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        桑黃抗肝纖維化及其作用機(jī)理的探究

        2021-04-03 16:18:37王松偉
        中國保健營養(yǎng) 2021年1期
        關(guān)鍵詞:桑黃基轉(zhuǎn)移酶組內(nèi)

        王松偉

        延邊靈樺工坊生物科技有限公司,吉林 延邊 133608

        對于肝纖維化來說,其是因?yàn)楦螕p傷后而出現(xiàn)的一種病理修復(fù)反應(yīng)。經(jīng)過相關(guān)的臨床實(shí)踐研究結(jié)果與動物實(shí)驗(yàn)均已證明,肝纖維化屬于慢性肝病發(fā)展至肝硬化的必經(jīng)途徑。而肝纖維化自身具有一定的可逆性,通過采取有效的預(yù)防措施,可以進(jìn)一步降低炎癥反應(yīng)的程度,并抑制肝臟內(nèi)過度表達(dá)的膠原合成能力,而且也可以通過提高膠原酶的活性,使已經(jīng)沉積的膠原可以得到消除。所以說,抗肝纖維化,對肝硬化疾病的預(yù)防與慢性肝病的治療具有非常重要的意義,而在臨床中尋找療效更為確切的藥物,也已經(jīng)成為目前臨床研究的重點(diǎn)內(nèi)容之一,為此,本文主要根據(jù)多孔菌科植物桑黃的藥理特點(diǎn),開展抗實(shí)驗(yàn)性肝纖維化相關(guān)研究,重點(diǎn)探究桑黃抗肝纖維化的作用機(jī)理,報告如下。

        1 材料與方法

        1.1材料

        1.1.1實(shí)驗(yàn)動物

        SD大鼠,性別:雌性;體重:160~200g;

        1.1.2實(shí)驗(yàn)試藥

        桑黃、四氧化碳、橄欖油、層粘連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA)、III型前膠原(pclll)、IV型膠原(IV-C)放射免疫分析測定盒。

        1.1.3實(shí)驗(yàn)儀器

        SN-682型放射免疫計(jì)數(shù)器、7150型自動生化分析儀、WH-3微型漩渦混合儀、BH-2型管血顯微鏡和LXJ-II型離心沉淀機(jī)。

        1.2實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1桑黃對大鼠肝纖維化發(fā)生的預(yù)防作用實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1.1配置供試藥液

        取適當(dāng)量的?;?,并加入適當(dāng)劑量水,使用小火進(jìn)行煎煮,完成煎煮后,收集煎煮液,將剩余藥渣使用70%乙醇進(jìn)行浸泡,將乙醇提取液和水煎煮液進(jìn)行混合,回收后將乙醇剔除,獲取干燥、濃縮的固體提取物,將其研磨成為細(xì)粉,過80目篩。在使用前,應(yīng)該利用蒸餾水,配制成為一定濃度的混懸液,留以備用。

        1.2.1.2制作大鼠肝纖維化模型

        使用40%CCl4/橄欖油為大鼠進(jìn)行皮下注射,首次注射劑量為:0.5ml/100g體重,而后每周完成2次注射,每次注射劑量為:0.3ml/100g體重,持續(xù)為大鼠注射6周。在開始造模的第2周,給予大鼠食用低蛋白、高脂肪的復(fù)合飼料,具體為:0.5%的膽固醇、20%豬油和79.5%玉米粉,大鼠使用兩周后,為其飼喂普通飼料。在造模過程中,應(yīng)該將乙醇作為大鼠的唯一飲用品。

        1.2.1.3分組和處理

        將大鼠隨機(jī)分為三組,分別為對照組、模型對照組和桑黃預(yù)防組,每組各有8只大鼠,為正常對照組內(nèi)大鼠飼喂普通飲食,具體為:第1天使用蒸餾水灌胃,劑量:1ml/100g體重,每天1次;對模型對照組大鼠按模型復(fù)制方法進(jìn)行處理,同時使用蒸餾水灌胃,劑量:1ml/100g體重,每天1次;為桑黃預(yù)防組胺模型復(fù)制方法處理,使用桑黃提取液(1ml含有0.5g生藥材)進(jìn)行灌胃,劑量:1ml/100g體重,每天1次,實(shí)驗(yàn)時間為6周[1]。

        1.2.2桑黃對大鼠肝纖維化的治療作用實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.2.1制作大鼠肝纖維化模型

        使用40%CCl4/橄欖油為大鼠進(jìn)行皮下注射,首次注射劑量為:0.5ml/100g體重,而后每周完成2次注射,每次注射劑量為:0.3ml/100g體重,持續(xù)為大鼠注射6周。在開始造模的第2周,給予大鼠食用低蛋白、高脂肪的復(fù)合飼料,具體為:0.5%的膽固醇、20%豬油和79.5%玉米粉,大鼠使用兩周后,為其飼喂普通飼料。在造模過程中,應(yīng)該將乙醇作為大鼠的唯一飲用品。從第7周開始,給予大鼠飼喂普通飲食,并為其維持病因刺激,每周為大鼠注射一次40%CCl4/橄欖油,劑量:0.3ml/100g體重,持續(xù)注射4周。

        1.2.2.2分組和處理

        將大鼠隨機(jī)分為三組,分別為對照組、模型對照組和桑黃預(yù)防組,每組各有8只大鼠,為正常組內(nèi)大鼠經(jīng)皮下注射生理鹽水,并給予其飼喂普通飲食,其他兩組均復(fù)制肝纖維化模型,在治療的第7周開始,對正常對照組和模型對照組內(nèi)大鼠進(jìn)行灌胃蒸餾水,劑量:1ml/100g體重,每天1次;桑黃預(yù)防組則為大鼠灌胃1ml含0.5g的桑黃提取液,劑量為1ml/100g體重,每天1次,治療時間為4周,全部實(shí)驗(yàn)過程為10周[2]。

        1.3觀察指標(biāo)

        使用乙醚對大鼠進(jìn)行麻醉后,將其眼球摘除,并取血液,離心分離血清。取適當(dāng)量血清,而后使用自動生化分析對總蛋白、總膽紅素、球蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、A/G比值等級進(jìn)行檢測,另取部分血清,使用放射免疫試劑盒方法對血清膠原成分HA、PClll、IV-C和LN進(jìn)行檢測.

        2 結(jié) 果

        2.1桑黃對大鼠肝纖維化發(fā)生的預(yù)防作用

        2.1.1大鼠血清酶學(xué)檢查結(jié)果

        模型對照組血清膽紅素、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平明顯高于正常組,血清白蛋白和A/G比值則明顯低于正常組,這也就說明模型組內(nèi)大鼠的肝功能受到明顯損傷。桑黃預(yù)防組內(nèi)大鼠的血清膽紅素和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平接近正常組,同時也提高了血清白蛋白水平,具有糾正A/G的作用,比較有顯著差異(P<0.05)。

        2.1.2血清膠原成分檢測結(jié)果

        模型對照組內(nèi)大鼠血清膠原成分層粘連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA)、III型前膠原(pclll)、IV型膠原(IV-C)含量明顯高于正常組,這也就說明模型對照組內(nèi)大鼠表現(xiàn)出明顯的肝纖維化特征,而桑黃預(yù)防組內(nèi)大鼠的層粘連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA)、III型前膠原(pclll)、IV型膠原(IV-C)含量明顯降低,幾乎接近正常組,比較有顯著差異(P<0.05)

        2.2桑黃對大鼠肝纖維化的治療作用

        2.2.1大鼠血清酶學(xué)檢查結(jié)果

        模型對照組內(nèi)大鼠肝功能損傷明顯,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、球蛋白水平明顯高于對照正常組,A/G比值則低于對照正常組,桑黃治療組內(nèi)大鼠的總膽紅素、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等水平明顯降低,比較有顯著差異(P<0.05)。

        2.2.2血清膠原成分檢測結(jié)果

        模型對照組內(nèi)大鼠血清膠原成分分層粘連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA)、III型前膠原(pclll)、IV型膠原(IV-C)含量顯著高于對照正常組,桑黃治療組內(nèi)大鼠分層粘連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA)、III型前膠原(pclll)、IV型膠原(IV-C)含量含量則接近正常組,三組比較有顯著差異(P<0.05)。

        3 討 論

        經(jīng)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,桑黃對肝纖維化具有非常明顯的預(yù)防效果和治療效果,這也為今后的臨床應(yīng)用提供了必要的數(shù)據(jù)支持。對于人體而言,肝臟屬于人體全身組織含鎂量最為豐富的器官,而且不同的酶在肝小葉不同區(qū)域和肝細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)中的濃度也有所差異,其代謝率和分子量也有明顯的不同,所以在肝臟不同病理狀況下,代謝率和分子量的升降幅度也有明顯的差異。因?yàn)楦卫w維化的形成機(jī)制非常復(fù)雜,而中藥中含有多種活性成分,在此基礎(chǔ)上,就可以將桑黃具有的抗纖維化作用與優(yōu)勢充分的凸顯出來。

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