劉學超

(江蘇省豐縣畜牧獸醫(yī)站，221700)

現(xiàn)在對養(yǎng)豬業(yè)構(gòu)成嚴重危害的傳染病有豬瘟、O型口蹄疫、藍耳病等典型疾病，即使每年都在使用疫苗進行預防，也難以避免上述疾病的發(fā)生[1]。究其原因可能是流行病毒的毒力變遷、與免疫疫苗血清型與流行毒株不符以及疫苗的免疫方法、免疫程序不合理等，作者通過實地調(diào)研發(fā)現(xiàn)，基層獸醫(yī)防疫人員在使用疫苗時，使用的劑量過大，免疫程序過于隨意，導致免疫效果無法得到保證，為了探討豬瘟疫苗最佳免疫方法，本文對豐縣某養(yǎng)殖場中豬瘟疫苗免疫方法進行了相關實驗。

1 材料與方法

1.1試驗動物

作者將豐縣某豬場40-50日齡未經(jīng)任何疫苗免疫的仔豬135頭作為試驗對象，對試驗豬進行豬瘟、口蹄疫、藍耳病的基礎抗體滴度進行測定，結(jié)果顯示這3種抗體皆為陰性。

1.2試驗疫苗、測試用品及儀器

1.2.1試驗疫苗 豬O型口蹄疫滅活苗，生產(chǎn)批號：A110104J，生產(chǎn)廠家：中農(nóng)威特生物科技股份有限公司。政府采購豬瘟活疫苗（傳代細胞苗），生產(chǎn)批號：1030，生產(chǎn)廠家：廣東永順生物制藥有限公司。高致病性藍耳病滅活苗，生產(chǎn)批號：201312007，生產(chǎn)廠家：北京信得威特科技有限公司。

1.2.2測試用品 該實驗需要的測試用品主要為檢測試劑及檢測卡，均購自于上海市某生物科技有限公司。

1.2.3實驗儀器及器械 高速臺式離心機 TGL-17B，振蕩器ZW-A，電熱恒溫鼓風干燥箱DHG-7320，酶標金屬注射器等。

1.3試驗場地與飼養(yǎng)管理要求

試驗地附近無其他豬舍，進行單獨隔離飼養(yǎng)，飼喂同樣飼料，實行封閉管理。

1.4試驗分組

將105頭仔豬隨機分成5組：第1組21頭，注射豬瘟活疫苗；第2組21頭，同時分點注射O型口蹄疫和豬瘟疫苗，間隔7 d后再注射高致病性藍耳病疫苗；第3組21頭，同時分點注射口蹄疫和高致病性藍耳病疫苗，間隔7 d后再注射豬瘟疫苗；第4組21頭，同時分點注射高致病性藍耳病和豬瘟疫苗，間隔7d后再注射口蹄疫疫苗；第5組21頭，同時分點注射口蹄疫、豬瘟及高致病性藍耳病疫苗。

1.5免疫抗體檢測

免疫后的15d、22d、29d、36d和43d經(jīng)前腔靜脈采血，分離血清。采用間接ELISA法進行豬瘟IgG抗體測定，具體步驟參照說明書。

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

檢測血清樣品采用酶標儀于波長450 nm下測定其OD值，實驗所得結(jié)果SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計學分析。

1.7增加疫苗劑量免疫接種

將30頭豬分為第6組和第7組，第6組維持原劑量，第7組增加疫苗免疫量，具體免疫有效劑量：口蹄疫疫苗2 mL、豬瘟疫苗2頭份、高致病性豬藍耳病滅活苗3mL。免疫方法同1.7。

2 結(jié)果與分析

2.1免疫副反應

逐頭觀察和記錄各試驗豬免疫后4d內(nèi)的精神、采食、體溫變化等免疫副反應情況。試驗組1～4組免疫豬除第2組1頭死亡外，其他正常。

試驗第5組免疫豬中有1頭出現(xiàn)氣喘、精神萎靡、食欲不正常、體溫上升等免疫副反應，副反應率為6.5%。

2.2不同免疫程序豬瘟抗體的產(chǎn)生情況

從表1和圖1可以看出，豬瘟抗體在免疫后的29d達到最高抗體水平，之后開始下降。第4、5組抗體水平較低，豬瘟免疫抗體水平接種后36d才達到最高值，說明3種疫苗分點同時注射對豬瘟抗體的產(chǎn)生有影響，推遲了豬瘟免疫抗體水平。

2.3不同免疫程序在免疫后36d的抗體合格率

檢測采用ELISA方法，具體操作參照試劑盒說明書進行。結(jié)果見表2，所有組的合格率達到了國家規(guī)定的標準。其中第5組3種疫苗同時分點注射免疫和單獨免疫及分兩次免疫相比，其合格率無明顯差異。

表1 免疫豬豬瘟IgG抗體間接ELISA檢測

圖1 免疫豬豬瘟IgG抗體間接ELISA檢測

第1組：單獨免疫CFS；第2組：同時分點免疫FMD、CSF，7 d后免疫PRRS；第3組：同時分點免疫FMD、PRRS，7 d后免疫CSF；第4組：同時分點免疫CSF、PRRS，7 d后免疫FMD；第5組：同時分點免疫3種疫苗；

表2 免疫后36 d后CSF抗體的合格率

表3增加免疫劑量后免疫豬豬瘟間接ELISA檢測的IgG抗體

2.4增加免疫劑量后免疫效果

未增加劑量組（第6組）和增加劑量組（第7組）進行比較后發(fā)現(xiàn)豬瘟抗體幾何平均效價無明顯差別，見表3。因此，適當增加豬瘟疫苗免疫劑量，并不能增強免疫效果[2,3]]?？赡苁且驗閯┝窟^少不足以引起免疫應答，免疫劑量大時，不但起不到較好的免疫效果，反而會使機體形成免疫耐受，抗體滴度降低[3,4]。

2.5不同免疫方法對豬瘟免疫的影響

3種疫苗同時分點免疫在實際生產(chǎn)中具有很大優(yōu)勢，包括：減少人工成本，生物危險降低，相應免疫應急減弱等[5]。本實驗將豬瘟、豬口蹄疫、豬高致病性藍耳病3種疫苗同時采取分點免疫其免疫副反應、抗體效價與單獨免疫及兩兩結(jié)合免疫結(jié)果沒有明顯的差別。

3 結(jié)論

通過豬場試驗和田間試驗，檢測抗體效價度以及抗體合格率后結(jié)果顯示，O型口蹄疫、藍耳病疫苗和豬瘟疫苗同時分點免疫的抗體效價與單獨免疫及兩兩結(jié)合免疫效果無顯著差異，豬瘟疫苗與O型口蹄疫、藍耳病同時免疫時可能存在一定的干擾作用，雖然免疫效價推遲，但仍維持在較高水平，且抗體合格率都達到了國家規(guī)定的標準[6]。而單獨增加豬瘟疫苗的免疫劑量，抗體檢測后，其效價變化不大，免疫效果并不明顯[7,8]。綜上所述，在免疫效果達標的前提下，為節(jié)約成本，減少多次免疫引發(fā)的豬應激反應，特別是在散養(yǎng)戶和小型養(yǎng)豬場，可以推廣豬瘟和O型口蹄疫、藍耳病疫苗同時分點注射的免疫方式；在生產(chǎn)實踐中，豬瘟疫苗的免疫劑量應以說明書為準[9,10]。

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