解 鈺1，李嶸立1，宋 軍1，高宏娟

(1.山西省食品藥品檢驗所，山西 太原 030031；2.大連理工大學(xué)，遼寧 大連 116024)

米格來寧片又名“安比咖片”，是由安替比林、咖啡因、枸櫞酸等組成的復(fù)方制劑，為解熱鎮(zhèn)痛藥。目前國內(nèi)米格來寧片共34家企業(yè)獲得批準(zhǔn)文號，有1種規(guī)格：每片含安替比林270 mg，咖啡因27 mg，枸櫞酸3 mg[1]。

對于固體制劑而言，溶出度測定能反映主藥的晶型、粒度、處方組成、輔料品種和性質(zhì)、生產(chǎn)工藝的差異等特征，既用于藥品一般質(zhì)量控制，也可用于評價各種制劑生物利用度的體外方法，已成為評價藥物制劑質(zhì)量的內(nèi)在指標(biāo)[2-7]。高效液相色譜法具有測定簡便、快速、精確的特點，已被廣泛使用。米格來寧片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》1963年版，標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定溶出度檢查。本試驗建立高效液相色譜法測定米格來寧片的溶出度，并繪制溶出曲線。

1 資料與方法

1.1 試劑與儀器

咖啡因?qū)φ掌?批號171215-201512，含量99.9%)與安替比林對照品(批號100506-201602，含量100%)購自中國藥品生物制品檢定所；四氫呋喃、乙腈購自北京迪科馬科技有限公司，水為實驗室自制超純水。高效液相色譜儀(型號：Agilent 1200)購自美國安捷倫公司；高效液相色譜儀(型號：Ultimate 3000)購自美國戴安公司；全自動溶出儀(型號：Agilent 708+850DS)購自美國安捷倫公司。

共收集米格來寧片103批次，涉及6家生產(chǎn)企業(yè)。

1.2 溶液的制備

1.2.1 對照品溶液 取安替比林和咖啡因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加水溶解并稀釋成含安替比林300 μg/mL、咖啡因30 μg/mL的溶液，作為對照品溶液。

1.2.2 供試品溶液 取待測樣品，照溶出度與釋放度測定法(《中國藥典》2015年版四部通則0931第二法)，以0.1 mol/L鹽酸溶液900 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，依法操作，經(jīng)30 min時，取溶液濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

1.2.3 空白溶液 按處方量稱取空白輔料淀粉、硬脂酸鎂、枸櫞酸、吐溫80等，置100 mL量瓶中，加水振搖溶解并稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

1.2.4 對照品儲備液 取安替比林和咖啡因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加溶出介質(zhì)溶解并稀釋成含安替比林1.2 mg/mL、咖啡因0.12 mg/mL的溶液，作為對照品儲備液。

1.3 方法學(xué)考察

1.3.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 采用Agilent-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)；以醋酸鈉緩沖液(稱取0.82 g無水醋酸鈉，加水溶解并稀釋至1 000 mL，加15 mL四氫呋喃和2 mL三乙胺，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至6.0)-乙腈(85∶15)；流速為1.0 mL/min；檢測波長為275 nm；進樣量10 μL。按安替比林計塔板數(shù)不低于3 000，分離度應(yīng)符合規(guī)定。

1.3.2 溶出方法的建立

1.3.2.1 溶出方法的選擇 米格來寧片屬于高溶解高滲透類藥物(安替比林與咖啡因均屬于高溶解高滲透類藥物)(屬BCS第Ⅰ類)，試驗選用槳法。

1.3.2.2 轉(zhuǎn)速的選擇 取待測樣品，分別以50 r/min、75 r/min進行轉(zhuǎn)速試驗，依法操作，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定，結(jié)果表明樣品在75 r/min下溶出較快，且在8 min時已達峰值。通常認(rèn)為50 r/min與中老年人胃腸道蠕動強度基本一致，而且溶出度試驗應(yīng)采用較為緩和的轉(zhuǎn)速，使溶出方法具有更好的區(qū)分能力，因此轉(zhuǎn)速選擇50 r/min。

1.3.2.3 溶出介質(zhì)的選擇 取待測樣品，以pH1.0鹽酸溶液、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水各900 mL作為溶出介質(zhì)，依法操作，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定，結(jié)果表明四者之間無顯著差異。結(jié)合人體胃部環(huán)境與溶出行為，選擇pH1.0鹽酸溶液(0.1 mol/L)作為溶出介質(zhì)。

1.3.2.4 取樣時間點的確定 分別于溶出開始后的第3，8，15，30，45，60 min時，各取樣10 mL(同時補充同體積同溫度溶出介質(zhì))，用0.45 μm微孔濾膜過濾，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定，計算累積釋放率。當(dāng)連續(xù)兩點溶出率均達85%，且差值在5%以內(nèi)，可作為采樣截點，故選擇取樣時間點為30 min。

1.3.3 方法學(xué)考察

1.3.3.1 專屬性試驗 取“1.2.3”項下的空白溶液，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定。結(jié)果顯示空白溶液在與安替比林與咖啡因相對保留時間處無色譜峰出現(xiàn)，不干擾主峰的測定，表明該方法專屬性良好，見圖1。

圖1 專屬性試驗(吉林省銀河制藥有限公司，批號：171105)

1.3.3.2 線性關(guān)系考察 取“1.2.4”項下的對照品儲備液1，3，3.5，5，6.5，7，10 mL，分別置25 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得系列濃度的對照品溶液，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定。以濃度(X)為橫坐標(biāo)，以峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，進行線性回歸，得安替比林回歸方程Y=0.212 1X+0.237 6(r=0.999 9，n=7)，咖啡因回歸方程Y=0.336 7X+0.028 9(r=0.999 9，n=7)。結(jié)果表明，安替比林在141.72～307.06 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系；咖啡因在16.72～31.04 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

1.3.3.3 準(zhǔn)確度試驗 按處方比例分別取相當(dāng)于樣品標(biāo)示量60%、80%、100%的安替比林和咖啡因原料適量，精密稱定，分別置500 mL容量瓶中，加入處方比例空白輔料，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定，見表1，表2。

表1 安替比林準(zhǔn)確度試驗

表2 咖啡因準(zhǔn)確度試驗

1.3.3.4 精密度試驗 取“1.2.1”項下的對照品溶液，按照“1.3.1”項下的色譜條件測定，重復(fù)進樣6次，安替比林的RSD為0.08%，咖啡因的RSD為0.17%，表明精密度良好。

2 結(jié)果

2.1 參比制劑的選擇 在6家企業(yè)中選擇綜合質(zhì)量較高的樣品作為參比制劑。溶出曲線考察表明，A企業(yè)在四種介質(zhì)中的溶出曲線相似程度最高，批間差異小，故選擇該企業(yè)樣品作為參比制劑。

2.2 樣品測定 采用f2因子分析其余5家生產(chǎn)企業(yè)與參比制劑的差異，其中B、C、D的f2因子大于50.0，溶出行為與A企業(yè)相似。

3 討論

本研究采用高效液相色譜法測定了米格來寧的溶出量，結(jié)果表明該方法靈敏簡便，專屬性強，結(jié)果準(zhǔn)確，適用于測定該制劑中米格來寧的含量，為建立體外相關(guān)性提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。