蔡恒洋，曲軼，王桂煥

（東港市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 丹東 118300）

急性、慢性下呼吸道感染、社區(qū)獲得性感染及醫(yī)院獲得性感染等疾病均較為常見[1]，隨著臨床抗菌藥物的廣泛使用，疾病抗菌藥物治療的耐藥性明顯增高，為保證患者用藥安全和療效，國家相關部門加強對抗菌藥物的合理管理，微生物檢驗逐漸引起臨床高度重視，其檢驗的藥敏結果可直接作為臨床治療感染性疾病的重要依據(jù)[2]，因此，檢驗結果的準確性和有效性直接關系臨床醫(yī)生用藥的有效性和合理性[3]。微生物檢驗標本質量受較多因素影響，如微生物送檢標本是否及時、有效檢出，將直接影響藥敏試驗結果的準確性[4]。如何保證微生物送檢標本質量，是標本進行藥敏培養(yǎng)的關鍵環(huán)節(jié)。目前，有效的篩查送檢前不合格標本是提高病原菌檢出率的重要途徑。涂片鏡檢通過送檢標本制作薄片，進行革蘭氏染色、顯微鏡下觀察微生物形態(tài)，可早期診斷、鑒別細菌，判斷標本是否合格，且準確鑒定細菌類型，在微生物送檢標本培養(yǎng)前使用，可提升微生物標本送檢的合格率和準確率，為臨床醫(yī)師有效用藥和治療提供重要依據(jù)[5]。基于此，本研究選取2019年1月至2019年6月本院采集的417份微生物送檢標本作為研究對象，旨在探究微生物送檢標本在培養(yǎng)前進行涂片鏡檢的臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料選取2019年1月至2019年6月本院采集的417份微生物送檢標本作為研究對象。

1.2 儀器快速革蘭氏染色液（珠海貝索生物技術有限公司），法國梅里埃VT2微生物鑒定系統(tǒng)。

1.3 方法涂片染色鏡檢：使用無菌棉簽挑取痰液、分泌物及膿液標本，提取薄片，取5～8 mL新鮮尿液及其他標本置于無菌試管中，3 000 r/min離心30 min取尿沉渣制作涂片，涂片烘干后，進行革蘭氏染色和鏡檢分析。

接種培養(yǎng)：使用一次性定量無菌接種環(huán)（1μL）挑取標本，痰液標本分別接種于血平板、巧克力平板、麥康凱平板、科馬嘉平板上，對涂片檢出菌株者加種沙保羅培養(yǎng)基，于35℃5%二氧化碳孵化箱中培養(yǎng)1～2 d[6]，采用BD公司Crystal微生物分析系統(tǒng)鑒定。

1.4 觀察指標合格標本[7]及陽性結果判斷[8]，痰液標本：鱗狀上皮細胞≥10個低倍鏡視野，外觀膿性或血性，白細胞＜25個低倍鏡視野表示合格；尿液標本：＜10個油鏡視野，平均每個視野有＜1個細菌者表示標本合格；分泌物標本：無菌采集，涂片無鱗狀上皮細胞表示標本合格。接種培養(yǎng)結果與涂片鏡檢符合，檢出致病菌與涂片檢出致病菌形態(tài)相符。

1.5 統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 微生物送檢標本分布結果417例標本中，痰液標本105份，尿液標本102份，分泌物標本167份，其他標本43份，見表1。

表1 微生物送檢標本分布結果Table 1 Distribution results of microbiological specimens submitted for inspection

2.2 標本篩查合格率及不同類型標本陽性率比較不合格標本27份，不合格率6.47%，合格標本390份，合格率為93.53%，不同類型標本陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 標本篩查合格率及不同類型標本陽性率比較Table 2 Specimen screening qualification rate and comparison of positive rates of different types of specimens

2.3 合格標本涂片鏡檢與接種培養(yǎng)陽性符合率比較390例合格標本檢出致病菌株陽性101份，占比25.90%，接種培養(yǎng)法檢出致病菌株陽性117份。涂片鏡檢的痰液、尿液、分泌物及其他標本培養(yǎng)的陽性率與接種培養(yǎng)法比較差異無統(tǒng)計學意義，兩種培養(yǎng)方法痰液、尿液、分泌物及其他標本陽性符合率分別為78.79%、87.50%、93.33%、86.67%，見表3。

表3 合格標本涂片鏡檢與接種培養(yǎng)陽性符合率比較Table 3 Comparison of positive coincidence rate of smear microscopy and inoculation culture of qualified specimens

3 討論

對呼吸道感染醫(yī)源性感染等疾病患者進行痰液培養(yǎng)及藥敏感度試驗培養(yǎng)具有重要的臨床意義。痰標本培養(yǎng)質量關系細菌培養(yǎng)結果的準確性，而結果的準確性可為臨床提供真實可靠的實驗依據(jù)；同時，有助于臨床評估患者病情，制定合理的治療方案，避免經(jīng)驗性治療或用藥，可顯著減少臨床抗菌藥物濫用，降低抗菌藥物的耐藥性，改善患者疾病治療預后，節(jié)約有限的醫(yī)藥衛(wèi)生資源[9]。

痰涂片鏡檢可保證標本質量，提高標本培養(yǎng)結果準確性。在微生物送檢前對標本進行合格篩查，排除不合格標本，是細菌培養(yǎng)的重要依據(jù)。目前，國內大部分醫(yī)院均未進行培養(yǎng)前涂片鏡檢篩查，而直接進行藥敏或標本細菌培養(yǎng)，易影響結果的準確性，臨床濫用抗生素，甚至錯誤的藥敏試驗結果將導致細菌耐藥，疾病誤診或延誤治療病情的最佳時機。因此，在微生物送檢前采用統(tǒng)一標準化試驗，可避免假陰性，提升標本檢查結果的精準度[10]。

本研究結果顯示，對417例微生物標本進行涂片鏡檢，不合格標本27份，合格標本390分，合格率93.53%，其中痰液標本合格占比29.49%，尿液標本31.28%，分泌物標本30.77%，其他標本8.46%。根據(jù)涂片鏡檢結果，對合格標本進行鏡檢，發(fā)現(xiàn)均符合白細胞鱗狀上皮細胞≥10個低倍鏡視野，白細胞＜25個低倍鏡視野，性狀分析發(fā)現(xiàn)外觀膿性或血性，未見唾液或口腔細菌黏液，培養(yǎng)結果均為正常菌群；在微生物標本涂片鏡檢時，能及時排除不合格標本，降低采集標本的錯誤率，提高檢驗結果的準確性和即時性，減少培養(yǎng)工作的誤差，降低疾病漏誤診率[11]；同時，避免標本不合格可為臨床診治提供重要、準確的依據(jù)。對送檢的微生物標本進行革蘭氏染色分析，于顯微鏡下能直接觀察微生物是否感染。在顯微鏡下初步篩查，鑒別細菌類型，選擇藥敏性紙片；早診斷、早篩查，判定合格的標本，并提示患者是否還需輔助其他項目檢查，有利于細菌鑒定[12]。

對390例合格標本進行分析，進一步篩查陽性致病菌117份，涂片鏡檢陽性101份，不同類型微生物標本的陽性率比較差異均無統(tǒng)計學意義，涂片鏡檢與接種培養(yǎng)痰液、尿液、分泌物及其他標本符合率分別為78.79%、87.50%、93.33%、86.67%，均較高。對部分存在符合率誤差的原因進行分析，可能因涂片制作薄片的材料不當，無法真實反映標本的真實性，或涂片太薄，也對標本真實性會產(chǎn)生一定影響。涂片進行革蘭氏染色分析，染色后背景為紅色，而陰性桿菌也為紅色，因此，會增加漏檢或誤檢率[13]。此外，部分細菌為不動桿菌，鏡檢下形態(tài)與革蘭陰性相似，易發(fā)生混淆；此外，不排除標本接種造成的污染。為進一步提升和保證微生物標本檢驗的準確性，需采集更大的樣本量，盡可能降低誤差率。

綜上所述，涂片鏡檢用于微生物送檢標本前篩查，操作便捷，可提升微生物送檢標本的合格率，提高標本檢出的符合率和陽性率，具有重要的推廣價值。