培養(yǎng)基配制的多糖或復(fù)配多糖培養(yǎng)基溶液，多糖和復(fù)配多糖的濃度均為5、10、20、40、80、160、320 μg/mL，陽(yáng)性組加入 100 μL、濃度為1 μg/mL的LPS培養(yǎng)基溶液。另設(shè)置只含培養(yǎng)基不含細(xì)胞的陰性對(duì)照組，培養(yǎng)24 h后棄去培養(yǎng)基，每孔加入100 μL含10% CCK-8的培養(yǎng)基，培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1 h～4 h后用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)定吸光度。根據(jù)吸光度值，對(duì)不同濃度樣品處理后RAW264.7細(xì)胞的細(xì)胞活力進(jìn)行比較分析，并確定后續(xù)試驗(yàn)中樣品的濃度范圍，細(xì)胞活力用以下公式計(jì)算。

細(xì)胞活力/%=（A2-A0）/（A1-A0）×100

式中：A0為陰性對(duì)照組吸光度；A1為正常對(duì)照組吸光度；A2為樣品組或陽(yáng)性組吸光度。

1.3.5 TNF-α濃度測(cè)定

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RAW264.7細(xì)胞按每孔5×105個(gè)/mL接種于24孔板中，貼壁4 h，各組分別加入500 μL培養(yǎng)基或者樣品培養(yǎng)基溶液，樣品組多糖及復(fù)配多糖濃度為 5、10、20、40、80、160 μg/mL，培養(yǎng) 12 h 后，收集上清液進(jìn)行測(cè)定[24]。TNF-α分泌水平的測(cè)定按照酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)吞噬能力

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞按106個(gè)/孔接種于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，分別加入不同濃度的各多糖及復(fù)配多糖（40、80、160 μg/mL）培養(yǎng)基溶液，同時(shí)另設(shè)置2個(gè)對(duì)照組，分別為正常對(duì)照組和LPS陽(yáng)性組（1 μg/mL）。培養(yǎng)24 h后棄上清，將細(xì)胞用磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffer saline，PBS）清洗 2次，然后再分別加入1 mL 1 mg/mL FITC-Dextran的PBS，37℃避光孵育1 h，用冷PBS中止反應(yīng)，再用PBS清洗2次，離心，收集細(xì)胞，用0.5 mL PBS重懸，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析[24]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)分析使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，且P<0.05表示數(shù)據(jù)有顯著差異，P<0.01表示數(shù)據(jù)有極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 5種食用菌多糖的總糖含量

食用菌多糖總糖含量見表2。

表2 食用菌多糖總糖含量Table 2 The content of total polysaccharides in edible fungi polysaccharides

如表2所示，測(cè)得銀耳多糖總糖含量為77.29%；茯苓多糖、香菇多糖、猴頭菇多糖和竹蓀多糖的總糖含量分別為88.77%、71.00%、92.96%和95.25%。

2.2 5種食用菌多糖單獨(dú)作用于RAW264.7的免疫調(diào)節(jié)作用

2.2.1 5種食用菌多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響

5種食用菌多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響見圖1。

圖1 5種多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力影響Fig.1 Effects of five kinds of polysaccharides on RAW264.7 cell viability

巨噬細(xì)胞體外增殖能力可作為一項(xiàng)評(píng)價(jià)其免疫調(diào)節(jié)活性的指標(biāo)[25]。如圖1所示，與正常對(duì)照組相比，不同濃度的5種食用菌多糖都對(duì)RAW264.7細(xì)胞的細(xì)胞活力產(chǎn)生影響，且細(xì)胞活力普遍顯著高于正常對(duì)照組，說明多糖促進(jìn)了細(xì)胞的增殖。銀耳多糖、茯苓多糖和香菇多糖在檢測(cè)濃度（5 μg/mL～320 μg/mL）范圍內(nèi)均顯著增強(qiáng)細(xì)胞活力，而猴頭菇多糖僅在高濃度（160 μg/mL 和 320 μg/mL）時(shí)表現(xiàn)出促進(jìn)效果，竹蓀多糖在濃度為10 μg/mL～160 μg/mL范圍內(nèi)顯著增強(qiáng)細(xì)胞活力，在濃度為5 μg/mL和320 μg/mL時(shí)能促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞的細(xì)胞活力，但與正常對(duì)照組無顯著性差異。結(jié)果表明，在合適的濃度時(shí)，5種食用菌多糖均可顯著增強(qiáng)RAW264.7的細(xì)胞活力，即顯著增強(qiáng)其增殖能力，從而提高免疫調(diào)節(jié)活性。結(jié)果顯示5種食用菌多糖在320 μg/mL時(shí)的細(xì)胞活力皆呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，推測(cè)可能是多糖刺激巨噬細(xì)胞過度活化，使其發(fā)生紊亂。綜合5種食用菌多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞的細(xì)胞活力影響的結(jié)果，選擇 5、10、20、40、80、160 μg/mL這6個(gè)劑量來檢測(cè)細(xì)胞因子分泌水平情況，另外選擇40、80、160 μg/mL這3個(gè)劑量來檢測(cè)其吞噬能力。

2.2.2 5種食用菌多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌的TNF-α的影響

5種多糖對(duì)TNF-α的分泌的影響見圖2。

圖2 5種多糖對(duì)TNF-α的分泌的影響Fig.2 Effects of five kinds of polysaccharides on levels of TNF-α

TNF-α是一種主要由巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，在宿主防御機(jī)制中發(fā)揮重要作用，對(duì)腫瘤具有直接溶解和抑制增殖的作用[26]。在非炎癥巨噬細(xì)胞模型中，細(xì)胞因子的分泌水平可以作為評(píng)估免疫激活和調(diào)節(jié)能力的指標(biāo)[27]。從圖2可以看出，除了濃度為10 μg/mL和40 μg/mL的猴頭菇多糖，其他濃度的各多糖刺激后，RAW264.7細(xì)胞分泌TNF-α水平明顯增強(qiáng)。其中，銀耳多糖的增強(qiáng)作用效果不如其他4種多糖。在5 μg/mL～80 μg/mL的濃度范圍內(nèi)，香菇多糖刺激后的細(xì)胞分泌TNF-α水平較穩(wěn)定，且在160μg/mL時(shí)效果最好，茯苓多糖在80 μg/mL和160 μg/mL時(shí)，細(xì)胞分泌TNF-α水平僅次于160 μg/mL的香菇多糖。綜合考慮多糖在不同劑量下效果，茯苓多糖和香菇多糖促進(jìn)TNF-α分泌的效果最好，竹蓀多糖次之，然后是猴頭菇多糖和銀耳多糖。

2.2.3 5種食用菌多糖對(duì)RAW264.7吞噬能力的影響

5種食用菌多糖對(duì)RAW264.7吞噬能力的影響見圖3。

愛“嚼舌根”有三個(gè)原因：①被人關(guān)注的需要。“嚼舌根”的基本特征是過度分享第三者秘密。②釋放壓力的需要。掌握了別人秘密的人，不說出來難受，所以便采用了“嚼舌根”的方式來傾訴秘密。③親密交往的需要。“嚼舌根”者本質(zhì)上是希望獲得友誼、促進(jìn)關(guān)系。

圖3 5種多糖對(duì)RAW264.7吞噬FITC-Dextran的影響Fig.3 Effects of five kinds of polysaccharides on phagocytosis of FITC-Dextran by RAW264.7

巨噬細(xì)胞是非特異性免疫的組成部分，可吞噬外來病原體和自身異變細(xì)胞，其吞噬能力可直接反映機(jī)體免疫功能[25]。圖3表明5種食用菌多糖均極顯著地增強(qiáng)了RAW264.7細(xì)胞的吞噬能力。茯苓多糖、香菇多糖和猴頭菇多糖劑量依賴性增強(qiáng)RAW264.7細(xì)胞的吞噬能力，而竹蓀多糖劑量依賴性減弱吞噬能力。從平均熒光強(qiáng)度來看，銀耳多糖的增強(qiáng)吞噬能力效果不如其他4種多糖，香菇多糖的效果優(yōu)于其他4種食用菌多糖。

2.3 復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7的免疫調(diào)節(jié)作用

2.3.1 10種復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響

10種復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響見圖4。

圖4 不同復(fù)配食用菌多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響Fig.4 The effects of different compound edible fungi polysaccharides on RAW264.7 cell viability

如圖4所示，與正常對(duì)照組相比，除復(fù)配多糖201外，其余9種復(fù)配多糖在濃度為5 μg/mL～160 μg/mL皆可顯著提高RAW264.7的細(xì)胞活力。促進(jìn)效果較好的為銀耳多糖-竹蓀多糖的復(fù)配多糖204和茯苓多糖-竹蓀多糖的復(fù)配多糖207，且復(fù)配多糖207在濃度為5 μg/mL時(shí)，促進(jìn)細(xì)胞增殖作用最強(qiáng)。

復(fù)配多糖201只有在10 μg/mL時(shí)顯著性增強(qiáng)RAW264.7的細(xì)胞活力，復(fù)配多糖203劑量依賴性顯著增強(qiáng)RAW264.7的細(xì)胞活力，復(fù)配多糖206和209劑量依賴性減弱RAW264.7的細(xì)胞活力，除在濃度320 μg/mL時(shí)，細(xì)胞活力與正常對(duì)照組相比，沒有顯著性差異，其他濃度均顯著性增強(qiáng)細(xì)胞活力。

2.3.2 10種復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌的TNF-α的影響

10種復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌的TNF-α的影響見表3。

表3 不同復(fù)配食用菌多糖對(duì)巨噬細(xì)胞株RAW264.7細(xì)胞因子分泌的影響Table 3 The effect of different compound polysaccharides on cytokine secretion of macrophage cell line RAW264.7

2.3.3 10種復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7吞噬能力的影響

10種復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7吞噬能力的影響見圖5。

圖5 復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7吞噬FITC-Dextran的影響Fig.5 Effects of compound polysaccharides on phagocytosis of FITC-Dextran by RAW264.7

如圖5所示，與正常對(duì)照組相比，10種復(fù)配多糖均能夠顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞RAW264.7的吞噬能力。在10種復(fù)配多糖中，基于茯苓多糖和香菇多糖的復(fù)配多糖在40 μg/mL～160 μg/mL時(shí)，其吞噬效果均優(yōu)于其它9種復(fù)配多糖。同時(shí)，發(fā)現(xiàn)效果較好是基于銀耳多糖-香菇多糖的復(fù)配多糖202、基于茯苓多糖-香菇多糖的復(fù)配多糖205、基于茯苓多糖-猴頭菇多糖的復(fù)配多糖206和基于茯苓多糖-竹蓀多糖的復(fù)配多糖207，結(jié)合圖3中5種多糖單獨(dú)作用于RW264.7時(shí)對(duì)吞噬能力的增強(qiáng)效果，發(fā)現(xiàn)茯苓多糖和香菇多糖的增強(qiáng)吞噬能力也是更優(yōu)的，說明可能還是某一類效果更好的多糖在發(fā)揮作用，后續(xù)可以進(jìn)行更深入研究。

2.4 復(fù)配多糖與其組成多糖對(duì)RAW264.7的免疫調(diào)節(jié)作用的比較

2.4.1 對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌的TNF-α的影響的比較復(fù)配多糖與單獨(dú)多糖對(duì)TNF-α的分泌的影響見圖6。

圖6 復(fù)配多糖與單獨(dú)多糖對(duì)TNF-α的分泌的影響Fig.6 Effects of compound polysaccharides and single polysaccharides on levels of TNF-α

由2.3.2中結(jié)果可知，復(fù)配多糖中對(duì)RAW264.7細(xì)胞提高TNF-α分泌水平影響較大的是復(fù)配多糖208，將復(fù)配多糖208及其組成多糖單獨(dú)作用時(shí)對(duì)RAW264.7分泌TNF-α的影響進(jìn)行比較。從圖6可以得出，基于香菇多糖和猴頭菇多糖復(fù)配而成的復(fù)配多糖208提高TNF-α分泌水平的效果優(yōu)于猴頭菇多糖，但并未優(yōu)于香菇多糖。分析可能是香菇多糖單獨(dú)作用時(shí)提高TNF-α分泌水平效果就已經(jīng)達(dá)到最優(yōu)，復(fù)配后的效果也不能超越，與2.2.2中結(jié)果香菇多糖單獨(dú)作用時(shí)提高TNF-α分泌水平效果的結(jié)果一致。結(jié)合表3可知，復(fù)配多糖205、208、209的效果在10種復(fù)配多糖中表現(xiàn)較優(yōu)，這3種復(fù)配多糖中均含香菇多糖，應(yīng)該是香菇多糖在其中發(fā)揮作用。同時(shí)比較了其余9種復(fù)配多糖與其組成多糖單獨(dú)作用時(shí)提高TNF-α分泌水平效果，發(fā)現(xiàn)復(fù)配多糖204在多糖濃度為80 μg/mL時(shí)提高TNF-α分泌水平效果優(yōu)于其組成多糖銀耳多糖和竹蓀多糖。

2.4.2 對(duì)RAW264.7吞噬能力的影響的比較

由2.3.3中結(jié)果可知，復(fù)配多糖中對(duì)RAW264.7吞噬能力影響較大的是復(fù)配多糖205，圖7展示了茯苓多糖、香菇多糖及其復(fù)配得到的復(fù)配多糖205的吞噬能力比較結(jié)果。

圖7 復(fù)配多糖與單獨(dú)多糖對(duì)RAW264.7吞噬FITC-Dextran的影響Fig.7 Effects of compound polysaccharides and single polysaccharides on phagocytosis of FITC-Dextran by RAW264.7

由圖7可知復(fù)配多糖205對(duì)RAW264.7的吞噬能力的增強(qiáng)效果優(yōu)于茯苓多糖和香菇多糖單獨(dú)作用時(shí)的效果。由此推測(cè)，多糖間可能會(huì)存在一定相互作用，使其作用效果更好。同時(shí)，也比較其余9種復(fù)配多糖與其組成多糖單獨(dú)作用時(shí)對(duì)RAW264.7細(xì)胞增強(qiáng)吞噬能力效果，其中復(fù)配多糖204在多糖濃度為160 μg/mL時(shí)增強(qiáng)效果優(yōu)于單獨(dú)作用時(shí)的銀耳多糖和竹蓀多糖。

3 結(jié)論

5種食用菌多糖單獨(dú)作用及其兩兩復(fù)配得到的復(fù)配多糖都可通過增強(qiáng)細(xì)胞活力，提升吞噬能力，促進(jìn)TNF-α的分泌來發(fā)揮積極的免疫調(diào)節(jié)作用。同時(shí)，10種復(fù)配多糖中，復(fù)配多糖204和復(fù)配多糖207的促進(jìn)細(xì)胞增殖效果較好；復(fù)配多糖208的提高TNF-α分泌水平效果較優(yōu)；復(fù)配多糖205的增強(qiáng)吞噬能力的效果最好，且優(yōu)于其組成多糖茯苓多糖和香菇多糖單獨(dú)作用時(shí)效果；復(fù)配多糖204在多糖濃度為80 μg/mL時(shí)提高TNF-α分泌水平效果優(yōu)于其組成多糖銀耳多糖和竹蓀多糖，在多糖濃度為160 μg/mL時(shí)增強(qiáng)效果優(yōu)于單獨(dú)作用時(shí)的銀耳多糖和竹蓀多糖。綜合以上結(jié)果，不同多糖經(jīng)兩兩復(fù)配后，復(fù)配多糖對(duì)RAW264.7的免疫調(diào)節(jié)效果可能會(huì)優(yōu)于其多糖單獨(dú)作用時(shí)效果。本研究結(jié)果可為食用菌多糖的免疫調(diào)節(jié)相關(guān)功能產(chǎn)品開發(fā)提供新思路。