崔益瑋，趙巧靈，俞喜娜，周小敏，馬永鈞，陳 康，戴志遠(yuǎn)，王萍亞，沈清*

（1 海洋食品精深加工關(guān)鍵技術(shù)省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心 浙江省水產(chǎn)品加工技術(shù)研究聯(lián)合重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室浙江工商大學(xué)海洋食品研究院 杭州310012 2 舟山市食品藥品檢驗(yàn)檢測研究院 浙江舟山316000 3 浙江興業(yè)集團(tuán)有限公司 浙江舟山316101）

金槍魚因高營養(yǎng)、高食用價(jià)值的特點(diǎn)而備受全世界范圍消費(fèi)者的喜愛。聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織在2017年發(fā)布的報(bào)告中指出：2015年全球養(yǎng)殖金槍魚產(chǎn)量達(dá)到36 827 t[1]。近幾年，世界金槍魚年產(chǎn)量穩(wěn)定在400 萬t 左右，產(chǎn)值達(dá)300 多億美元，已成為我國海產(chǎn)品的主要補(bǔ)充和加工出口的主要品種[2]。然而，金槍魚的食用部分僅占其總質(zhì)量的50%～70%，金槍魚加工業(yè)產(chǎn)生的大量如內(nèi)臟等加工副產(chǎn)物常被作為飼料或直接丟棄，造成資源浪費(fèi)和環(huán)境負(fù)擔(dān)[3]。

金槍魚脂肪中富含功能性油脂，如磷脂、甘油酯等。磷脂是一類含有磷酸根脂質(zhì)的總稱，主要存在于動物體的腦、肝臟、卵巢等多種器官中[4-5]，它是組成生物體的重要活性成分[6]，能夠促進(jìn)動物生長發(fā)育，提高免疫力[7]，促進(jìn)酯類消化吸收，調(diào)節(jié)血脂，降低血液膽固醇[8]。海洋生物的磷脂因極性官能團(tuán)和sn-1/2 位上連接的脂肪酸不同而存在若干種結(jié)構(gòu)相似的磷脂分子亞類[9]。除常見的油酸鏈（C18：1）、亞油酸鏈（C18：2）、亞麻酸鏈（C18：3）外，多數(shù)還含有二十碳五烯酸鏈（C20：5，EPA）、二十二碳五烯酸鏈（C22：5，DPA）和二十二碳六烯酸鏈（C22：6，DHA）[10-13]等ω-3 多不飽和脂肪酸鏈，這種含有ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂兼具磷脂和ω-3 多不飽和脂肪酸的生理功能。金槍魚魚油與普通魚油最大的區(qū)別在于它富含ω-3 多不飽和脂肪酸，這是一種人體不可缺少且自身又不能合成的重要營養(yǎng)元素，有調(diào)節(jié)免疫[14]，健腦明目[15-16]，抗炎、抗癌[17-18]，預(yù)防和治療心腦血管疾病[19]等多種生理功能。

目前，常用的脂質(zhì)提取方法有溶劑萃取法、超臨界CO2萃取法和固相萃取法，其中溶劑萃取法因普遍可得到純度較高的磷脂且對設(shè)備及投資要求較低而得到廣泛的應(yīng)用。目前較常用的溶劑萃取法主要為Bligh & Dyer 法和乙醇浸提法[20]。陳康等[21]利用超聲輔助Bligh & Dyer 脂質(zhì)提取法提取南極磷蝦中磷脂；鄒舟等[22]利用Bligh & Dyer法提取鰱魚各部位組織中的磷脂；Price 等[23]通過探索不同的提取條件，得出用70%乙醇于70 ℃下提取是得到乳制品中磷脂的最佳條件。然而，上述方法或使用毒性較強(qiáng)的試劑作為溶劑而不適用于食品工業(yè)，又或方法提取效率低而達(dá)不到預(yù)期效果。

1，2-二氯乙烷（1，2-dichloroethane，1，2-DCE）在國家標(biāo)準(zhǔn)中被列為食品添加劑和食品加工助劑而允許用于某些食品加工過程中[24-25]。因其化學(xué)性質(zhì)與氯仿相似，故本研究基于1，2-DCE 體系結(jié)合丙酮沉淀法建立同時(shí)提取金槍魚內(nèi)臟中的磷脂和魚油的方法。此方法將適用于食品加工工業(yè)，并有利于對金槍魚副產(chǎn)物的合理利用。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

急凍金槍魚，寧波市象山縣漁家海味自營店。37 種脂肪酸甲酯混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品（純品），上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司；磷脂酰膽堿（Phosphatidylcholine，PC）、磷脂酰乙醇胺（Phosphatidyleth-anolamine，PE）、磷脂酰肌醇（Phosphatidylinositol，PI）、磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine，PS）4 類標(biāo)準(zhǔn)品（純度97%），美國Avanti Polar Lipids 公司；甲醇、乙腈（色譜純），德國Merck 公司；甲酸、甲酸銨（色譜純），美國Tedia 公司；1，2-DCE、氯仿、丙酮、乙醇、KCl 等（均為分析純），國藥試劑公司。

1.2 儀器與設(shè)備

液相色譜儀（Acquity），美國Waters 公司；串聯(lián)四極桿質(zhì)譜配ESI 離子源（4000 QTRAP），美國AB Sciex 公司；氣相色譜儀（7890A），美國Agilent公司；高速冷凍離心機(jī)（落地式），美國Thermo 公司；超純水系統(tǒng)，法國Milli-Q 公司；其它為實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品前處理 急凍金槍魚（Thunnus thynnus）解凍1 h 后取其內(nèi)臟，打碎、勻漿，置于-20 ℃冰箱中貯藏，備用。該過程于2 h 內(nèi)完成。

1.3.2 脂質(zhì)混合物的提取

1）1，2 -DCE/甲醇法提取脂質(zhì)混合物 精密稱定金槍魚副產(chǎn)物樣品10.00 g，加入1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）混合液40 mL 振蕩混勻，加入10 mL超純水，以10 000 r/min 高速冷凍離心10 min。使用移液器轉(zhuǎn)移下層清液，向余下的上清液和固形物中加入與第1 次提取時(shí)等體積的1，2-DCE，進(jìn)行二次提取。根據(jù)上述操作重復(fù)提取2 次。稱取圓底燒瓶空瓶質(zhì)量，將合并的下清液移入瓶中，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀65 ℃蒸發(fā)1，2-DCE，再次稱取該瓶質(zhì)量并與之前質(zhì)量相減即提取所得脂質(zhì)混合物（包括磷脂、游離脂肪酸、甘油酯等脂質(zhì)）質(zhì)量。

2）1，2 -DCE 法提取脂質(zhì)混合物 以1，2-DCE 替代上述1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）混合液，其余步驟同1，2-DCE/甲醇法。

3）Bligh & Dyer 法提取脂質(zhì)混合物 精密稱取副產(chǎn)物樣品10.00 g，加入10 mL 氯仿及20 mL 甲醇，磁力攪拌20 min，抽濾后收集濾液。向殘?jiān)屑尤?0 mL 氯仿，磁力攪拌20 min 并抽濾，重復(fù)該步驟2 次。合并3 次提取所得濾液，在其中加10 mL 0.88% KCl 溶液，混勻后倒入分液漏斗，靜置分層3 h。取下層氯仿層于已稱量的圓底燒瓶空瓶中，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60 ℃蒸除氯仿，再次稱取該瓶質(zhì)量，與之前質(zhì)量相減即提取所得脂質(zhì)混合物質(zhì)量。

4）乙醇浸提法提取脂質(zhì)混合物 精密稱取副產(chǎn)物樣品10.00 g，加入95%乙醇150 mL，振蕩混勻后置水浴鍋中，45 ℃提取4 h 后抽濾。將濾液收集至稱量后的圓底燒瓶中，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在65 ℃使乙醇和水充分蒸發(fā)，再次稱取該瓶質(zhì)量，與之前質(zhì)量相減即提取所得脂質(zhì)混合物質(zhì)量。

1.3.3 磷脂和魚油的分離純化及得率計(jì)算 待脂質(zhì)混合物冷卻后在其中加入預(yù)冷的丙酮100 mL，振蕩萃取后移入稱量的離心管中，以8 000 r/min高速冷凍離心6 min，移出上清液，將沉淀用氮吹儀吹干后再次稱量，減去空管質(zhì)量即磷脂質(zhì)量。使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀35 ℃蒸除使上清液中的丙酮，再次稱量旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶，減去空瓶質(zhì)量即魚油（包括游離脂肪酸、甘油酯等脂質(zhì)，下同）的質(zhì)量。

按磷脂得率計(jì)算公式：

1.3.4 脂肪酸甲酯化 將0.1 g 魚油與2 mL 0.5 mol/L NaOH-MeOH 溶液混合后振蕩搖勻，在65℃水浴鍋中加熱30 min，取出后冷卻至室溫。加入2 mL BF3-MeOH 溶液，振蕩混勻，在65 ℃水浴鍋中繼續(xù)加熱3 min，取出并冷卻至室溫，加入2 mL 正己烷提取，同時(shí)加入2 mL 飽和NaCl 溶液水洗。取出上清液，在其中加入1/10 體積無水硫酸鈉去除溶液中痕量的水，取上清液用于氣相色譜分析。

1.3.5 氣相色譜條件 色譜柱：HP-88 毛細(xì)管色譜柱（30 m × 0.25 mm，0.2 μm）；載氣：高純氮?dú)?；恒流?.65 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL；分流比：40∶1；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；升溫程序：初溫50 ℃，保持2 min，以4 ℃/min 升至220 ℃維持15 min。

1.3.6 液相色譜條件 色譜柱：COSMOSIL HILIC柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流動相A：含有0.1%甲酸的乙腈溶液；流動相B：含有20 mmol/L 的甲酸銨和0.1%甲酸的水溶液；流動相流速：200 μL/min。進(jìn)樣量：2 μL；梯度洗脫程序：0～3 min，維持95%流動相A；3～13 min，將流動相A 從95%降到70%；13～18 min，將流動相A 從70%降到50%；18～23 min，維持50%流動相A；23～24 min，將流動相A 從50%升到95%；24～32 min，維持95%流動相A。

1.3.7 質(zhì)譜條件 負(fù)離子模式檢測；掃描范圍：450～950 Da；去簇電壓60 V；聚焦電勢200 V；離子源電壓4 500 V；去簇電勢10 V；氣源1：344.7 kPa；氣源2：413.7 kPa；氣簾氣：172.4 kPa；脫溶劑溫度500 ℃；子離子掃描碰撞能30 V。

1.3.8 數(shù)據(jù)處理分析 試驗(yàn)所得3 組平行數(shù)據(jù)用SPSS 23.0 進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)差分析，用Origin 軟件作圖。氣相色譜使用歸一化法定量分析，質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集與分析采用Analyst 1.5 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

2 結(jié)果與討論

2.1 優(yōu)化的金槍魚內(nèi)臟磷脂和魚油提取條件

分別用1，2-DCE/甲醇法、1，2-DCE 法、Bligh& Dyer 法、乙醇浸提法同時(shí)提取金槍魚內(nèi)臟磷脂和魚油。其中，將1，2-DCE/甲醇法中的1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）混合液換成總體積相同的1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）混合液和1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）混合液分別提取，所得結(jié)果見圖1。

在磷脂提取方面，6 種提取方法對金槍魚內(nèi)臟的磷脂得率分別為（0.944±0.071）%，（0.643±0.080）%，（0.468 ± 0.083）%，（0.313 ± 0.026）%，（1.331 ± 0.074）%，（0.275 ± 0.072）%。其中1，2-DCE/甲醇法的提取率隨萃取混合液中1，2-DCE比例的增加而下降，當(dāng)萃取混合液的比例為1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）時(shí)，該方法提取金槍魚內(nèi)臟的磷脂得率最高，1，2-DCE 法的磷脂得率則最低。其原因可能在于甲醇極性高于1，2-DCE，而磷脂又為極性分子，因此提高甲醇比例有利于磷脂提取[26]。同時(shí)，使用不同溶劑將樣品組織中結(jié)合態(tài)脂類游離出來時(shí)，因氯仿相較于1，2-DCE 極性更高，與磷脂等極性脂類的親和性大，故Bligh &Dyer 法對磷脂的得率相較于1，2-DCE/甲醇法和1，2-DCE 法高。以Bligh & Dyer 法為基準(zhǔn)計(jì)算1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）法的提取率為70.9%。比較而言，氯仿不適用于食品加工業(yè)?？紤]到安全性，1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）法在實(shí)際應(yīng)用中更具優(yōu)勢。乙醇浸提法提取金槍魚內(nèi)臟磷脂的得率也很低，可能是由于乙醇浸提法也被用于蛋白質(zhì)提取[27]，在提取過程中易在磷脂中混入蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)同樣不溶于丙酮[28]，用丙酮沉淀法無法去除，因此對得率有一定影響。

在魚油提取方面，6 種提取方法的金槍魚內(nèi)臟魚油的得率分別為（17.306±0.571）%，（17.663±0.616）%，（18.281±1.002）%，（16.693 ± 0.675）%，（15.299±0.694）%，（16.267±0.898）%。1，2-DCE/甲醇法的得率隨萃取混合液中1，2-DCE 比例的增加而增加，其中1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法提取金槍魚內(nèi)臟魚油的得率最高，也高于Bligh &Dyer 法。以1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法為基準(zhǔn)計(jì)算魚油的提取率為94.7%。綜上所述，在磷脂與魚油的提取方面，1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）法為較優(yōu)。1，2-DCE 法和乙醇浸提法的金槍魚內(nèi)臟磷脂和魚油得率均較低，因此不對其進(jìn)行后續(xù)脂質(zhì)組學(xué)分析。

圖1 不同提取方法對金槍魚內(nèi)臟磷脂得率的影響Fig.1 Effect of different extraction methods on the extraction rate of phospholipids from tuna guts

2.2 魚油樣品中脂肪酸化學(xué)成分分析

對1，2-DCE/甲醇法、Bligh & Dyer 法提取所得金槍魚內(nèi)臟魚油進(jìn)行脂肪酸甲酯化試驗(yàn)，然后采用氣相色譜法分析其脂肪酸組成，結(jié)果見表1。

表1 魚油中脂肪酸甲酯化學(xué)組分及含量Table 1 The chemical constituent and content of fatty acid methyl ester（FAME）in the fish oil

結(jié)果顯示，在上述方法提取所得金槍魚內(nèi)臟魚油中共檢出18 種脂肪酸，其組成基本一致。飽和脂肪酸中，以棕櫚酸為主，硬脂酸次之；單不飽和脂肪酸中，以油酸為主，棕櫚油酸次之；多不飽和脂肪酸中，以DHA 為主，EPA 次之。各方法提取的金槍魚內(nèi)臟魚油中，不飽和脂肪酸占總脂肪酸含量的64.028%～64.891%，多不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的35.929%～36.993%，EPA 與DHA 總含量占總脂肪酸含量的30.787%～32.522%，說明1，2-DCE/甲醇法對不飽和脂肪酸的提取效果與Bligh & Dyer 法相同，且1，2-DCE/甲醇法在EPA 與DHA 的提取上更優(yōu)于Bligh &Dyer 法。

2.3 液相色譜-質(zhì)譜法脂質(zhì)組學(xué)鑒定

對比磷脂標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖（圖2）和樣品液相色譜圖（圖3）可知金槍魚內(nèi)臟磷脂樣品中所含磷脂種類。

因磷脂酰甘油（phosphatidyl glycerol，PG）一般不存在于動物骨骼肌組織中，磷脂酸（Phosphatidic acid，PA）在海洋生物組織中屬低豐度磷脂，故這2 類磷脂均未檢出，該結(jié)果與Shen 等[29]的結(jié)論一致。標(biāo)準(zhǔn)品中PC 的出峰時(shí)間為10.42 min（圖2a），對比可得，樣品中9.74 min 的峰即PC（圖3）。同理，圖3 中出峰時(shí)間為11.02 min 的峰為PE，出峰時(shí)間為16.13 min 的峰為PI，出峰時(shí)間為17.34 min 的峰為PS。繼而可得到每類磷脂分子所包含的分子種類（圖4）。

圖2 磷脂標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖Fig.2 Liquid chromatogram of phospholipid standards

圖3 樣品液相色譜圖Fig.3 Liquid chromatogram of the sample

由圖4 可知，該磷脂樣品中，PC 和PE 2 類磷脂分子檢測圖譜出峰數(shù)量較多，PI 類磷脂分子檢測圖譜出峰數(shù)量次之，PS 類磷脂分子檢測圖譜出峰數(shù)量為4 類中最少。其中，PC 類多集中在m/z764.9～879.0，m/z 778.9、m/z 805.0、m/z 850.9 等峰豐度較大；PE 類多集中在m/z 736.9～790.9，m/z 762.9、m/z 775.0、m/z 790.9 等峰豐度較大；PI 類m/z 多集中在857.9～910.0，m/z 884.0、m/z 886.0等峰豐度較大；PS 類多集中在m/z 806.9～862.7，m/z 834.9、m/z 836.9 等峰豐度較大。

待磷脂分子種類確定后，本試驗(yàn)用多維質(zhì)譜法得到所有含有選定脂肪酸鏈碎片的磷脂，與圖4 對比后由LipidViewTM 軟件定性和多維質(zhì)譜解析，并通過歸一化法對已鑒定的磷脂分子進(jìn)行相對含量測定。其它幾種提取方法所得磷脂樣品分析方法同上。由表2 可知，在對金槍魚內(nèi)臟磷脂組成的檢測中，除1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法所提取的磷脂在PS 亞類磷脂的種類上缺少CO-18：0/C22：5和C20：0/C22：6外，4 種提取方法對金槍魚內(nèi)臟磷脂的提取在磷脂種類上基本一致，即共檢出16 種PC，14 種PE，11 種PI，12 種PS。其中，磷脂的C原子總數(shù)為32～42，總雙鍵數(shù)為0～7。這4 類磷脂中，PC 亞類C16：0/C18：1（13.218%～19.897%）、C16：0/C22：6& C18：1/C20：5（11.135%～14.801%）、C16：0/C16：0（7.450%～18.558%）等分子種含量較高；PE 亞類中CO-18：1/C22：6（9.838% ～16.239% ）、C18：0/C22：6（11.687% ～13.653%）、C18：1/C20：5（10.048%～13.418%）等分子種含量較高；PI 亞類中 C16：0/C22：4& C18：0/C20：4（47.773%～62.160%）、C16：0/C22：5& C18：0/C20：5（18.672%～24.763%）、等分子種含量較高；PS 亞類中C18：0/C22：6（33.917%～42.381%）、C18：0/C22：5（15.694%～18.231%）、C16：0/C22：4& C18：0/C20：4（6.817%～11.018%）、C16：0/C22：6&C18：1/C20：5（6.352%～10.727%）等分子種含量較高。

圖4 樣品磷脂質(zhì)譜圖Fig.4 Mass spectrum of sample phospholipids

上述4 種提取方法所得各類金槍魚內(nèi)臟磷脂的脂肪酸鏈中均存在許多不飽和脂肪酸鏈，甚至較多ω-3 多不飽和脂肪酸鏈。各方法提取所得包含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂種類組成幾乎一致，其中含量較高的有PC 中的C16：0/C22：6& C18：1/C20：5、C18：0/C22：6等分子種；PE 中的CO-18：1/C20：5、CO-18：0/C20：5、C18：1/C20：5、C18：0/C20：5、CO-18：1/C22：6、CO-18：0/C22：6、C18：0/C22：6等分子種；PI 中的C16：0/C22：5& C18：0/C20：5等分子種；PS 中的C16：0/C22：6& CO-18：1/C20：5、C18：0/C22：6、C18：0/C22：5等分子種。雖然磷脂種類相同，但是不同提取方法得到的含有這類脂肪酸鏈的磷脂含量卻有所差別（圖5）。

圖5 金槍魚內(nèi)臟磷脂ω-3 多不飽和脂肪酸鏈相對豐度Fig.5 Relative abundance of ω-3 polyunsaturated fatty acid chains in tuna guts phospholipids

如圖5所示，在對PC 類磷脂的提取中，1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）法得到的包含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂含量最高（51.210%±5.074%），其次是1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法（45.857% ±5.151%），最低的為Bligh & Dyer 法（37.010% ±4.485%）；在對PE 類磷脂的提取中，1，2-DCE/甲

醇（1∶2，V/V）法得到的包含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂含量最高（71.319% ± 7.148%），其次是1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）法（68.699%± 6.709%），最低的為1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法（56.606%±6.310%）；在對PI 類磷脂的提取中，1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）法得到的包含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂含量最高（34.349% ± 3.814%），其次是1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）法（34.090%±4.010%），最低的為Bligh & Dyer 法（25.300%±3.162%）；在對PS 類磷脂的提取中，1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）法得到的包含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂含量最高（80.598%±8.526%），其次是1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）法（75.205% ± 8.407%），最低的為1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法（70.242% ±7.167%）。可以看出，在提取金槍魚內(nèi)臟中含ω-3多不飽和脂肪酸鏈磷脂方面，雖然在磷脂種類組成上各方法差異很小，甚至幾乎相同，所得結(jié)果也與已有報(bào)道相類似[30-31]，但是在提取量上1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）法和1，2-DCE/甲醇（1∶1，V/V）法對4 類磷脂的提取量均明顯優(yōu)于Bligh & Dyer法和1，2-DCE/甲醇（2∶1，V/V）法，表明1，2-DCE/甲醇法不僅可以提取金槍魚內(nèi)臟中的磷脂，還可以提取其中含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂。

表2 金槍魚內(nèi)臟磷脂相對豐度及結(jié)構(gòu)Table 2 Relative abundances and chemical structures of tuna visceral phospholipids

（續(xù)表2）

3 結(jié)論

目前金槍魚副產(chǎn)物中脂質(zhì)的提取方法或因試劑毒性較大不適宜用于食品工業(yè)，或存在分離度低、操作繁瑣等缺點(diǎn)。本方法基于相對更為安全的1，2-DCE 體系結(jié)合丙酮沉淀法，建立了同時(shí)提取金槍魚內(nèi)臟中的磷脂和魚油的方法，并對其進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳提取方法為1，2-DCE/甲醇（1∶2，V/V）法，磷脂和魚油的得率分別為（0.944 ±0.071）%和（17.306±0.571）%。通過對該方法提取所得魚油樣品進(jìn)行脂肪酸鏈分析，發(fā)現(xiàn)金槍魚內(nèi)臟魚油中多不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸含量的36.678%，其中EPA 與DHA 之和達(dá)32.256%。所得磷脂樣品中共檢測出53 種磷脂分子，含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂所占比例較高。試驗(yàn)結(jié)果說明該方法不僅能夠高質(zhì)量地提取金槍魚內(nèi)臟中的不飽和脂肪酸，還可有效制備富含ω-3 多不飽和脂肪酸鏈的磷脂。通過利用1，2-DCE 在食品加工中的相對安全性，不僅開發(fā)了更安全、更適用于食品加工工業(yè)的提取方法，同時(shí)也對金槍魚副產(chǎn)物進(jìn)行了更加合理的開發(fā)利用，達(dá)到了保護(hù)生態(tài)環(huán)境的目的。