楊博磊 耿海榮 王 剛 張晨曦 李 麗 聶呈榮 邢福國 劉 陽

(1中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品加工綜合性重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193；2佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院，食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東 佛山 528231)

花生營養(yǎng)價(jià)值極高，含有人體必需的8 種氨基酸，同時(shí)具有抗衰老，保持皮膚滋潤細(xì)膩等功能，被譽(yù)為“長生果”，同時(shí)花生中脂肪含量高達(dá)47%～59%，是我國乃至世界的重要油料作物[1]。目前，全球已超過100 個(gè)國家種植花生，世界花生的種植面積約0.23 億hm2，年總產(chǎn)量約3 500 萬t；我國作為花生種植和生產(chǎn)大國，花生種植面積約0.05 億hm2，年產(chǎn)量約1 700 萬t[2]。然而花生在種植、收獲、儲(chǔ)藏和加工過程中極易受黃曲霉毒素污染，國內(nèi)及國際對(duì)我國花生及其制品黃曲霉毒素超標(biāo)現(xiàn)象時(shí)有報(bào)道。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2015—2018年國家及各省(市)市場(chǎng)監(jiān)督管理局通報(bào)我國食品真菌毒素超標(biāo)事件602 起，其中花生黃曲霉毒素超標(biāo)事件372 起，占62%；2015—2018年我國出口歐盟食品和飼料真菌毒素違例事件241 起，其中花生黃曲霉毒素超標(biāo)事件223 起，占93%。黃曲霉毒素污染嚴(yán)重制約了我國花生產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

黃曲霉毒素(aflatoxin，AFT)主要是由黃曲霉菌(Aspergillus flavus)和寄生曲霉菌(A.parasitica)產(chǎn)生的有毒次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有劇毒性、致癌性和致突變性，可污染包括花生在內(nèi)的幾乎所有農(nóng)產(chǎn)品[3]。AFT 的存在形式主要有黃曲霉毒素B1(AFB1)、黃曲霉毒素B2(AFB2)、黃曲霉毒素G1(AFG1)和黃曲霉毒素G2(AFG2)，其毒性依次為AFB1＞AFG1＞AFB2＞AFG2，其中AFB1被聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations，F(xiàn)AO)和世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)列為Ⅰ級(jí)致癌物[4-5]?；贏FT 的危害，世界各地針對(duì)花生及其制品中AFT 含量也制定了嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，例如，我國對(duì)AFB1限量標(biāo)準(zhǔn)為≤20 μg·kg-1；國際食品污染物法典委員會(huì)(Codex Committee on Contaminants in Food，CCCF)對(duì)AFT 限量標(biāo)準(zhǔn)為≤15 μg·kg-1；歐盟對(duì)AFT 限量標(biāo)準(zhǔn)為≤4 μg·kg-1，AFB1為≤2 μg·kg-1；美國對(duì)AFT 限量標(biāo)準(zhǔn)為≤20 μg·kg-1，加拿大對(duì)AFT限量標(biāo)準(zhǔn)為≤15 μg·kg-1，澳大利亞/新西蘭對(duì)AFT 限量標(biāo)準(zhǔn)為≤15 μg·kg-1，日本對(duì)AFT 限量標(biāo)準(zhǔn)為≤10 μg·kg-1[6]。研究發(fā)現(xiàn)，土壤類型可顯著影響花生AFT污染，淋溶土壤中花生受AFT 污染的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于變性土壤，黏土土壤中花生受AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)顯著高于沙土土壤[7-8]。土壤中存在豐富的微生物，而花生作為一種地上開花地下結(jié)果的作物，與土壤中的微生物直接接觸，從而易受微生物侵染。國內(nèi)外已經(jīng)開展了花生土壤中微生物菌群分布特征研究，并根據(jù)土壤特征制定有針對(duì)性的防控措施[9-13]。戴顯紅[14]研究發(fā)現(xiàn)花生土壤中芽孢桿菌、乳球菌等能有效抑制黃曲霉菌生產(chǎn)和產(chǎn)毒，從而降低花生產(chǎn)后AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)。朱婷婷[15]和張初署[16]研究發(fā)現(xiàn)，土壤中不產(chǎn)毒黃曲霉菌能夠抑制產(chǎn)毒黃曲霉菌生長和產(chǎn)毒，同時(shí)根據(jù)花生土壤中黃曲霉菌的分布、產(chǎn)毒特征等信息，評(píng)估了我國不同產(chǎn)區(qū)花生產(chǎn)后AFT 污染的風(fēng)險(xiǎn)，但并未進(jìn)行實(shí)際監(jiān)測(cè)。

本研究從我國4 個(gè)典型花生產(chǎn)區(qū)黃河流域產(chǎn)區(qū)(河北保定)、西北產(chǎn)區(qū)(新疆吐魯番)、長江流域產(chǎn)區(qū)(湖北黃岡、四川南充)和東南沿海產(chǎn)區(qū)(廣東湛江)采集花生土壤樣品124 份，進(jìn)行花生土壤黃曲霉菌分布及產(chǎn)毒能力研究，并在所在產(chǎn)區(qū)收集花生樣品64 份開展產(chǎn)后花生AFT 污染調(diào)查，探究花生土壤中黃曲霉菌分布及產(chǎn)毒能力與產(chǎn)后花生AFT 污染的相關(guān)性，以期為我國花生AFT 污染監(jiān)測(cè)預(yù)警和防控提供理論依據(jù)，這對(duì)提高我國花生質(zhì)量安全和促進(jìn)我國花生產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

2019年從我國黃河流域產(chǎn)區(qū)(河北保定)、西北產(chǎn)區(qū)(新疆吐魯番)、長江流域產(chǎn)區(qū)(湖北黃岡、四川南充)和東南沿海產(chǎn)區(qū)(廣東湛江)4 個(gè)典型花生主產(chǎn)區(qū)采集花生樣品64 份，土壤樣品124 份，其中黃棕壤38 份(湖北黃岡和四川南充)、紅壤土32 份(廣東湛江)、沙壤土54 份(河北保定和新疆吐魯番)。

DG-18 培養(yǎng)基，青島海博生物技術(shù)有限公司；蛋白胨，北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司；甲醇(色譜純)、乙腈(色譜純)，美國Fisher 公司；黃曲霉毒素免疫親和柱，中檢環(huán)貿(mào)生物技術(shù)(北京)有限公司；AFB1標(biāo)準(zhǔn)品，青島普瑞邦生物工程有限公司，磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered solution，PBS)，北京索萊寶科技有限公司。

1.2 主要儀器與設(shè)備

Vertical 高壓蒸汽滅菌鍋，臺(tái)灣造鑫公司；HR3011 A2 型生物安全柜，青島海爾特種設(shè)備有限公司；Genius 3 渦旋混合器，德國IKA 公司；Sigma1-14小型高速離心機(jī)，美國Sigma 公司；Agilent 1260 高效液相色譜，TC-C18 色譜柱，美國Agilent 公司；HF2500光化學(xué)衍生器，北京華安麥科生物技術(shù)有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 土壤中黃曲霉菌的篩選及分離純化 在超凈工作臺(tái)中稱取10 g 土壤樣品，倒入無菌300 mL 三角瓶中，加入90 mL 無菌蛋白胨水溶液(蛋白胨濃度為0.1%)，封口震蕩30 min，靜置10 min，取上清為原濃度菌懸液，取1 mL 原濃度菌懸液加入裝有9 mL 濃度為0.1%的蛋白胨水溶液中，渦旋混勻，制成10 倍稀釋液。所有土樣按此操作依次進(jìn)行10 倍稀釋。取100 μL 原濃度菌懸液和稀釋液，分別涂布于DG-18 平板，在28℃培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)5 d，之后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。選取長有黃綠色孢子的黃曲霉菌或寄生曲霉菌在DG-18 平板上進(jìn)行2 次分離，直至得到單個(gè)菌落。

1.3.2 黃曲霉菌的鑒定 將分離純化的單個(gè)菌落送至青島派森諾基因科技有限公司進(jìn)行真菌鈣調(diào)基因序列測(cè)序，測(cè)序結(jié)果在BLAST researches 上進(jìn)行比對(duì)。

1.3.3 黃曲霉菌產(chǎn)毒能力分析 菌株在DG-18 培養(yǎng)基上28℃活化7 d，用0.1%吐溫80 配制菌懸液，調(diào)整孢子濃度至107cfu·mL-1，取100 μL 孢子液接種到10 mL 產(chǎn)毒培養(yǎng)基中，28℃、200 r·min-1培養(yǎng)7 d，取1 mL菌懸液，加入3 mL 84%乙腈，渦旋充分混勻，取2 mL提取液依據(jù)黃曲霉毒素免疫親和柱操作方法提取AFB1，加入23 mL 50 mmol·L-1PBS(pH 值7.4)上柱，流速控制在1～3 mL·min-1，待樣品完全通過凝膠后，用10 mL 10 mmol·L-1PBS/甲醇(90/10，v/v)溶液洗滌凝膠，然后用1 mL 甲醇洗脫AFB12 次，洗脫液過0.22 μm 濾器，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，HPLC)檢測(cè)。

HPLC 檢測(cè)條件:TC-C18 色譜柱(4.6 nm×250 mm，5 μm)，柱 溫30℃，流 動(dòng) 相70% 甲 醇，流 速1 mL·min-1，進(jìn)樣量20 μL，激發(fā)波長360 nm，發(fā)射波長440 nm，配備光化學(xué)衍生器。

黃曲霉菌產(chǎn)毒濃度=HPLC 檢測(cè)濃度×稀釋濃度

1.3.4 土壤中黃曲霉的檢出率 土壤樣品黃曲霉的檢出率是指每個(gè)采樣地樣品中能夠分離出黃曲霉菌的樣品占總樣品的百分?jǐn)?shù)。

1.3.5 花生樣品處理及黃曲霉毒素檢測(cè) 依據(jù)GB 5009.22-2016 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B 族和G 族的測(cè)定》[17]處理花生樣品并測(cè)定黃曲霉毒素。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS Inc 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用方差分析(ANOVA)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用Tukey 多區(qū)間檢驗(yàn)確定平均值間的差異(P≤0.05)。采用Microsoft Excel 2007 制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃曲霉菌的分離純化

采用稀釋法分別對(duì)河北保定、新疆吐魯番、湖北黃岡、四川南充和廣東湛江共124 份土壤樣品進(jìn)行黃曲霉菌和寄生曲霉菌分離、純化，篩選獲得可產(chǎn)黃綠色孢子菌共計(jì)203 株。

2.2 黃曲霉分子生物學(xué)鑒定

利用真菌ITS 鑒定方法，把分離純化出的產(chǎn)黃綠色孢子菌株送至青島派森諾基因科技有限公司，經(jīng)過菌株P(guān)CR、PCR 產(chǎn)物純化及測(cè)序，獲得的測(cè)序結(jié)果于NCBI 核酸數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行BLAST 數(shù)據(jù)比對(duì)分析，共篩選獲得黃曲霉菌165 株，寄生曲霉0 株。

2.3 不同地區(qū)花生種植土壤黃曲霉菌分布

由表1可知，5 個(gè)取樣點(diǎn)花生土壤中，湖北黃岡地區(qū)篩選獲得的黃曲霉菌最多，為66 株，菌落數(shù)范圍為0～1 700 cfu·g-1，平均值為314 cfu·g-1，檢出率為61.90%；其次為四川南充，黃曲霉菌為33 株，菌落數(shù)范圍為0～700 cfu·g-1，平均值為194 cfu·g-1，檢出率為64.71%；廣東湛江地區(qū)共篩選獲得黃曲霉菌35 株，檢出率為50.00%，菌落數(shù)范圍為0～700 cfu·g-1；最低為河北保定，黃曲霉菌為5 株，菌落數(shù)范圍為0～200 cfu·g-1，平均值為25 cfu·g-1，檢出率為15.00%。表明我國南方氣候潮濕地區(qū)，土壤中黃曲霉菌數(shù)量高于北方地區(qū)。

表1 不同地區(qū)花生種植土壤中黃曲霉菌分布Table 1 Distribution of A.flavus in peanut fields in different regions

2.4 不同地區(qū)花生土壤中黃曲霉產(chǎn)毒特征研究

根據(jù)產(chǎn)毒能力不同，黃曲霉菌被分為4 個(gè)水平，分別為高產(chǎn)毒菌(AFB1＞1 000 μg·kg-1)、中產(chǎn)毒菌(AFB1＞100～1 000 μg·kg-1)、低產(chǎn)毒菌(AFB1＞0～100 μg·kg-1)和不產(chǎn)毒菌(AFB1=0 μg·kg-1)[16]。由表2可知，在河北保定、新疆吐魯番、湖北黃岡、四川南充和廣東湛江5 個(gè)地區(qū)分離的黃曲霉菌種，不產(chǎn)毒菌所占比例分別為0%、15.38%、12.12%、27.27%和2.94%，四川南充不產(chǎn)毒菌所占比例高于其他地區(qū)；低產(chǎn)毒菌在5 個(gè)地區(qū)所占比例均相對(duì)較高，其中廣東湛江低產(chǎn)毒菌所占比例高于其他地區(qū)；中產(chǎn)毒菌在河北保定所占比例最高，為60.00%，其次為廣東湛江，占29.41%，四川南充所占比例最低，為21.21%；河北保定不存在高產(chǎn)毒菌，四川南充高產(chǎn)毒菌所占比例最高，為12.12%。湖北黃岡、廣東湛江、四川南充和新疆吐魯番分離的低產(chǎn)毒菌所占比例相對(duì)較高，而河北保定分離的中產(chǎn)毒菌所占比例最高。由于河北保定篩選出的黃曲霉菌數(shù)量較少，因此不能很好的體現(xiàn)河北保定地區(qū)土壤中黃曲霉菌的產(chǎn)毒特征。

表2 不同地區(qū)花生種植土壤中黃曲霉菌產(chǎn)AFB1 能力分布Table 2 Producing ability of AFB1 of A.flavus in peanut fields in different regions

2.5 不同地區(qū)花生受黃曲霉污染風(fēng)險(xiǎn)分析

由表3可知，5 個(gè)地區(qū)中黃曲霉平均產(chǎn)AFB1量以及每克土壤中產(chǎn)AFB1量存在較大差異。黃曲霉平均產(chǎn)毒量最高的地區(qū)是四川南充，為707 μg·kg-1，產(chǎn)毒范圍是0～12 118 μg·kg-1；其次是湖北黃岡，平均產(chǎn)毒量為599 μg·kg-1，產(chǎn)毒范圍是0～24 005 μg·kg-1；廣東湛江地區(qū)黃曲霉平均產(chǎn)毒量為377 μg·kg-1；河北保定地區(qū)黃曲霉平均產(chǎn)毒量為172 μg·kg-1；黃曲霉平均產(chǎn)毒量最低的是新疆吐魯番，為141 μg·kg-1。每克土壤中平均產(chǎn)AFB1量較高的地區(qū)是湖北黃岡和四川南充，達(dá)到了130 000 μg·kg-1·g-1以上；其次是廣東湛江和新疆吐魯番地區(qū)，分別為41 093 μg·kg-1·g-1和10 716 μg·kg-1·g-1；河北保定最低，為4 300 μg·kg-1·g-1。說明，湖北黃岡產(chǎn)后花生受AFB1污染風(fēng)險(xiǎn)最高，其次為四川南充、廣東湛江和新疆吐魯番，河北保定產(chǎn)后花生受AFB1污染風(fēng)險(xiǎn)最低。

表3 不同地區(qū)花生土壤中黃曲霉菌平均產(chǎn)AFB1 量Table 3 Quantities of aflatoxin B1 produced by A.flavus isolated among peanut fields in different regions

2.6 不同地區(qū)產(chǎn)后花生黃曲霉毒素污染情況分析

由表4可知，5 個(gè)地區(qū)花生樣品中均檢測(cè)到AFB1，檢出率分別為13%(河北保定)、14%(新疆吐魯番)、57%(湖北黃岡)、38%(四川南充)和31%(廣東湛江)。河北保定、新疆吐魯番、廣東湛江和四川南充未檢測(cè)到花生AFB1超標(biāo)情況，湖北黃岡檢測(cè)到2 份花生樣品AFB1超標(biāo)，超標(biāo)率為10%，檢出濃度分別為97.93 μg·kg-1和31.79 μg·kg-1。由此可知，湖北黃岡產(chǎn)后花生受AFB1污染最嚴(yán)重，其次為四川南充、廣東湛江、新疆吐魯番，河北保定產(chǎn)后花生受AFB1污染較輕?；ㄉ蹵FB1污染風(fēng)險(xiǎn)分析結(jié)果與實(shí)際檢測(cè)結(jié)果一致。

3 討論

花生是我國重要的油料與經(jīng)濟(jì)作物，營養(yǎng)價(jià)值豐富，有益人體健康。我國是世界花生出口第一大國，占花生國際市場(chǎng)總貿(mào)易的40%以上。然而花生極易受AFT 污染，僅2018年歐盟通報(bào)我國花生AFT 超標(biāo)事件就41 起，占我國出口歐盟食品和飼料違例事件的19%，AFT 已成為限制我國花生出口貿(mào)易的主要危害因子?；ㄉ悬S曲霉菌的主要來源是土壤，花生莢果黃曲霉帶菌量與土壤中黃曲霉數(shù)量呈正相關(guān)性[18-20]。研究發(fā)現(xiàn)，我國土壤中黃曲霉菌分布有明顯的地域性特征，長江流域土壤中黃曲霉菌量最多，其次為東南沿海地區(qū)，再次為黃河流域，東北地區(qū)黃曲霉菌量最少，由南到北土壤中黃曲霉菌數(shù)量逐漸減少[3，15-16]。本研究結(jié)果表明，湖北黃岡土壤黃曲霉菌帶菌量最高，為314 cfu·g-1，其次四川南充為194 cfu·g-1，河北保定土壤黃曲霉帶菌量最少，為25 cfu·g-1。表明我國花生土壤中黃曲霉菌落數(shù)與生態(tài)環(huán)境存在相關(guān)性，氣候潮濕、溫度較高的長江和東南沿海產(chǎn)區(qū)土壤中黃曲霉菌落數(shù)較多，氣候干燥、溫度較低的北方和西北產(chǎn)區(qū)土壤中黃曲霉菌落數(shù)較少。我國上述5 個(gè)地區(qū)花生土壤中黃曲霉菌平均菌落數(shù)范圍為25～314 cfu·g-1，與國外相比，低于美國愛荷華州玉米和谷物土壤中黃曲霉菌落數(shù)(396 cfu·g-1)和美國密西西比州小麥土壤中黃曲霉菌落數(shù)(457 cfu·g-1)[21-22]，高于日本神奈川縣花生土壤中黃曲霉菌落數(shù)(9 cfu·g-1)[23]，其中廣東湛江花生土壤中黃曲霉菌菌落數(shù)與阿根廷玉米土壤中黃曲霉菌菌落數(shù)(100 cfu·g-1)相當(dāng)[24]。

表4 不同地區(qū)產(chǎn)后花生AFB1 污染情況Table 4 The contaminated situation of AFB1 in harvest peanut in different regions

針對(duì)全國花生土壤中黃曲霉菌產(chǎn)毒能力研究，張初署[16]發(fā)現(xiàn)我國花生土壤中產(chǎn)毒菌所占比例為69%，不產(chǎn)毒菌所占比例最高，為31%；朱婷婷[15]發(fā)現(xiàn)我國花生土壤中產(chǎn)毒菌所占比例為79%，其中低產(chǎn)毒菌所占比例最高，為43%；張杏[3]發(fā)現(xiàn)我國花生土壤中產(chǎn)毒黃曲霉菌比例為85%，其中高產(chǎn)毒菌所占比例最高，為44%。本研究發(fā)現(xiàn)，花生土壤中黃曲霉菌產(chǎn)毒菌所占比例為87%，其中低產(chǎn)毒菌所占比例為52%，中產(chǎn)毒菌所占比例為27%。綜合多次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，我國花生土壤中產(chǎn)毒黃曲霉菌平均比例為70%～85%，但低、中和高產(chǎn)毒菌所占比例差異較大，分析可能與取樣當(dāng)年季節(jié)氣候以及土壤類型等有關(guān)。針對(duì)個(gè)別花生產(chǎn)區(qū)花生土壤中黃曲霉菌產(chǎn)毒能力研究，朱婷婷等[25]發(fā)現(xiàn)湖北地區(qū)花生土壤黃曲霉平均菌落數(shù)為128 cfu·g-1，其中產(chǎn)毒黃曲霉菌占96%。張杏等[26]發(fā)現(xiàn)西南地區(qū)四川蓬安花生土壤黃曲霉平均菌落數(shù)為212 cfu·g-1，其中產(chǎn)毒黃曲霉菌占100%。本研究中，湖北黃岡地區(qū)花生土壤黃曲霉平均菌落數(shù)為314 cfu·g-1，其中產(chǎn)毒黃曲霉菌約占88%，土壤帶菌量高于朱婷婷等[25]的研究結(jié)果，但產(chǎn)毒菌比例低于其結(jié)果；四川南充地區(qū)花生土壤黃曲霉平均菌落數(shù)為194 cfu·g-1，產(chǎn)毒黃曲霉菌約占73%，其中土壤帶菌量與張杏等[26]的調(diào)查結(jié)果相近。

通過對(duì)不同地區(qū)花生受AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)分析發(fā)現(xiàn)，湖北黃岡花生受AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)最大，每克花生土壤中AFB1平均產(chǎn)量為188 086 μg·kg-1；其次為四川南充、廣東湛江和新疆吐魯番；河北保定花生受AFB1污染風(fēng)險(xiǎn)最小。這與張初署[16]研究結(jié)果一致，即通過對(duì)全國花生土壤中AFB1產(chǎn)量調(diào)查發(fā)現(xiàn)，長江流域土壤中AFB1產(chǎn)量最高，花生受AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)最高。朱婷婷[15]研究發(fā)現(xiàn)南方產(chǎn)區(qū)花生受AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)最高，其次為長江流域產(chǎn)區(qū)，東北產(chǎn)區(qū)花生受AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)最低。河北和新疆氣候環(huán)境相似，取樣當(dāng)年新疆未存在極端天氣，氣候與常年類似，然而本研究發(fā)現(xiàn)新疆土壤中黃曲霉菌數(shù)量是河北地區(qū)的3.04 倍，且每克土壤產(chǎn)AFB1量是河北的2.49 倍，同時(shí)土壤中還存在高產(chǎn)毒黃曲霉菌。因此新疆吐魯番地區(qū)花生AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于河北保定地區(qū)。新疆地廣人稀，花生產(chǎn)業(yè)潛力巨大，需更加重視花生AFT 的防控工作。

產(chǎn)后花生AFT 污染調(diào)查發(fā)現(xiàn)，長江流域的湖北黃岡和四川南充AFB1檢出率較高，同時(shí)在湖北黃岡地區(qū)檢測(cè)到2 份樣品AFB1超標(biāo)；其次為東南沿海的廣東湛江，檢出率為31%；河北保定和新疆吐魯番檢出率分別為13%和14%。AFB1檢出率高低順序?yàn)楹秉S岡＞四川南充＞廣東湛江＞新疆吐魯番＞河北保定。國內(nèi)研究人員也開展了全國不同地區(qū)花生AFT 污染調(diào)查。李娟[27]開展中國十二省花生AFT 污染調(diào)查，南方產(chǎn)區(qū)花生AFT 陽性率高于長江流域產(chǎn)區(qū)、北方產(chǎn)區(qū)和東北產(chǎn)區(qū)，陽性率為83.15%。丁小霞[28]完成了13 個(gè)花生主產(chǎn)省花生AFT 污染調(diào)查，發(fā)現(xiàn)長江流域產(chǎn)區(qū)AFT 污染最為嚴(yán)重，東北產(chǎn)區(qū)最輕，AFT 污染地域特征明顯。程果等[29]開展2017年花生主產(chǎn)區(qū)花生AFT 污染調(diào)查，發(fā)現(xiàn)北方產(chǎn)區(qū)AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)較高，而東北產(chǎn)區(qū)及內(nèi)蒙古未檢測(cè)到花生AFT 污染。高秀芬等[30]對(duì)吉林省、河南省、湖北省、四川省、廣東省和廣西自治區(qū)花生樣品進(jìn)行AFT 污染調(diào)查，發(fā)現(xiàn)吉林省花生檢出率最高，為67%，河南省檢出率最低，為43%。本研究結(jié)果與丁小霞[22]的調(diào)查結(jié)果一致，長江流域產(chǎn)區(qū)及東南沿海產(chǎn)區(qū)由于氣候等因素AFT 污染較為嚴(yán)重。花生AFT 檢測(cè)結(jié)果與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果一致，花生土壤中黃曲霉菌帶菌量越多，產(chǎn)毒菌比例越高，產(chǎn)毒能力越強(qiáng)，產(chǎn)后花生受AFT 污染越嚴(yán)重。

4 結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)我國花生種植土壤中黃曲霉菌分布呈明顯的地域性特征，湖北黃岡土壤黃曲霉帶菌量最多，檢出率最高；河北保定花生土壤帶菌量最少，檢出率最低?；ㄉ寥乐悬S曲霉菌以中低產(chǎn)毒菌所占比例最高。通過對(duì)不同地區(qū)花生土壤AFT 污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估發(fā)現(xiàn)，湖北黃岡地區(qū)花生受AFB1污染風(fēng)險(xiǎn)最高，其次為四川南充、廣東湛江和新疆吐魯番，河北保定風(fēng)險(xiǎn)最低。對(duì)不同產(chǎn)區(qū)產(chǎn)后花生AFB1檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，湖北黃岡產(chǎn)后花生AFB1檢出率最高，河北保定AFB1檢出率最低，花生AFB1污染檢測(cè)結(jié)果與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果一致。說明產(chǎn)后花生受AFB1污染情況與花生土壤中黃曲霉菌的數(shù)量、產(chǎn)毒菌比例及產(chǎn)毒能力呈極強(qiáng)正相關(guān)性。本研究結(jié)果表明，通過對(duì)花生土壤黃曲霉菌的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可預(yù)知產(chǎn)后花生的AFB1污染情況，以便做好防控工作，這對(duì)提高我國花生質(zhì)量水平，保障我國花生消費(fèi)安全具有重要意義。