葉婷玉

摘要：目的：探究乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)中施行化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)的效果。方法：參與此次研究的研究對(duì)象為乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期間收入本院接受診治，共60例。對(duì)上述患者分別采取化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)（CLIA）以及酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)（HBeAg）。對(duì)比兩種方法的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果：由研究結(jié)果數(shù)據(jù)上可見(jiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法與化學(xué)發(fā)光免疫分析法的HBeAb陽(yáng)性檢出率比較差異不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)含義（P>0.05）。化學(xué)發(fā)光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb陽(yáng)性檢出率相比較酶聯(lián)免疫吸附法較高（P<0.05）。結(jié)論：在乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)中采取化學(xué)發(fā)光免疫分析法，具有較高的敏感度，其檢測(cè)準(zhǔn)確度較高，有助于乙肝患者的治療，在乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)中具有重要意義。

關(guān)鍵詞：化學(xué)發(fā)光免疫分析法;乙肝病毒;感染性標(biāo)志物;敏感度

乙型肝炎病毒的傳播路徑較為廣泛﹐同時(shí)具備較高的感染率，當(dāng)患者感染此種病毒后，可伴隨時(shí)間逐步進(jìn)展為急性肝炎以及慢性肝炎，病情較為嚴(yán)重的患者可產(chǎn)生肝硬化等疾病，對(duì)患者的身心健康產(chǎn)生較大的危害。若能夠及時(shí)診斷出乙肝病毒有無(wú)感染，經(jīng)治療對(duì)患者的痛苦進(jìn)行緩解，且能減少傳染率[1]。當(dāng)前，臨床上對(duì)于乙肝診斷常采取酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)法，能夠?qū)σ腋尾《靖腥拘詷?biāo)志物予以定性分析，但不能準(zhǔn)確定量?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法較好地結(jié)合了化學(xué)發(fā)光反應(yīng)以及免疫反應(yīng)，靈敏度高，能夠較快定量分析，可對(duì)酶聯(lián)免疫吸附法存在的缺陷予以彌補(bǔ)。為此，參與此次研究的研究對(duì)象為乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期間收入本院接受診治，共60例。探究乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)中施行化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)的效果。研究結(jié)果詳見(jiàn)下文。

1資料與方法

1.1 基礎(chǔ)資料

參與此次研究的研究對(duì)象為乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期間收入本院接受診治，共60例。上述研究對(duì)象男女占比為35：25;年齡在23～67歲，平均年齡（54.32±3.25）歲。上述研究對(duì)象均滿足此次研究所設(shè)定的納入標(biāo)準(zhǔn)。本研究經(jīng)倫理審核標(biāo)準(zhǔn)通過(guò)。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

（1）患者經(jīng)病理診斷后滿足乙肝疾病相關(guān)指證;（2）患者對(duì)本次研究目的知悉，且自愿參與到此次研究;（3）患者基礎(chǔ)資料缺失。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）患有器官功能性障礙疾病，以及感染性疾病和凝血功能障礙等;（2）患有精神類(lèi)疾病，以及存在認(rèn)知能力障礙者;（3）患者基礎(chǔ)資料缺失，中途退出研究者。

1.2 方法

1.2.1 設(shè)備儀器

本次研究所使用的離心機(jī)設(shè)備型號(hào)為SV-II，為山東博科科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn);全自動(dòng)酶免分析儀型號(hào)為Bosal，為上海通達(dá)生物科技有限公司生產(chǎn);化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)儀型號(hào)為HISCL-5000，為日本希森美康公司生產(chǎn)。

1.2.2 試劑

酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒：HBsAg（生產(chǎn)廠家：艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司;批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2010第3400516號(hào);規(guī)格：條型單人份包裝：50人份/盒;條型筒裝：100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBeAg（生產(chǎn)廠家：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司﹐批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2014第3401095號(hào);規(guī)格：2×50人份/盒、2×100人份/盒。）;HBeAb（生產(chǎn)廠家：深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第3400473號(hào)（變更批件）;規(guī)格：100測(cè)試/盒），HBsAb（生產(chǎn)廠家：艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司;批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2010第3400379號(hào);規(guī)格：50人份/盒、100人份/盒（25人份/筒×4筒），HBcAb（湖北中保龍醫(yī)藥有限公司;批準(zhǔn)文號(hào)：生產(chǎn)廠家：蘇械注準(zhǔn)20152401292;規(guī)格：48/96T）;化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)試劑盒：HBsAg（生產(chǎn)廠家：艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司;批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2010第3400516號(hào);規(guī)格：條型單人份包裝：50人份/盒;條型筒裝：100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBeAg（生產(chǎn)廠家：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司﹐批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2014第3401095號(hào);規(guī)格：2×50人份/盒、2×100人份/盒。） HBeAb（生產(chǎn)廠家：深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第3400473號(hào)（變更批件）;規(guī)格：100測(cè)試/盒）;HBsAb（生產(chǎn)廠家：艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司;批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2010第3400379號(hào);規(guī)格：50人份/盒、100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBcAb（生產(chǎn)廠家：湖北中保龍醫(yī)藥有限公司;批準(zhǔn)文號(hào)：蘇械注準(zhǔn)20152401292;規(guī)格：48/96T）。

1.2.3 檢測(cè)方法

采集患者清晨空腹靜脈血，進(jìn)行離心處理（3500 rpm，時(shí)間：15分鐘）獲得血清。

（1）酶聯(lián)免疫吸附法：使用相關(guān)試劑盒和酶標(biāo)儀予以檢測(cè)，操作人員需要嚴(yán)格依照試劑盒使用說(shuō)明和酶標(biāo)儀操作方法進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)﹐測(cè)定指標(biāo)為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

（2）化學(xué)發(fā)光免疫分析法：使用相關(guān)試劑盒予以檢測(cè)，操作人員需要嚴(yán)格依照試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行相應(yīng)操作，測(cè)定指標(biāo)為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)比兩種方法的檢測(cè)結(jié)果。（1）酶聯(lián)免疫吸附法陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：檢測(cè)值≥上限參考值;HBsAg參考值0.2 ng/ml;HBsAb參考值10.0 mlU/ml;HBeAg參考值0.05 NCU/ml;HBeAb參考值2.0 NCU/ml;HBcAb參考值為1.5 NCU/ml。（2）化學(xué)發(fā)光免疫分析法的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：測(cè)定值≥上限參考值，測(cè)定參考值與酶聯(lián)免疫吸附法相同。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究所得到的數(shù)據(jù)均采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行處理，（±s）用于表示計(jì)量資料，用t檢驗(yàn);（%）用于表示計(jì)數(shù)資料，用χ2檢驗(yàn)。當(dāng)所計(jì)算出的P<0.05時(shí)則提示進(jìn)行對(duì)比的對(duì)象之間存在顯著差異。

2結(jié)果

在60例患者中，采取酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)HBsAg 陽(yáng)性為40例，占比為66.67%;HBsAb陽(yáng)性22例，占比為36.67%;HBeAg陽(yáng)性為50例，占比為83.33%;HBeAb陽(yáng)性為57例，占比為95.00% ;HBcAb陽(yáng)性為45例，占比為75.00%?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)HBsAg 陽(yáng)性為50例，占比為83.33%;HBsAb陽(yáng)性33例，占比為55.00%;HBeAg陽(yáng)性58例，占比為96.67%;HBeAb陽(yáng)性59例，占比為98.33%;HBcAb陽(yáng)性53例，占比為88.33%。χ2檢驗(yàn)值：HBsAg（χ2=44.44，P=0.035）、HBsAb（χ2=4.062，P=0.044）、HBeAg（χ2=5.926，P=0.015）、HBeAb（χ2=0.209，P=0.648）、HBcAb（χ2=3.562，P=0.048）。由此可見(jiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法與化學(xué)發(fā)光免疫分析法的HBeAb陽(yáng)性檢出率比較差異不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)含義（P>0.05）?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb陽(yáng)性檢出率相比較酶聯(lián)免疫吸附法較高（P<0.05）。

3討論

臨床上常見(jiàn)的乙肝病毒感染檢測(cè)指標(biāo)分別為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb五項(xiàng)，能夠較好地表達(dá)患者體內(nèi)乙肝病毒水平和機(jī)體反應(yīng)情況。上述檢測(cè)指標(biāo)可分為定性以及定量，定性檢查則是明確指標(biāo)的陰、陽(yáng)性結(jié)果，而定量檢查則是上述指標(biāo)的精確數(shù)值。上述指標(biāo)在乙肝患者診斷、治療中具有重要的作用，有助于醫(yī)生為患者制定治療方法。

酶聯(lián)免疫吸附法屬于一種定性法，其原理是經(jīng)試劑使抗原、抗體結(jié)合某種固相載體表面，且保持其免疫活性，促使抗原、抗體和某種酶連接為酶標(biāo)抗原以及抗體，能夠保留免疫活性以及酶的活性。化學(xué)發(fā)光免疫分析法囊括兩個(gè)部分，分別為免疫反應(yīng)系統(tǒng)以及化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。其中化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)則是經(jīng)化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化以及氧化劑氧化，產(chǎn)生激發(fā)態(tài)中間體。此種激發(fā)態(tài)中間體處于穩(wěn)定基態(tài)期間可發(fā)射出光子，經(jīng)發(fā)光信號(hào)對(duì)儀器測(cè)量光量子產(chǎn)額進(jìn)行測(cè)量。免疫反應(yīng)系統(tǒng)則是將發(fā)光物質(zhì)直接在抗原、抗體上予以標(biāo)記，以及酶作用在發(fā)光底物。由于反應(yīng)原理不同，所以具備不同靈敏度以及檢測(cè)限。出來(lái)上述差別，兩種方法檢測(cè)過(guò)程也存在差異。酶聯(lián)免疫吸附法需要進(jìn)行手動(dòng)加樣、明確孵育時(shí)間和手動(dòng)洗板等，這就受到操作人員手法不同影響，引起結(jié)果存在差異[2]。本次研究結(jié)果中，酶聯(lián)免疫吸附法與化學(xué)發(fā)光免疫分析法的HBeAb陽(yáng)性檢出率比較差異不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)含義（P>0.05）?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb陽(yáng)性檢出率相比較酶聯(lián)免疫吸附法較高（P<0.05）。結(jié)果可見(jiàn)化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢測(cè)效果優(yōu)于酶聯(lián)免疫吸附法。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光免疫分析法具有較高的敏感度，檢測(cè)準(zhǔn)確度較高，有助于乙肝患者的治療，在乙肝病毒感染性標(biāo)志物檢測(cè)中具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1]黃光豪.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)孕婦乙型肝炎表面抗原結(jié)果的比較[J].醫(yī)學(xué)食療與健康，2020，18（6）：2.

[2]李丹.乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢驗(yàn)效果對(duì)比分析[J].醫(yī)藥前沿，2020，10（1）：2.