鄢清元 熊巍 楊文平

【摘要】 目的：探討自體DC-CIK免疫療法治療非小細(xì)胞肺癌患者的效果及對(duì)患者肺功能的影響。方法：選取2019年12月-2020年12月于本院治療的非小細(xì)胞肺癌患者74例。隨機(jī)分為對(duì)照組和研究組，每組37例。對(duì)照組應(yīng)用NP化療，研究組在此基礎(chǔ)上應(yīng)用自體DC-CIK免疫療法。比較兩組免疫功能、肺功能和凝血功能情況。結(jié)果：治療后，研究組CD4+、CD3+、NK均高于對(duì)照組，CD8+低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后，兩組的FEV1/FVC比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，研究組FVC、FEV1均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后，研究組PLT、PT、FIB均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：非小細(xì)胞肺癌患者應(yīng)用自體DC-CIK免疫療法治療效果較好，可以有效提高患者的機(jī)體免疫力，改善凝血功能和肺功能，有利于疾病的控制，從而提高治療效果。

【關(guān)鍵詞】 非小細(xì)胞肺癌 自體DC-CIK免疫療法 肺功能

The Effect of Autologous DC-CIK Immunotherapy on Patients with Non-small Cell Lung Cancer and Its Influence on Lung Function/YAN Qingyuan， XIONG Wei， YANG Wenping. //Medical Innovation of China， 2021， 18（16）： 0-082

[Abstract] Objective： To explore the effect of autologous DC-CIK immunotherapy in the treatment of patients with non-small cell lung cancer and its influence on the lung function of patients. Method： Select 74 patients with non-small cell lung cancer who were treated in our hospital from December 2019 to December 2020. They were randomly divided into control group and study group， with 37 cases in each group. The control group was treated with NP chemotherapy， and the study group was treated with autologous DC-CIK immunotherapy on this basis. The immune function， lung function and blood coagulation function of the two groups were compared. Result： After treatment， the CD4+， CD3+ and NK of the study group were higher than those of the control group， and CD8+ was lower than the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. After treatment， there was no significant difference in FEV1/FVC between the two groups （P>0.05）. After treatment， FVC and FEV1 in the study group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. After treatment， the PLT， PT and FIB of the study group were lower than those of the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The effect of autologous DC-CIK immunotherapy for patients with non-small cell lung cancer is better， which can effectively improve the patient’s immunity， improve coagulation function and lung function， and help control the disease， thereby improving the therapeutic effect.

[Key words] Non-small cell lung cancer Autologous DC-CIK immunotherapy Lung function

First-author’s address： Fengcheng People’s Hospital， Fengcheng 331100， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.16.019

臨床中常見的一種惡性腫瘤就是肺癌，其中發(fā)病率占比最高的就是非小細(xì)胞肺癌（NSCLC），此類患者疾病癥狀不明顯，容易忽視，因此確診時(shí)通常已經(jīng)處于中晚期，主要的治療方法即放化療，但在延長生存期方面效果不佳[1]。腫瘤的治療在臨床中的重視程度越來越高，如今治療的方法較多，而免疫治療成為腫瘤治療的首選方式，效果較好[2]。樹突狀細(xì)胞（DC）是機(jī)體中主要的且功能最強(qiáng)大的一種抗原遞呈細(xì)胞，可以誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞反應(yīng)，與此同時(shí)對(duì)β細(xì)胞的增殖有抑制作用，將免疫應(yīng)答活化;而細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（CIK）是高效且新型的免疫效應(yīng)細(xì)胞，有廣譜殺瘤活性，可以有效改善機(jī)體的免疫功能，具有較強(qiáng)的腫瘤殺傷力[3]。本文主要探討NSCLC患者應(yīng)用DC-CIK免疫療法治療的效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年12月-2020年12月于本院治療的非小細(xì)胞肺癌患者74例。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：確診為NSCLC者[4];依從性好者;體力狀況評(píng)分（KPS）≥60分者;身體其他指標(biāo)處于正常范圍內(nèi)的患者。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：肝腎功能異常者;合并其他惡性腫瘤者;有免疫疾病史者;有血液系統(tǒng)疾病者;有精神病史者;臨床資料不完整者;有嚴(yán)重感染者;有放、化療史或手術(shù)史者;身體重要器官存在嚴(yán)重疾患者。隨機(jī)分為對(duì)照組和研究組，每組37例?；颊呔炗喼橥鈺狙芯拷?jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 對(duì)照組應(yīng)用NP化療治療，第1天和第8天時(shí)為患者靜脈滴注奈達(dá)鉑（生產(chǎn)廠家：吉林恒金藥業(yè)股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H20051481，規(guī)格：50 mg）100 mg/m2和注射用酒石酸長春瑞濱（生產(chǎn)廠家：春雷允上藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H20041927，規(guī)格：10 mg）25 mg/m2，1個(gè)周期為21 d，共治療2個(gè)周期。研究組在此基礎(chǔ)上應(yīng)用自體DC-CIK免疫療法，首先制備DC細(xì)胞，采集單個(gè)核細(xì)胞≥1 109個(gè)，通過淋巴分離液分離后對(duì)PBMC進(jìn)行收集，加入BPMI-1640培養(yǎng)液（內(nèi)含10%FBS），對(duì)細(xì)胞濃度進(jìn)行調(diào)整，時(shí)間為120 min，貼壁細(xì)胞中加入IL-4等半定量的細(xì)胞因子和腫瘤抗原進(jìn)行DC培養(yǎng)，每3天進(jìn)行1次換液，在第6天時(shí)將100 ng/mL的CD40L和500 U/mL的TNF-α加入其中進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和表型分析，在第7天的時(shí)候進(jìn)行收集和回輸。制備CIK細(xì)胞，通過懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，加入100 ng/mL的CD3+單抗以及100 U/mL的IL-1細(xì)胞因子，1 d后再次加入500 U/mL的IL-2和21 000 U/mL的IFN-γ繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，每3天進(jìn)行1次換液，在第7天的時(shí)候送檢抽樣，第14天的時(shí)候收集和回輸。共治療2個(gè)周期。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) （1）比較兩組治療前后的免疫功能指標(biāo)變化情況，其中包含T淋巴細(xì)胞群CD8+，CD4+和CD3+以及自然殺傷（NK）細(xì)胞，分別在治療前后抽取患者的外周血3 mL，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。（2）比較兩組治療前后的肺功能指標(biāo)變化情況，其中包含F(xiàn)EV1/FVC、FVC、FEV1。（3）比較兩組治療前后的凝血功能指標(biāo)變化情況，其中包含血小板（PLT）、血漿凝血酶原時(shí)間（PT）、纖維蛋白原（FIB）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對(duì)照組37例，病理類型：6例大細(xì)胞癌，12例鱗癌，19例腺癌;臨床分期：11例ⅢA期，15例ⅢB期，11例Ⅳ期;年齡41～77歲，平均（56.3±2.1）歲;女14例，男23例。研究組37例，病理類型：6例大細(xì)胞癌，11例鱗癌，20例腺癌;臨床分期：12例ⅢA期，16例ⅢB期，9例Ⅳ期;年齡41～77歲，平均（55.9±2.4）歲;女17例，男20例。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組治療前后免疫功能指標(biāo)變化情況比

較 治療后，研究組CD4+、CD3+、NK均高于對(duì)照組，CD8+低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.3 兩組治療前后肺功能指標(biāo)變化情況比較 治療后，兩組的FEV1/FVC比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，研究組FVC、FEV1均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.4 兩組治療前后凝血功能指標(biāo)變化情況比較 治療前，兩組的PLT、PT、FIB比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，研究組PLT、PT、FIB均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

3 討論

肺癌是常見的一種惡性腫瘤，主要癥狀為呼吸困難，干咳，低熱以及腹痛，嚴(yán)重時(shí)會(huì)咳出血絲，引發(fā)阻塞性肺炎等并發(fā)癥，威脅患者的生命健康，此病進(jìn)展快，且預(yù)后效果差[5]。其中最常見的一種肺癌類型就是非小細(xì)胞肺癌（NSCLC），針對(duì)晚期腫瘤，常用的治療方法即放化療和手術(shù)，雖然可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，但無法徹底清除，容易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移[6]。近幾年，人們的生活方式和作息習(xí)慣發(fā)展改變，外加大氣污染嚴(yán)重，導(dǎo)致此病的發(fā)病率不斷提高，降低患者的生存質(zhì)量[7]。相關(guān)研究指出，針對(duì)晚期NSCLC患者應(yīng)用常規(guī)治療方法效果不佳，無法有效阻止疾病的進(jìn)展[8]。隨著基因序列和分子分型研究的不斷深入，較多靶向藥物應(yīng)用于肺癌患者的臨床治療中，可以有效提高患者的生存周期，但針對(duì)NSCLC患者效果不佳[9]。腫瘤治療的方法之一就是細(xì)胞免疫治療，在臨床中，相對(duì)于其他治療方法，其已被證實(shí)可以提高患者的免疫功能，對(duì)腫瘤細(xì)胞有明顯的殺傷作用，可以提高患者的生活質(zhì)量，延長生存時(shí)間，且不良反應(yīng)少，安全性高，能降低放化療所產(chǎn)生的毒副作用[10]。

機(jī)體免疫力降低是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素，機(jī)體無法及時(shí)有效地將突變、惡變的腫瘤細(xì)胞清除，DC是機(jī)體中重要的一種抗原提呈細(xì)胞，能有效識(shí)別腫瘤抗原，其含有豐富的共刺激分子（B7-2）和細(xì)胞黏附分子（TCAM-1），可以刺激T細(xì)胞，促使機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤反應(yīng)[11]。另外其還可以將識(shí)別的信號(hào)傳送給CIK細(xì)胞，從而保證CIK能及時(shí)將腫瘤細(xì)胞殺傷[12]。CIK有較強(qiáng)的殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，其活化后可以產(chǎn)生較多細(xì)胞因子，活化、增殖T細(xì)胞，有利于腫瘤細(xì)胞的殺滅[13]。DC、CIK是組成細(xì)胞免疫治療的重要部分，兩者聯(lián)合具有高效的免疫反應(yīng)，目前醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷完善，DC-CIK免疫療法在臨床中廣泛應(yīng)用，相關(guān)研究指出，共同培養(yǎng)DC和CIK，可以提高其免疫和增殖功能[14]。DC-CIK免疫療法可以單獨(dú)應(yīng)用，也可以輔助用于放化療或手術(shù)治療后，可以提高生存質(zhì)量和療效，有研究表明，化療后給予DC-CIK免疫療法可以對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖進(jìn)行抑制，甚至可以將腫瘤細(xì)胞完全殺滅，且應(yīng)用后不會(huì)危害機(jī)體自身的免疫功能[15]。其成為首選治療腫瘤的有效方法之一，在消除腫瘤，預(yù)防復(fù)發(fā)，改善患者生存質(zhì)量方面提供了新途徑[16]。

目前臨床中認(rèn)為DC-CIK免疫療法的抗腫瘤機(jī)制主要和以下幾點(diǎn)有關(guān)：（1）可以增加細(xì)胞因子的釋放量，共培養(yǎng)時(shí)會(huì)增加DC表面的CD86、B7-1、HLA-DR、B7-2等，同時(shí)高分泌IFN-γ、IL-12以及IL-2等細(xì)胞因子，從而促進(jìn)CIK的增殖;另外，DC可以增加CIK對(duì)IFN的分泌量，同時(shí)延長分泌IFN的時(shí)間[17]。（2）可以強(qiáng)化細(xì)胞毒性，共培養(yǎng)時(shí)DC會(huì)高分泌IL-12因子，從而增加CD56+的分泌，提高CIK的抗腫瘤活性和細(xì)胞毒作用，另外CIK細(xì)胞分泌的CD40L會(huì)結(jié)合DC分泌的CD40，從而直接對(duì)腫瘤的增殖進(jìn)行抑制[18]。（3）提高了細(xì)胞增殖的活性，較多研究表明共培養(yǎng)后的CIK相較于同源細(xì)胞增殖活性更強(qiáng)，提高了其抗腫瘤的活性[19]。較多研究指出，應(yīng)用DC-CIK免疫療法治療NSCLC患者，可以有效改善患者的一般狀況和免疫功能，副作用小，安全性高，抗腫瘤效果好，聯(lián)合化療可以延長患者的生存期，改善其生活質(zhì)量[20]。

CD8+、CD4+、NK是重要的預(yù)后評(píng)估觀察療效和免疫狀態(tài)的指標(biāo)，其中CD8+的增多是導(dǎo)致免疫降低的主要原因[21]。本次研究，對(duì)照組應(yīng)用NP化療，研究組在此基礎(chǔ)上應(yīng)用自體DC-CIK免疫療法治療，結(jié)果顯示：治療后，研究組CD4+、CD3+、NK均高于對(duì)照組，CD8+低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明其具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用，有利于免疫功能和生活質(zhì)量的提高。分析原因在于單獨(dú)應(yīng)用NP雖然可以殺傷腫瘤細(xì)胞，但也會(huì)對(duì)其他的正常細(xì)胞造成損傷，從而降低機(jī)體的免疫力，增加并發(fā)癥發(fā)生的概率[22]。而聯(lián)合應(yīng)用自體DC-CIK免疫療法，可以改善免疫功能，提高抗腫瘤的能力，從而提高患者的生存質(zhì)量[23]。腫瘤的侵襲，生長和遷移均與凝血纖溶的紊亂息息相關(guān)，而相關(guān)研究指出，應(yīng)用DC-CIK免疫療法可以有效抑制腫瘤的侵襲，改善機(jī)體的凝血功能[24]。本研究結(jié)果顯示：治療后，兩組的FEV1/FVC比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，研究組FVC、FEV1均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后，研究組PLT、PT、FIB均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明DC-CIK可以有效改善患者的肺功能和凝血相關(guān)指標(biāo)，有利于疾病的控制，從而提高治療效果，延長生存周期，改善生存質(zhì)量。

綜上所述，非小細(xì)胞肺癌患者應(yīng)用自體DC-CIK免疫療法治療效果較好，可以有效提高患者的機(jī)體免疫力，改善凝血功能和肺功能，有利于疾病的控制，值得推廣和應(yīng)用。

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（收稿日期：2021-03-17） （本文編輯：姬思雨）