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        正交試驗法優(yōu)選參葛顆粒的水提工藝

        2021-05-14 07:59:16涂清波
        現(xiàn)代鹽化工 2021年2期
        關鍵詞:藥渣浸出物枸杞子

        單 鑫,徐 丹,涂清波,陳 璟

        (南京中醫(yī)藥大學翰林學院,江蘇 泰州 225300)

        參葛顆粒由葛根、黨參、五味子、枸杞子、甘草5味藥組成,諸藥合用,具有養(yǎng)陰清熱、化瘀通絡的功效,對絡脈不和、酒毒傷中所引起的酒精性肝損傷有較好的養(yǎng)護作用[1-2]。

        水提藥物甘草中的主要有效成分是甘草苷、甘草酸銨;枸杞多糖是枸杞子中的有效成分,同時,醇提藥渣中也含有多糖類成分[3-4]。本研究選取甘草酸銨、甘草苷及水提浸出物得率作為考察指標,采用L9(34)正交試驗法優(yōu)選參葛顆粒的水提工藝,以擴大其適用范圍。

        1 試驗材料

        1.1 儀器

        WATERS Alliance-017(2998PDA,美國Waters公司),HH-420型水浴鍋(上海力辰邦西公司),F(xiàn)A1104N電子天平(上海天平儀器廠),MS-105DU型電子天平(Mettler Toledo),Milli-Q超純水系統(tǒng)(Millipore),KQ-500B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

        1.2 試藥

        甘草、枸杞子(安徽豐原銅陵中藥飲片有限公司),甘草苷、甘草酸銨(中國食品藥品檢定研究院),甲醇、乙腈(美國Merk公司),超純水(試驗室自制),其余試劑為分析純。

        2 方法與結果

        2.1 水提工藝設計

        按照L9(34)正交表設計水提工藝,以加水量(A)、提取次數(shù)(B)、提取時間(C)、浸泡時間(D)為考察因素,進行2味飲片的回流提取工藝優(yōu)選,選取甘草苷、甘草酸銨、水溶性浸出物為指標進行測定,各因素水平如表1所示。

        表1 水提工藝因素水平

        2.2 樣品處理方法

        稱取枸杞子10 g、甘草10 g,加入相應配方量按最佳醇提工藝提取后的藥渣,共9份,分別以相應的因素水平進行回流提取,水提液過濾,濃縮成浸膏,備用。

        2.3 甘草苷、甘草酸銨含量測定

        色譜條件為色譜柱:Tnature C18柱(4.6 mm×250.0 mm,5 μm),流動相為流動相A(乙腈)、流動相B(0.05%磷酸水),梯度洗脫,如表2所示。流速:1.0 mL/min,檢測波長:250 nm,柱溫:30 ℃,進樣量:10 μL。

        表2 流動相梯度洗脫程序

        稱取樣品浸膏適量(相當于甘草飲片0.2 g),精密稱定,置于250 mL錐形瓶中,精密量取70%乙醇100 mL加入,稱重,回流30 min,冷卻,稱重,用70%乙醇補足失重,搖勻,過濾,收取濾液,即得供試品溶液。

        2.4 水提浸出物得率測定

        取各水提正交樣品浸膏(相當于生藥飲片2 g),精密稱定,置于干燥恒重的蒸發(fā)皿中,置于105 ℃烘箱中,干燥3 h取出,置于干燥器中,冷卻30 min,放涼,精密稱重,計算水提浸出物得率。

        2.5 正交試驗結果與分析

        對于9份樣品中測得的甘草苷、甘草酸銨、水提浸出物得率,采用綜合評分法評價,綜合評分=0.5(Amax-Ai)+0.3(Bmax-Bi)+0.2(Cmax-Ci)+100。

        Ai為甘草苷質量,Amax為各組中甘草苷質量最大值;Bi為甘草酸銨質量,Bmax為各組中甘草酸銨質量最大值;Ci為浸出物得率,Cmax為各組中浸出物得率最大值,結果如表3~4所示。

        表3 L9(34)正交試驗結果

        表4 方差分析結果

        方差分析結果表明,試驗各因素對所選指標的影響依次為:C(提取次數(shù))>B(提取時間)>A(加水量)>D(浸泡時間);確定參葛顆粒水提最佳工藝為:A2B2C2D2,加入飲片總量的12倍水,浸泡0.5 h,提取2次,每次1.0 h。

        2.6 最佳水提工藝驗證

        稱取配方量10倍的枸杞子、甘草飲片3份,等比例加入醇提藥渣,依照上述優(yōu)選的水提工藝進行驗證,取樣測定浸膏中甘草苷、甘草酸銨及浸出物得率。每份樣品中甘草苷質量分別為30.38、31.24、30.44 mg,甘草酸銨質量分別為108.71、110.22、110.95 mg,浸出物得率分別為22.32%、22.98%、23.48%。結果表明,優(yōu)選工藝穩(wěn)定可行。

        3 討論

        3.1 提取工藝選擇

        參葛顆粒由5味藥物組成,以水溶性成分為主,如枸杞子的主要化學成分為枸杞多糖、甜菜堿、類胡蘿卜素、維生素C等,甘草的主要有效成分為三萜皂苷類、黃酮類、香豆素類、生物堿、有機酸、多糖等,本試驗選擇回流提取法[5-7]。

        3.2 評價指標選擇

        因醇提藥渣中多糖含量較大,對計算枸杞多糖轉移率的干擾較大,本試驗選取的甘草苷、甘草酸銨是甘草的主要有效成分,與《中國藥典》2020年版指標一致,從原料到制劑全面控制制劑質量,有助于提高臨床用藥的安全性及有效性[8-9]。

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