周澤平

摘要：目的：評(píng)價(jià)黃酮類化合物的合成效果及合成物對(duì)血管舒張作用。方法：改進(jìn)Baker-Venkataraman法合成黃酮母核及其衍生物，以合成物（3、10、30μmol/L）處理大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)，評(píng)價(jià)給藥30min后肌張力變化。結(jié)果：合成10種物質(zhì);合成物對(duì)內(nèi)皮完整以及去皮的血管環(huán)都有一定的舒張作用，呈出現(xiàn)明顯的劑量依賴，30μmol/L劑量條件下，各個(gè)時(shí)間段內(nèi)皮組舒張百分比高于取內(nèi)皮組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：改進(jìn)Baker-Venkataraman法合成黃酮母核及其衍生物效果較好，合成物確實(shí)可起到血管舒張作用，且與內(nèi)皮有關(guān)。

關(guān)鍵詞：黃酮類化合物;血管舒張;合成

【中圖分類號(hào)】R97 ? ? ? ? ? ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）18--01

天然產(chǎn)物是新藥研發(fā)主要來(lái)源，但天然產(chǎn)物在植物中含量較低，分離純化難度大，影響大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化，此外有些天然活性成分藥效不強(qiáng)或毒副作用大也限制了新藥的研發(fā)。天然產(chǎn)物衍生物和合成藥物是新藥研發(fā)熱點(diǎn)，約占新上市小分子新藥的90%以上[1]。黃酮類化合物分布廣泛，具有多樣生物活性，已有許多相關(guān)藥物應(yīng)用于臨床，如乙氧黃酮具有明顯的擴(kuò)張冠脈作用常用于治療心血管疾病。本次試采用改進(jìn)Baker-Venkataraman法合成黃酮類化合物，并評(píng)價(jià)合成物血管舒張作用。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、控制型加熱磁力攪拌器、電子分析天平、紅外測(cè)定儀、高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀、超級(jí)恒溫器、多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)，間苯二酚、間苯三酚、對(duì)苯二酚、無(wú)水碳酸鉀、無(wú)水氯化鈣、氫氧化鉀、甲醇、乙醚、氯仿等分析純。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康SD大鼠，雌雄不限，體重220～260g，

1.2方法

1.2.1 黃酮類化合物合成

考慮到黃酮類化合物較多，研究?jī)H進(jìn)行黃酮母核及其衍生物的合成。將2-羥基苯乙酮和苯甲酰氯及其衍生物，進(jìn)行改進(jìn)BV重排反應(yīng)，生成β-丙二酮，酸化關(guān)環(huán)后得到黃酮母核及其四個(gè)衍生物。在反應(yīng)瓶中加入2-羥基苯乙酮16.2mmol，無(wú)水K2CO3 162.0mmol及丙酮60ml，60℃油浴回流攪拌下滴加苯甲酰氯及其衍生物48.6mmol，加熱回流24h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。自然冷卻至室溫，過(guò)濾，丙酮淋洗濾餅，加入10%乙酸100ml，攪拌，待停止反應(yīng)后，過(guò)濾，以水洗滌至中性，真空干燥后，以丙酮重結(jié)晶得到黃色針狀晶體。

1.2.2 血管舒展作用研究

大鼠肝素化處理20min，20%烏拉坦腹腔麻醉，開(kāi)胸取出胸主動(dòng)脈，植入氧飽和K-H溶液醋盤(pán)中，分析血管周圍結(jié)締組織，祛除參與血凝塊，平均切成3～4mm小段，懸掛含K-H溶液浴槽中，溫度37℃，通過(guò)95%O2+5%CO2，另一端連通張力換能器，平衡1.5h，靜息張力2g，每15min更換1次H-K液，待張力穩(wěn)定后制得模型。制備去內(nèi)皮血管環(huán)時(shí)，以棉簽插入，輕輕旋轉(zhuǎn)，以Ach 100μmol/L舒張METH檢測(cè)內(nèi)皮功能，以30μmol/L使血管收縮，直至穩(wěn)定。在穩(wěn)定后將如合成的黃酮內(nèi)核（3、10、30μmol/L），觀察組給藥后30min肌張力變化，其中溶劑對(duì)照組，在血管收縮穩(wěn)定后加入等量DMSO。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

WPS收集錄入數(shù)據(jù)資料，以SPSS18.0軟件包統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，若服從正態(tài)分布采用t檢驗(yàn)，否則采用非參數(shù)檢驗(yàn)，以P<0.05表示檢驗(yàn)水平。

2結(jié)果

2.1 黃酮母核及其衍生物

高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀、紅外測(cè)定儀檢測(cè)，主要物質(zhì)包括：①1-（2-羥基苯基）-3-苯基-1，3-丙二酮及其衍生物，1-（2-羥基苯基）-3-苯基-1，3-丙二酮（9a），淡黃色針狀結(jié)晶，收率80.3%，熔點(diǎn)117℃～121℃，1-（2-羥基苯基）-3-（4`-氟苯基）-1，3-丙二酮（9b），淡黃色針狀結(jié)晶，收率71.87%，熔點(diǎn)135℃～136℃，1-（2-羥基苯基）-3-（4`-氟苯基）-1，3-丙二酮（9c），收率71.8%，熔點(diǎn)135℃～136℃，1-（2-羥基苯基）-3-（4`-氟苯基）-1，3-丙二酮（9d），收率73.5%，熔點(diǎn)111℃～114℃，1-（2-羥基苯基）-3-（4`-氟苯基）-1，3-丙二酮（9e），收率70.9%，熔點(diǎn)107～110℃;②黃酮母核及其衍生物，主要包括黃酮母核（10a），白色針狀結(jié)晶，收率65.3%，熔點(diǎn)96～99℃，4`-氟黃酮（10b），灰白色針狀結(jié)晶，收率60.1%，熔點(diǎn)152～155℃，4`-氟黃酮（10C），白色針狀結(jié)晶，收率57.8%，收率57.8%，熔點(diǎn)191～194℃，4`-甲基黃酮（10d），白色針狀結(jié)晶，收率51.6%，熔點(diǎn)115～117℃，4`-甲氧基黃酮（10c），白色針狀結(jié)晶，收率61.6%，熔點(diǎn)161～163℃，4`-甲氧基黃酮（10c），白色針狀結(jié)晶，收率61.4%，熔點(diǎn)160～162℃。

2.2 血管舒張作用

合成物對(duì)內(nèi)皮完整以及去皮的血管環(huán)都有一定的舒張作用，給藥1min后邊開(kāi)始起效，18min左右達(dá)到最大舒張效用，呈出現(xiàn)明顯的劑量依賴。30μmol/L劑量條件下，各個(gè)時(shí)間段內(nèi)皮組舒張百分比高于取內(nèi)皮組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），30min后舒張百分比分別為（91.7±3.2）%、（76.4±3.5）%。

3討論

黃酮類化合物的合成技術(shù)基本成熟，經(jīng)典合成方法可分為查爾酮路線以及本次研究采用的Baker-Venkataraman重排法，操作并不復(fù)雜，常用于黃酮類抗菌藥物合成[2]。本次研究顯示，一次合成便獲得10種化合物，但回收率仍有待提高。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，合成的黃酮類化合物具有一定的血管舒張作用，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴，其對(duì)有內(nèi)皮血管舒張作用更好，提示黃酮類化合物促血管舒張作用可能與其作用于血管內(nèi)皮有關(guān)。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[S].—部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：359-360

[2]農(nóng)朝贊，葉海洪，王麗等.黃酮類化合物與大環(huán)內(nèi)醋類抗生素的協(xié)同抑菌作用機(jī)制[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)染志，2011，31（9）：750.