王玲麗，趙志強，靳新榮

(烏魯木齊市第四人民醫(yī)院新疆精神衛(wèi)生中心 a.精神科；b.成癮醫(yī)學(xué)科，新疆 烏魯木齊 830002)

酒精依賴是由于長期過度飲酒所導(dǎo)致的對酒精渴求的心理狀態(tài)，患者往往無法控制其飲酒行為并且會出現(xiàn)戒斷癥狀。隨著現(xiàn)代社會生活節(jié)奏的加快和生活方式的變化，酒精依賴的患病率也逐漸增高。文獻報道[1-2]酒精依賴在歐洲人群中的患病率約為8.7%，在我國人群中的患病率則高達11.56%。酒精依賴不僅給患者自身健康帶來極大危害，還會導(dǎo)致一系列家庭和社會問題，其已經(jīng)發(fā)展為亟待解決的公共衛(wèi)生問題[3]。酒精依賴的發(fā)生受遺傳和環(huán)境因素的共同影響。隨著遺傳學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，研究人員越來越關(guān)注遺傳因素和酒精依賴的關(guān)系。Kendler等[4]報道瑞典男性同卵和異卵雙胞胎長期的隨訪研究發(fā)現(xiàn)，遺傳因素在酒精依賴的發(fā)生中所起的作用占50%以上。大量基因及多態(tài)性位點和酒精依賴的發(fā)生相關(guān)[5]。μ阿片受體1(mu opioid receptor 1，OPRM1)基因位于6號染色體長臂，編碼人類μ阿片受體。μ阿片受體屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族，其在物質(zhì)依賴相關(guān)的犒賞通路上發(fā)揮重要作用。Bergen等[6]在1997年首次報道了OPRM1基因的rs1799971多態(tài)性和酒精依賴的遺傳關(guān)聯(lián)，但是并沒有發(fā)現(xiàn)兩者存在顯著的關(guān)聯(lián)。此后，該位點受到了廣泛的關(guān)注，來自不同國家和地區(qū)的研究人員不斷嘗試重復(fù)Bergen等[6]的研究，但是并沒有獲得一致的結(jié)論?？紤]到單項研究的樣本量小，統(tǒng)計學(xué)把握度較低，并且人群代表性不佳，本研究將通過Meta分析的方式，對現(xiàn)有研究成果進行數(shù)據(jù)合并，以期得到更加可靠的結(jié)果。

1 資料與方法

1.1納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：關(guān)于OPRM1基因rs1799971多態(tài)性和酒精依賴的病例-對照研究或隊列研究；病例組符合酒精依賴的診斷標(biāo)準(zhǔn)；文獻能獲得全文，并且提供了基因型頻率，從而能夠計算P值、比值比(OR)和95%可信區(qū)間(95%CI)；納入文獻必須是經(jīng)過同行評議并且已經(jīng)在公開刊物上發(fā)表的學(xué)術(shù)論文。排除標(biāo)準(zhǔn)：不能獲得全文或數(shù)據(jù)不完整的研究；會議摘要、綜述、述評、病例報道、動物研究及畢業(yè)論文。重復(fù)發(fā)表的文獻，納入最新發(fā)表的研究。

1.2檢索策略 本研究檢索包括PubMed、Web of Science、EMBASE、中國知網(wǎng)和萬方數(shù)據(jù)庫。英文數(shù)據(jù)庫的檢索：(Polymorphism OR SNP OR Mutant OR Variant) AND (Alcohol Dependence OR Alcohol addiction OR Alcohol use disorder OR Alcohol abuse OR Alcohol misuse OR problem drinking OR harmful drinking OR alcoholics OR alcoholism) AND (Opioid receptor mu 1 OR OPRM1 OR mu opioid receptor 1)。中文數(shù)據(jù)庫檢索:(“酒精依賴”或“酒精有害使用”或“酒精使用障礙”)與“OPRM1”。時間為建庫到2020年7月10日。由兩位作者分別獨立完成。

1.3文獻篩選和信息提取 按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，由兩位作者分別獨立完成文獻的篩選。確定文獻符合要求后，提取以下信息：第一作者的姓名、發(fā)表年份、國家、種族、參與者性別、診斷標(biāo)準(zhǔn)、研究類型、參與者的基因型頻率、以及哈代-溫伯格遺傳平衡(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE)檢測結(jié)果[7]。在此過程中如果遇到分歧，由兩位作者共同商討解決。

1.4方法學(xué)質(zhì)量評價 使用紐卡斯?fàn)?渥太華量表(Newcastle-Ottawa Scale，NOS)對納入文獻的方法學(xué)質(zhì)量進行評估。NOS由人群選擇(4個條目，共4分)、研究對象之間的可比性(1個條目，共2分)和暴露因素(3個條目，共3分)3個方面構(gòu)成。當(dāng)納入文獻評分超過5分時，表明其質(zhì)量良好。此過程由兩位作者獨立完成，如有分歧，通過商討解決。

1.5遺傳模型的選擇 根據(jù)《實用循證醫(yī)學(xué)方法學(xué)》[8]中關(guān)于基因關(guān)聯(lián)研究Meta分析的相關(guān)報道，本研究選擇常用的5種遺傳模型進行分析。假設(shè)A是突變等位基因，G是野生等位基因，則等位基因模型為A vs. G、純合子模型為AA vs. GG、雜合子模型為AG vs. GG、顯性模型模型為AA+AG vs. GG，隱性模型為AA vs. AG+GG。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用RevMan5.3進行Meta分析。各納入研究結(jié)果間的異質(zhì)性采用χ2檢驗和I2檢驗，當(dāng)各研究間有統(tǒng)計學(xué)同質(zhì)性(P≥0.1或I2≤50%)，采用固定效應(yīng)模型對各研究進行分析；如各研究間存在統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性(P<0.1或I2>50%)，分析其異質(zhì)性來源。若無明顯臨床異質(zhì)性，可謹(jǐn)慎采用隨機效應(yīng)模型進行分析[9]。采用漏斗圖法評估發(fā)表偏倚[10]。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1文獻檢索結(jié)果 系統(tǒng)檢索獲得1 044篇相關(guān)文獻。通過篩選，最終得到22篇符合要求的文獻[6, 11-31]。文獻篩選的具體過程見圖1。

2.2納入文獻的基本特征 納入的22篇文獻中，包括24項獨立研究。其中18項研究[6, 12, 14, 16-19, 21-23, 25-26, 28-31]在高加索人群中開展，其他6項研究[11, 13, 15, 20, 24, 27]在亞洲人群中實施。Bergen等[6]的研究包括3項獨立研究。除Rouvinen-Lagerstr?m等[31]的研究為隊列研究外，其余研究均為病例-對照研究。4項研究[12, 16, 23, 29]不符合 HWE。診斷標(biāo)準(zhǔn)主要使用DSM-Ⅲ-R、ICD-10和DSM-Ⅳ。 所有研究的NOS評分均>5分，可視為高質(zhì)量研究。納入文獻的基本特征見表1。

2.3Meta分析和亞組分析結(jié)果

2.3.1OPRM1基因rs1799971多態(tài)性和酒精依賴的關(guān)系 等位基因和隱性模型檢測到異質(zhì)性，采用隨機效應(yīng)模型分析，其余遺傳模型采用固定效應(yīng)模型分析。結(jié)果顯示rs1799971位點AG-基因型攜帶者發(fā)生酒精依賴的風(fēng)險較高(P<0.05)，圖2。其他遺傳模型差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見圖3～6。

表1 納入文獻的基本特征及質(zhì)量評價

圖2 AG-基因型攜帶者和GG-基因型攜帶者的比較 注： AA-基因型攜帶者的數(shù)量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型攜帶者的總數(shù)(Total)

圖3 A-等位基因攜帶者和G-等位基因攜帶者的比較 注： AA-基因型攜帶者的數(shù)量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型攜帶者的總數(shù)(Total)

圖4 AA-基因型攜帶者和GG-基因型攜帶者的比較 注： AA-基因型攜帶者的數(shù)量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型攜帶者的總數(shù)(Total)

圖5 AA-基因型攜帶者和AG-基因型攜帶者與GG-基因型攜帶者的比較 注： AA-基因型攜帶者的數(shù)量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型攜帶者的總數(shù)(Total)

2.3.2亞組分析 亞洲人群等位基因模型和隱性模型檢測到明顯的異質(zhì)性，采用隨機效應(yīng)模型分析，其余遺傳模型采用固定效應(yīng)模型分析。結(jié)果顯示rs1799971位點AG-基因型攜帶者發(fā)生酒精依賴的風(fēng)險較高(P<0.05)。其他遺傳模型未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性，高加索人群五種遺傳模型rs1799971多態(tài)性和酒精依賴的發(fā)生風(fēng)險無相關(guān)性，無論是在男女混合亞組，還是男性亞組，rs1799971多態(tài)性和酒精依賴均無相關(guān)性。見表2。

表2 Rs1799971多態(tài)性和酒精依賴關(guān)系的Meta分析結(jié)果

2.4敏感性分析及發(fā)表偏倚評估 在排除不符合HWE的研究后，剩余研究的OR值和95%CI并沒有發(fā)生明顯改變，說明其對總體的效應(yīng)值沒有影響。因此，在最終的數(shù)據(jù)合并過程中并未將不符合HWE的研究排除。逐個去除其余單項研究后，總體的效應(yīng)值方向未發(fā)生改變，表明研究結(jié)果具有良好的穩(wěn)定性。漏斗圖結(jié)果顯示各項研究較為均勻地分布在漏斗圖的中線兩側(cè)，提示不存在顯著的發(fā)表偏倚。見圖7。

圖7 納入研究的漏斗圖

3 討 論

酒精依賴是一種以精神和軀體依賴為特征的慢性精神疾病，其發(fā)生受遺傳和環(huán)境因素的雙重調(diào)控。大量的基礎(chǔ)和臨床研究表明遺傳因素在酒精依賴的發(fā)生過程中占主導(dǎo)作用[5]。OPRM1基因rs1799971多態(tài)性被廣泛報道和酒精依賴存在相關(guān)性。然而，由于遺傳背景、研究樣本量差異及臨床異質(zhì)性等原因，不同研究得到的結(jié)果并不一致。本研究對現(xiàn)有研究結(jié)果進行合并分析。合并后的結(jié)果顯示總?cè)巳簉s1799971多態(tài)性能夠增加酒精依賴的發(fā)生風(fēng)險。在實施亞組分析后發(fā)現(xiàn)，這種關(guān)聯(lián)只存在于亞洲人群，具體表現(xiàn)為亞洲人群AG-基因型攜帶者發(fā)生酒精依賴的風(fēng)險較高。造成這種結(jié)果的可能原因是這兩個群體的遺傳背景和生活地域存在差異，從而導(dǎo)致同一位點的突變產(chǎn)生不同的表型效應(yīng)。由于亞洲人群的研究數(shù)量較少，可能存在一定的發(fā)表偏倚。本研究使用漏斗圖法對發(fā)表偏倚進行評估，結(jié)果發(fā)現(xiàn)漏斗圖對稱性良好，沒有顯著的發(fā)表偏倚。此外，亞洲人群在等位基因和隱性遺傳模型存在一定的異質(zhì)性，這些異質(zhì)性可能由亞洲不同種族的遺傳背景差異導(dǎo)致。本研究借助敏感性分析來尋找異質(zhì)性來源，但是并沒有發(fā)現(xiàn)顯著影響異質(zhì)性的研究。考慮到納入的亞洲人主要是東亞人群，且研究數(shù)量和樣本量較少，本研究沒有對亞洲人再進行亞組分析。

越來越多的研究表明內(nèi)源性阿片犒賞通路參與犒賞效應(yīng)，因此其在物質(zhì)成癮中發(fā)揮重要作用。酒精依賴的發(fā)病過程與阿片受體系統(tǒng)的激活密切有關(guān)。酒精能夠提高阿片受體對內(nèi)源性阿片類物質(zhì)的敏感性并導(dǎo)致阿片受體的激活，產(chǎn)生嗎啡樣效應(yīng)，從而為飲酒者帶來欣快感。此外，酒精在體內(nèi)代謝產(chǎn)生的乙醛能夠與兒茶酚胺發(fā)生反應(yīng)，生成阿片受體激動劑，進而激活犒賞通路[32]。

Huang等[33]發(fā)現(xiàn)，Rs1799971多態(tài)性會導(dǎo)致OPRM1基因編碼的第40位氨基酸由天冬酰胺變成天冬氨酸，這一改變會引起大腦對阿片類藥物的敏感性發(fā)生變化，rs1799971多態(tài)性會導(dǎo)致OPRM1的mRNA表達水平下降，rs1799971突變能夠?qū)е潞ｑR神經(jīng)元細(xì)胞μ阿片受體功能的缺失。此外，rs1799971多態(tài)性還被報道和可卡因、尼古丁、大麻等成癮性物質(zhì)的易感性有關(guān)。Matthes等[32]報道了敲除OPRM1基因的小鼠對成癮藥物犒賞效應(yīng)的敏感性低于野生小鼠。阿片受體拮抗劑已經(jīng)成功應(yīng)用于酒精依賴的臨床治療[34]。最新研究表明rs1799971位點突變可能是μ阿片受體納曲酮治療物質(zhì)依賴的作用靶點[35]。Korucuoglu等[36]借助功能核磁共振對17 ～ 21歲的飲酒人員進行研究，發(fā)現(xiàn)rs1799971位點AG-基因型攜帶者在接受酒精刺激后，大腦皮層活動高于其他基因型攜帶者。Bach等[37]報道了rs1799971位點攜帶G-等位基因的酒精依賴患者，在接受治療后復(fù)發(fā)的風(fēng)險較高。以上研究均提示rs1799971多態(tài)性和酒精依賴之間存在相關(guān)性。

本研究也存在一定的局限性：①在部分遺傳模型下檢測到了顯著的異質(zhì)性。盡管實施了亞組分析，但是異質(zhì)性并沒有得到徹底解決。亞組分析結(jié)果顯示異質(zhì)性在高加索人群和男-女混合亞組中較高，提示種族和性別是異質(zhì)性的重要來源。②納入的研究對象只包括亞洲人和高加索人，因此目前的研究結(jié)果只適用于這兩個種族，外部有效性仍有待探究。③納入的部分研究發(fā)表在2010年之前，當(dāng)時的檢測手段相對落后，可能會導(dǎo)致研究結(jié)果的偏差。④納入研究的發(fā)表年份跨度較大，不同研究使用的酒精依賴診斷標(biāo)準(zhǔn)并不一致，可能會引起選擇偏倚。⑤本研究只對OPRM1基因的rs1799971多態(tài)性進行了分析，位點-位點之間的相互作用可能會掩蓋或放大單一位點的效應(yīng)。

綜上所述，本研究表明OPRM1基因的rs1799971多態(tài)性和亞洲人群的酒精依賴風(fēng)險存在相關(guān)性，AG-基因型攜帶者發(fā)生酒精依賴的風(fēng)險較高?？紤]到本研究存在一定的局限性，需要在更多人群中開展高質(zhì)量研究來驗證本研究的結(jié)果。