伊力哈木·托合迪,蘇 敏,努爾再麗,劉小琴,馬海霞
和田師范??茖W(xué)校理學(xué)院,新疆和田市 848000
乳酸菌具有多種益生功能,不僅能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫系統(tǒng),維持腸道菌群平衡;還具有一定的抗氧能力,能夠清除腸道內(nèi)的活性氧分子,使機(jī)體保持在相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)[1,2]。而植物源益生菌發(fā)酵產(chǎn)品正在進(jìn)入主流消費(fèi)領(lǐng)域,越來(lái)越多針對(duì)植物蛋白發(fā)酵的菌種被大規(guī)模開(kāi)發(fā)并產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用[3]。對(duì)葡萄樹(shù)傷流液的研究發(fā)現(xiàn),其對(duì)植物乳酸菌具有很強(qiáng)的適應(yīng)性[4],該適宜性源于葡萄樹(shù)傷流液特殊的抗氧性和特有的成分[5]。但葡萄樹(shù)傷流液作為從葡萄樹(shù)中流溢出的液體,具有季節(jié)性,易污染,收集難,抗氧劑含量低[6,7]等問(wèn)題,限制了其應(yīng)用開(kāi)發(fā)研究。本文進(jìn)行了資源更豐富,更容易收集,活性物質(zhì)含量更高的葡萄樹(shù)枝的水浸液對(duì)乳酸菌的適宜性研究。將葡萄樹(shù)枝切碎進(jìn)行浸泡,向浸泡液加入乳酸菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制備乳酸菌培養(yǎng)基[8],檢測(cè)其吸光度和酸性的變化,為穩(wěn)定培養(yǎng)乳酸菌提供參考。
752紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),pHS-3C型pH計(jì),玻璃儀器氣流烘干器,HH-6S數(shù)是恒溫水浴鍋,舜守恒平儀器,KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器,精密增力電動(dòng)攪拌器。
表1 葡萄樹(shù)枝取樣用量及其用量比例
表2 葡萄樹(shù)枝水浸泡液在不同時(shí)間的pH 值變化
表3 葡萄樹(shù)枝浸泡液在不同時(shí)間的吸光度(A。)變化
剪下生長(zhǎng)5 年的葡萄樹(shù)枝,去皮干凈,不留外皮,用蒸餾水洗凈后將其切成小塊。浸泡在自來(lái)水或蒸餾水中,制備葡萄樹(shù)枝水浸液樣品(表1)。
首先葡萄樹(shù)枝在蒸餾水(自來(lái)水)中浸泡72 h,測(cè)定其pH值和波長(zhǎng)在610 nm時(shí)的吸光度;其次用精密增力電動(dòng)攪拌器進(jìn)行攪拌,將其放置一段時(shí)間后,測(cè)定pH值與吸光度;浸泡之后第9天,加熱30 min進(jìn)行殺菌,再進(jìn)行過(guò)濾,向過(guò)濾后的水浸液樣品1、2、3中,加入該水浸液質(zhì)量為5%的乳酸菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),制備乳酸菌培養(yǎng)基1、2、3;在不同的時(shí)間段里,用pH酸度計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基1、2、3和樣品4的酸度變化,用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基1、2、3、4在610 nm時(shí)的吸光度變化。
通過(guò)各培養(yǎng)基的吸光度值變化(表2)可知,隨著時(shí)間的推移,乳酸菌培養(yǎng)基的吸光度逐漸增大,說(shuō)明乳酸菌的菌數(shù)增加,在第30天時(shí),其吸光度達(dá)到最大值,乳酸菌數(shù)達(dá)到最高值1.46×106CFU;之后隨時(shí)間的增長(zhǎng),吸光度緩慢遞減,說(shuō)明乳酸菌開(kāi)始凋亡,但其變化速度非常緩慢,說(shuō)明葡萄樹(shù)枝水浸液乳酸菌培養(yǎng)基穩(wěn)定性高;通過(guò)各培養(yǎng)基的pH值變化(表2)可知,乳酸菌培養(yǎng)基的pH值在一直在不斷的降低,顯示乳酸菌已成為了優(yōu)勢(shì)菌,不斷生產(chǎn)乳酸,即培養(yǎng)液一直保持均勻穩(wěn)定的狀態(tài)。
葡萄枝水浸液對(duì)乳酸菌具有很強(qiáng)的適宜性,在葡萄枝水浸液中加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的第1、2、3組,吸光度逐漸增加,pH值逐漸減小,而未加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的葡萄樹(shù)枝水浸液第4組的吸光度變化和pH值變化很不穩(wěn)定,說(shuō)明,一是變化和水質(zhì)沒(méi)有直接關(guān)系;二是葡萄樹(shù)枝水浸液僅缺乏碳源性營(yíng)養(yǎng)物,只要補(bǔ)充一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)就可以成為乳酸菌培養(yǎng)基,使其中的乳酸菌成為優(yōu)勢(shì)菌,故葡萄樹(shù)枝水浸液對(duì)乳酸菌有很強(qiáng)的適宜性,具有一定的開(kāi)發(fā)應(yīng)用價(jià)值。