馬 娟

山東省平度市東閣動物衛(wèi)生與產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督站，山東平度 266700

0 引言

牛結(jié)核病的病原為牛型結(jié)核分枝桿菌，該病在我國被列為二類動物疫病，是一種人畜共患的慢性消耗性疾病。從發(fā)現(xiàn)結(jié)核病的病原至今已有130 多年的歷史，經(jīng)過多年的努力該病得到一定的控制，近年來家畜及人類結(jié)核病陽性率有上升趨勢，仍然是威脅動物與人類健康和生命安全的重要傳染病之一。牛結(jié)核分枝桿菌感染動物機體后潛伏期大約為半個月，較長的可達幾個月。眾所周知，人類結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的，人們往往忽視了牛型結(jié)核分枝桿菌對人類的威脅，人型結(jié)核分枝桿菌、牛型結(jié)核分枝桿菌及禽型結(jié)核分枝桿菌均可感染人及其他動物，是人類目前面臨較為嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問題。

人畜共患病的防控是目前疫病防控的一大挑戰(zhàn)，特別是人畜共患病中的結(jié)核病和布魯氏桿菌病在全國乃至全世界感染率有上升趨勢，特別是在獸醫(yī)、檢疫員、養(yǎng)殖人員、實驗室人員等，均是該病感染的高危人群，這應(yīng)引起所有人的重視。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部對該病的防控高度重視，各省、市已加強對牛布病、結(jié)核病等人畜共患病的防控力度，特別是對乳用牛和種用牛的監(jiān)測，很多地區(qū)均要求對全群乳用和種用牛進行結(jié)核病的監(jiān)測，進一步加強人畜共患病的凈化工作。本文對牛結(jié)核病流行情況進行回顧，并對牛結(jié)核病的臨床癥狀、診斷及防控措施進行總結(jié)。

1 牛結(jié)核病的流行現(xiàn)狀

科學(xué)家（羅伯特·科赫博士）最早在1882年宣布發(fā)現(xiàn)結(jié)核病的致病菌為結(jié)核分枝桿菌，這一發(fā)現(xiàn)尤為重要，為該病的診斷、防控開辟了新的道路。通過多年的努力，結(jié)核病的流行得到一定的控制，但結(jié)核病仍然是威脅動物及人類健康甚至是致命的傳染病。世界衛(wèi)生組織公布，每天有超過4 000 人死于結(jié)核病，并有將近3 萬人感染結(jié)核分枝桿菌。20世紀(jì)80年代全國進行奶牛抽樣檢測，結(jié)核病患病率為5.0%左右。到21世紀(jì)初，部分地區(qū)結(jié)核病患病率高達10.18%，有的養(yǎng)殖場陽性率甚至超過了20.0%[1]，有上升的趨勢。

2 臨床癥狀

牛型結(jié)核分枝桿菌自然感染動物時潛伏期長短不一，短的有數(shù)天，長的可達數(shù)年。家畜中以奶牛最易感，由于不同動物及病原侵入器官不同而臨床癥狀也存在差異，根據(jù)侵入器官不同，病變器官出現(xiàn)大小不等的結(jié)節(jié)，在肺臟、乳房、淋巴以及腸道最為多見。奶牛典型癥狀為產(chǎn)乳量下降、被毛粗糙，消瘦、咳嗽等?；疾∨Ｔ诟腥境跗谕ǔ]有明顯臨床癥狀，有的表現(xiàn)為低熱，病毒侵入肺部通常會導(dǎo)致干咳和呼吸困難，侵入腸道通常導(dǎo)致腹痛、血便，腹瀉和便秘交替出現(xiàn)。中后期出現(xiàn)消瘦、貧血、奶牛產(chǎn)奶下降、呼吸困難、淋巴腫大等，在某一器官或多個器官出現(xiàn)硬結(jié)是最為典型的癥狀。

3 診斷技術(shù)

牛結(jié)核的診斷可以通過病原分離鑒定、ELISA及皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)等方法，各檢測方法均存在優(yōu)缺點。在基層常用免疫學(xué)方法進行奶牛結(jié)核病的診斷，即皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)，皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)診斷法特異性較高、操作簡單、不依賴儀器，是基層診斷奶牛結(jié)核病很實用的臨床技術(shù)。用牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗檢測牛結(jié)核病是臨床使用最多的檢測方法，出生三周后的犢牛即可用本試驗進行牛型結(jié)核分枝桿菌的篩查、檢疫。注射部位通常選擇在牛頸側(cè)中部上1/3，提前備毛，如果犢牛太小也可在肩胛部進行，在選擇注射部位時注意術(shù)部應(yīng)無明顯病變。按說明稀釋好的提純牛型結(jié)核菌素稀釋后應(yīng)當(dāng)天使用完，每只牛皮內(nèi)注射0.1 mL（不區(qū)分牛的大小以及日齡），注射器械及術(shù)部應(yīng)做好消毒，避免產(chǎn)生假陽性。皮下注射應(yīng)出現(xiàn)小皰（如沒有小皰則暗示未注入皮內(nèi)）。皮內(nèi)注射后于72 h觀察注射部位是否有炎性反應(yīng)（紅、腫、熱、痛），并測量皮皺厚度差以判定試驗結(jié)果。個別?？赡艹霈F(xiàn)較晚的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，因此可以于96 h、120 h再分別觀察注射部位。根據(jù)《GB/T18645—2002動物結(jié)核病診斷技術(shù)》標(biāo)準(zhǔn)，牛注射部位有明顯的炎性反應(yīng)，皮厚差大于或等于4 mm則為陽性，表明牛感染了結(jié)核分枝桿菌（排除假陽性）；如果注射部位無炎性反應(yīng)，皮厚差小于2 mm為陰性；處于兩者之間為疑似，應(yīng)于2 個月后進行復(fù)檢，如果仍為疑似經(jīng)2個月再次復(fù)檢，此時仍為疑似則應(yīng)判斷為陽性。游標(biāo)卡尺的操作及讀數(shù)準(zhǔn)確性是判斷檢測結(jié)果的關(guān)鍵，應(yīng)熟練掌握其操作及讀數(shù)方法。皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的使用較早，是一項較成熟的檢測技術(shù)，但存在假陽性造成誤殺的情況。

為提高檢測的準(zhǔn)確性、便利，一些新的檢測方法被開發(fā)用于牛結(jié)核病的檢測，例如IFN-γ體外釋放法，膠體金免疫層析法，葉俊、布日額等人將結(jié)核分支桿菌MPB70和MPB83兩種分泌蛋白基因通過分子生物學(xué)技術(shù)進行融合表達并純化，建立結(jié)核分枝桿菌膠體金免疫層析技術(shù)[2]，這為臨床快速檢測技術(shù)的研發(fā)提供了有效的參考。

4 結(jié)核病的防控

牛結(jié)核的防控應(yīng)重點監(jiān)測乳用牛和種用牛，對監(jiān)測確診為陽性家畜應(yīng)按照相關(guān)技術(shù)規(guī)范進行撲殺和無害化處理。應(yīng)對牛群實施清群和凈化措施；全場進行徹底的清洗消毒，病死或淘汰的尸體按要求進行無害化處理。對產(chǎn)奶牛、種用牛進行全覆蓋檢測，對肉牛、耕牛及其家畜進行抽檢[3]。

做好人員防控工作，必須嚴(yán)格按照生物安全防護技術(shù)規(guī)程開展采樣和實驗檢測工作，防止人員在工作中感染、病原擴散等情況[4]。高危工作人員在開展工作時可以使用藥物進行預(yù)防，鏈霉素、卡那霉素的抗菌譜較青霉素廣，主要對結(jié)核桿菌、多種革蘭氏陰性桿菌（如大腸桿菌、沙門氏菌、布魯氏桿菌、巴氏桿菌等）有較強的抗菌作用[5]。1862年法國生物學(xué)家巴斯德發(fā)明了巴氏滅菌法，該方法對于切斷該病的傳播起了重要作用，但巴氏滅菌法并不能保證百分之百對結(jié)核分枝桿菌進行滅活，也存在風(fēng)險[6]。

對于環(huán)境消毒可以使用甲醛、過氧乙酸。甲醛又稱蟻醛，為無色氣體，40%甲醛溶液即福爾馬林，能與水或乙醇任意混合，不僅能殺死細(xì)菌的繁殖型，也能殺死芽孢（如炭疽芽孢），以及抵抗力強的結(jié)核桿菌[7]。很多養(yǎng)殖場喜歡使用生石灰作為消毒藥，生石灰主要成分是氧化鈣（化學(xué)式為CaO），是一種價廉易得的消毒藥，具強堿性，不溶于水，吸濕性很強，對繁殖型細(xì)菌有良好的消毒作用，但易從空氣中吸收二氧化碳形成碳酸鈣而失效，對芽孢和結(jié)核桿菌無效[8]。