金新莉，陳明軍，李曉暉，方建華，張伯偉，李建斌

（河南省紅十字血液中心，河南鄭州450012）

近年來，我國的HIV流行特點變化很大，從高危人群向普通人群過渡的渠道和趨勢也多樣化,對我國血液安全造成新的威脅。為了提高血液中的HIV檢出率、縮短HIV“窗口期”感染，國家衛(wèi)健委在《血站技術(shù)操作規(guī)程（2019版）》明確規(guī)定，采供血機構(gòu)對于HIV病毒感染標志物的檢測應(yīng)采用核酸擴增檢測技術(shù)和血清學檢測技術(shù)2種方法進行檢測[1]，以降低輸血傳播HIV的風險。為了系統(tǒng)的研究鄭州地區(qū)獻血者HIV感染的流行情況，筆者通過對本血液中心2016-2017年篩查反應(yīng)性標本的確證結(jié)果人口特征進行分析,包括性別、年齡、民族、婚姻狀況、教育程度、職業(yè)、獻血次數(shù)等方面，期望為獻血招募提供數(shù)據(jù)依據(jù)，降低經(jīng)血傳播HIV的風險，報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 選取2016-2017兩年本中心采集的424 254份無償獻血者標本。獻血者均符合國家《獻血者健康檢查要求》中的相關(guān)要求。采集每人份血液同時留取ELISA和NAT樣管，其中NAT標本在采樣后<4h于2~8℃的低溫離心機以1760g離心20min，離心后2~8℃臨時保存，<24h上機進行檢測。

1.2 主要試劑 抗-HIV1/2檢測試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)有限公司，批號：I20160102、I20160818、I20170617；伯樂生命醫(yī)學產(chǎn)品（上海）有限公司，批號：5J0339、6D0358、7G040）。NAT試 劑 廠 家：Cobas TaqScreen MPX 2.0 text美國羅氏診斷公司，批號：164143、174694、178707）；乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒人類免疫缺陷病毒（1+2型）核酸檢測試劑盒（蘇州華益美生物科技有限公司，批號：MA20161009、MA20161110-1、MA20170101）；乙型肝炎丙型肝炎人類免疫缺陷病毒（I型）核酸檢測試劑（上海科華生物工程股份有限公司，批號：20141113、20141214、20150204）。配套耗材均由試劑公司提供，均在有效期內(nèi)使用。

1.3 主要儀器 ELISA檢測使用Hamilton Star全自動加樣儀（瑞士HAMILTON公司）和FAME酶免分析儀（瑞士HAMILTON公司）。核酸檢測使用：Hamilton Star全自動混樣儀（瑞士HAMILTON公司），Cobas AmpLiPrep核酸提取儀和Cobas Taq-Man Analyzer核酸擴增檢測儀通過混樣和數(shù)據(jù)管理服務(wù)器（PDM）連接組成羅氏診斷Cobas's 201血液核酸血篩平臺（簡稱CAP/CTM），低溫大容量離心機KUBOTA 8730（日本KUBOTA公司）。

1.4 檢測方法 對獻血者標本采用2個不同廠家的試劑盒進行平行檢測,嚴格按試劑盒說明書進行操作和判定結(jié)果。對于陰性和只有單ELISA試劑陽性的標本繼續(xù)進行NAT。采用NAT試劑進行HBV/HCV/HIV核酸定性檢測，實驗操作嚴格按儀器和試劑盒說明書進行。若單個Pool結(jié)果為陽性的再對其進行拆分。結(jié)果判定：混樣陽性而拆分陰性的標本則判為NAT陰性,混樣陽性拆分也陽性的標本則判為NAT陽性。ELISA反應(yīng)性和NAT反應(yīng)性標本進一步做蛋白免疫印跡（WB）和實時熒光定量PCR。

1.5 質(zhì)量控制 標本和試劑的運輸和保存完全按照《血站技術(shù)操作規(guī)程（2019版）》中相關(guān)要求進行操作。檢測過程由試劑盒的陰、陽性質(zhì)控品和室內(nèi)質(zhì)控品對實驗進行有效控制。本實驗室定期參加國家衛(wèi)健委臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)量評價活動和CITIC血液篩查室間質(zhì)評項目。

1.6 統(tǒng)計方法 計數(shù)資料采用卡方檢驗，應(yīng)用SPSS19.0 軟件進行統(tǒng)計學分析，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 無償獻血者HIV初篩及確認陽性結(jié)果 2016年檢測210 373份標本,篩查呈反應(yīng)性287份標本,送確證實驗室經(jīng)確證陽性59份,確證陽性率為2.80/萬；2017年檢測213 881份標本，篩查呈反應(yīng)性197份標本,送確證實驗室經(jīng)確證陽性38份，確證陽性率為1.78/萬；2016年和2017年相比較,HIV初篩反應(yīng)性、確認陽性不同，其差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）,見表1。

表1 2016-2017年獻血者HIV檢測情況（1/萬）

2.2 HIV確證陽性獻血者的人口特征分析 對97例確證HIV陽性的獻血者的資料進行分析，性別、年齡及獻血次數(shù)差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），民族、婚姻、學歷、職業(yè)差異無統(tǒng)計學意義，見表2。

3 討論

從表1結(jié)果可以看出，2016-2017年鄭州地區(qū)無償獻血人群中HIV初篩ELISA呈反應(yīng)性484份標本,初篩反應(yīng)性率為11.41/萬,經(jīng)確證陽性97份，確認陽性的比率為20.04%（97/484）,明顯高于合肥、鹽城地區(qū)[2,3]的報道，兩年的感染率為2.29/萬，與本地區(qū)[4]之前報道的相比有所上升，但明顯低于烏魯木齊、成都地區(qū)的感染率[5,6]，和宋文倩[7]等報道的全國獻血人群中HIV感染的平均水平相一致，表明鄭州地區(qū)的無償獻血人群抗-HIV感染率在全國范圍內(nèi)處于中等水平,2016-2017年HIV感染率雖呈小幅下降趨勢,但是感染HIV的風險仍然很高,這對本地區(qū)的血液安全工作無疑是個巨大的考驗。

表2 2016-2017年HIV陽性人群分布情況（1/萬）

從表2結(jié)果可以看出，2016-2017年鄭州地區(qū)無償獻血人群HIV確認陽性中，男性89人，女性8人,男性明顯多于女性,這其中MSM人群占了一定比例；從年齡分布來看,＜35歲的有70人,占72.16%,HIV的傳播在本地區(qū)呈現(xiàn)低齡化趨勢；從職業(yè)特點來看，,分布較為分散，但確認結(jié)果中學生有27人，占27.84%，可能與他們對HIV知識缺乏了解有關(guān),其中有部分學生不知道自己感染HIV又參加獻血，增加了經(jīng)血感染HIV的風險；從獻血次數(shù)來看，首次獻血有69人，占71.13%，顯著高于重復(fù)獻血者。結(jié)果顯示，HIV高危人群主要集中在首次獻血的35歲以下男性，2016年以學生居多，2017年顯著下降,這與我中心加大對在校大學生無償獻血知識的宣傳教育是密不可分的。

近年來,我國采供血系統(tǒng)采取積極的態(tài)度和先進的方法來提高血液中的HIV檢出率、縮短HIV窗口期感染,尤其是國家衛(wèi)健委將血液篩查的核酸檢測工作普及到了各地血站,但是多種因素影響使得獻血人群中HIV感染人數(shù)仍然居高不下：⑴檢測試劑的靈敏度有限，⑵存在檢測的“窗口期”，采用核酸檢測只能把HIV窗口期縮短至11 d；⑶以體檢為目的而獻血的人群增加,有部分獻血者是經(jīng)男男性傳播途徑感染HIV的,他們獻血的目的就是進行HIV檢測確認是否感染HIV,所以此類人員的獻血行為對血液安全造成了巨大的威脅。如何降低HIV輸血殘余風險,探索更加合理的檢測模式和篩查策略,引進更為先進的檢測技術(shù)是我們血站系統(tǒng)今后需要研究的重要課題之一。

隨著我國艾滋病感染人群多樣化,流行形式復(fù)雜化，HIV感染出現(xiàn)由高危人群轉(zhuǎn)向普通人的流行[8]，趨勢日益嚴重[9]，特別是在采血量大的情況下，血液安全問題迫在眉睫，在一定程度上增加了對高危行為獻血人員的鑒別難度,應(yīng)加強對獻血人群的健康教育,提高咨詢技巧及甄別高危人群的能力[10]，不僅需要體檢醫(yī)生對獻血者在獻血前進行更加仔細的體檢征詢工作,重點加強對青壯年男性獻血者的征詢力度，對他們進行宣傳教育，告訴其獻血風險，提高他們對HIV的防范排查意識，最大限度排除可能存在高危風險的獻血者。另外，需要持續(xù)加強固定獻血者隊伍的建設(shè),從低危人群中招募獻血者,完善建立一支固定、健康無償獻血者隊伍，逐步擴大以固定獻血者為基礎(chǔ),以團體獻血者為保障的招募模式,同時還需要實驗室采用高靈敏度的檢測試劑，縮短檢測“窗口期”以提高檢出率，確保血液安全。