白雪梅 楊金川

摘要 [目的]建立一種適用氣相色譜-質譜 （GC-MS）測定番茄中胺鮮酯（DA-6）的方法。[方法]樣品經過乙腈提取、PSA凈化，濃縮，采用GC-SIM-MS檢測，基質外標法定量。[結果]胺鮮酯進樣質量濃度在10～500 μg/L與峰面積間線性關系良好，決定系數 （R2）為0.999 4，定量限 （LOQ）為0.010 mg/kg;在添加水平分別為0.01、0.05、0.20 mg/kg時，該方法的平均回收率在83.9%～102.0%，相對標準偏差 （RSD）在3.4%～9.3%。[結論]該方法簡便、快速，具有良好的靈敏度、重復性，可適用于番茄中胺鮮酯含量的測定。

關鍵詞 胺鮮酯;氣相色譜-質譜法;殘留含量;番茄

中圖分類號 TS 207.3文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2021）05-0200-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.05.056

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Determination of Diethyl Aminoethyl Hexanoate Residues in Tomatos by QuEChERS-Gas Chromatography-Mass Spectrometry

BAI Xue-mei1，YANG Jin-chuan2

（1.Guizhou Adverting Monitoring Center，Guiyang，Guizhou 550001;2.Institution of Supervision and Inspection Product Quality of Guizhou Province，Guiyang，Guizhou 550016）

Abstract [Objective]A residue analytical method was developed for diethyl aminoethyl hexanoate （DA-6） in tomato with gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）.[Method]The samples were extracted with acetonitrile，purified by PSA，concentrated，detected by GC-SIM-MS，and quantified by the matrix external standard method.[Result]The injection mass concentration of diethyl aminoethyl hexanoate had a good linear relationship with the peak area between 10-500 μg/L，the coefficient of determination （R2） was 0.9994，and the limit of quantification （LOQ） was 0.010 mg/kg.The average recoveries at three spiking levels （0.01，0.05，0.20 mg/kg） in tomatos were 83.9%- 102.0%，and the relative standard deviations （RSD） were 3.4%-9.3%.[Conclusion]The method is simple，fast，has good sensitivity and repeatability，and can be applied to the determination of diethyl aminoethyl hexanoate in tomato.

Key words Diethyl aminoethyl hexanoate （DA-6）;Gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）;Residues;Tomato

胺鮮酯（己酸二乙氨基乙醇酯，DA-6），分子式為C 12H 25NO 2，相對分子質量為215.33。胺鮮酯是20世紀90年代美國科學家首先發(fā)現的一種新型廣譜高效植物生長調節(jié)劑，有促進農作物生長、顯著提高作物產量等優(yōu)點，同時又有高效、低毒、低殘留、環(huán)境相容性好等特點，現廣泛應用于玉米、白菜、葡萄、番茄等作物的生長調節(jié)上。目前，關于胺鮮酯在農產品上的檢測研究已有很多報道，主要有氣相色譜法[1]、氣相色譜-質譜法（GC-MS）[2-4]、超高效液相色譜-質譜/質譜法（UPLC-MS/MS）[5-7]等。

關于胺鮮酯在番茄上的應用已有研究，如劉忠德[8]研究2%胺鮮酯水劑在番茄上的應用;劉海濤[9]研究了3%胺鮮酯·復硝酚鈉水劑對溫室大棚番茄產量及品質的影響;徐加利等[10]研究了復硝酚鈉和胺鮮酯·復硝酚鈉對大棚番茄生長和果實品質的影響。這些研究說明胺鮮酯已經被研究施用于番茄的生長生產調節(jié)上。但關于胺鮮酯在番茄上的檢測研究卻鮮見報道。該研究以番茄中的胺鮮酯為研究對象，建立了一套快速、準確、靈敏的GC-MS殘留分析方法，可用于測定番茄中胺鮮酯的殘留量，也可為該藥在其他果蔬中殘留檢測提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 氣相色譜-質譜聯用儀 （Agilent GC7890A/MS5975C，美國安捷倫公司）;振蕩混勻器 （MultiReax，Heieloph公司）;冷凍離心機 （Allegra X-22R ，美國貝克曼庫爾特公司）;數顯混勻儀 （IKA MS3，KA公司）;自動氮吹儀 （TufboVap LV，Biotage公司）。乙腈 （分析純）;乙酸乙酯 （色譜純）;氯化鈉 （分析純）;胺鮮酯標準品0.1 g （≥97.3%，Dr.Ehrenstorfer公司）。

1.2 樣品處理方法

1.2.1 樣品的制備。

取番茄樣品1 kg （個體較小的取全果處理;個體加大的以對稱軸切塊后處理），將其樣品切碎后混勻，通過四分法或將全部樣品轉入到組織搗碎機中搗碎成勻漿，放入聚乙烯瓶中，于-18 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品的前處理。

1.2.2.1 提取。勻漿的樣品稱取10 g （精確至0.01 g）于50 mL離心管中，加入乙腈10 mL振蕩提取30 min，再加入4～5 g NaCl振蕩提取5 min，然后以6 000 r/min離心5 min，待取上清液，凈化。

1.2.2.2 凈化。取6 mL上述上清液于15 mL聚丙烯QuEChERS凈化管（1 200 mg MgSO 4+400 mg PSA）中，渦旋振蕩1 min，8 000 r/min離心5 min，然后取2 mL離心上清液于玻璃試管中，45 ℃水浴中，氮吹吹至近干，用1 mL乙酸乙酯定容后，渦旋混合復溶，過0.22 μm濾膜到進樣小瓶中，待GC-MS檢測。

1.3 色譜條件

1.3.1 氣相色譜條件。色譜柱為石英毛細管柱HP-5 MS（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）;載氣為He，純度≥99.999%;氣體流速為1.00 mL/min;尾吹氣 （He）為60 mL/min;進樣方式為不分流進樣;進樣體積1 μL。程序升溫：初溫40 ℃，保持1 min，然后以30 ℃/min升至130 ℃，再以5 ℃/min升至160 ℃，最后以20 ℃/min升至300 ℃，保持5 min;共22 min。進樣口溫度250 ℃。

1.3.2 質譜條件。

離子源溫度230 ℃;四極桿溫度150 ℃;接口溫度240 ℃;電子轟擊 （EI） 離子源;電子能量70 eV;采集模式：選擇離子掃描 （SIM）模式，選擇離子為m/z 86、100、143，其中m/z 86為定量離子;溶劑延遲5 min。

上述條件下，胺鮮酯的保留時間為8.51 min。

1.4 標準曲線的繪制

準確稱取胺鮮酯標準品0.01 g（精確到0.000 1 g）于100 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至100 mL，得100 mg/L胺鮮酯標準母液，然后再用乙酸乙酯稀釋至10、20、50、100、500 ng/L的系列標準工作溶液，在“1.3”條件下進行測定。以目標物定量離子的峰面積（y）為縱坐標、進樣質量濃度（x）為橫坐標，繪制標準曲線，進行線性回歸分析。

1.5 添加回收試驗

取一定量的空白對照樣品，加入一定量的胺鮮酯標準溶液，按照“1.2.2”進行提取、凈化，以“1.3”色譜條件檢測，測定回收率及相對標準偏差（RSD）。胺鮮酯在番茄中的添加水平分別為0.01、0.05、0.20 mg/kg，每個添加濃度5次重復。

2 結果與分析

2.1 色譜條件的選擇

在實際的檢測中，既要保證待測物的完全分離，同時又要保證所有組分流出色譜柱，且分析時間越短越好，所以對于復雜的樣品，通常采用程序升溫方式。該研究參考文獻選用HP-5 MS色譜柱對胺鮮酯進行檢測摸索，并對升溫程序的升溫速率及分離效果進行反復試驗，優(yōu)化后的程序升溫速率見“1.3.1”。在此儀器條件下，胺鮮酯和雜質有很好的分離效果，色譜見圖1。

2.2 提取凈化條件的選擇

胺鮮酯在有機溶劑中有良好的溶解性，而乙腈可以和水混合互溶形成很好的共萃物，可以充分地提取目標物，然后在通過加氯化鈉（或飽和氯化鈉溶液），使乙腈和鹽水分層，分離出有機層，因此該試驗采用乙腈作為提取溶劑;而對凈化條件的選擇，該研究主要是參考文獻，使用QuEChERS （1 200 mg MgSO 4+400 mg PSA，賽分公司）凈化管按“1.2.2”方法凈化。

通過凈化和非凈化樣品對比，發(fā)現PSA能夠有效去除有機酸、部分色素等雜質，以及可以有效去除干擾峰，而對胺鮮酯沒有什么影響，所以該試驗采用乙腈作為提取溶劑，用PSA （QuEChERS凈化管）凈化。

2.3 方法的標準曲線、檢出限和定量限

基質效應是指基質成分和目標化合物在進行離子化時相互競爭而導致目標化合物信號強度有不同程度的增強或減弱的現象，其包括基質增強效應和基質抑制效應。基質效應=B/A×100%，式中，A 為在純溶劑中農藥的響應值;B 為樣品基質中添加的相同含量農藥的響應值。

以濃度500 ng/mL為例，在番茄基質樣品中的基質效應為215%，說明存在著明顯的基質增強效應。由于胺鮮酯在GC-MS上存在基質增強效應，為了減小基質效應的影響，該研究采用基質標曲定量。以番茄作為基質，再將其稀釋成質量濃度為10、20、50、100、500 μg/L的一系列基質標準工作溶液，在上述“1.3”色譜條件下進行測定。以目標物定量離子的峰面積 （y）為縱坐標、進樣質量濃度 （x）為橫坐標，進行線性回歸分析，結果表明，胺鮮酯進樣質量濃度在10～500 μg/L與峰面積呈良好的線性關系，決定系數R2為0.999 4。以3倍信噪比（S/N）時所對應的濃度為分析方法的檢出限（LOD），以最小添加濃度作為方法的定量限（LOQ），該方法的LOD和LOQ分別為0.005、0.010 mg/kg。

2.4 方法的精密度與回收率

當樣品中的添加水平分別為0.01、0.05、0.20 mg/kg時，胺鮮酯在番茄樣品中的平均添加回收率在83.9%～102.0%，相對標準偏差 （RSD）在3.4%～9.3% （表1），結果表明該方法具有良好的精密度、準確度和重現性。

2.5 番茄樣品的檢測

30份市售番茄樣品，通過“1.2”前處理，以“1.3”質譜條件檢測，結果顯示，有2份樣品檢測出陽性，檢出率為6.7%，其中最高的檢出值為0.04 mg/kg;其余樣品均未檢出。

3 討論與結論

謝柳青等[1]介紹的GC-FID測定胺鮮酯在小白菜中的殘留方法，該方法前處理操作繁瑣，基質干擾強，且氫火焰離子化檢測器（FID）容易出現假陽性;梁林等[2-4]報道的方法中采取傳統(tǒng)提取過程，該方法操作煩瑣復雜且耗時，消耗大量有機溶劑。該研究建立了GC-MS法快速測定番茄中胺鮮酯含量的分析方法，該方法用乙腈提取，QuEChERS凈化濃縮，GC-MS檢測，

該方法前處理簡單快速、易于操作、重現性好、靈敏度和準確度高、線性范圍寬且線性關系良好，解決了傳統(tǒng)方法操作煩瑣復雜耗時且消耗大量有機溶劑的缺點，更適用于番茄中胺鮮酯的快速定性和定量檢測，也可為胺鮮酯在其他果蔬中的檢測提供參考。

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