顧潔，儲(chǔ)開楓

慢性萎縮性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）也稱萎縮性胃炎，是常見的慢性消化系統(tǒng)疾病之一，主要病理特征為胃黏膜受多種因素導(dǎo)致上皮和腺體萎縮、數(shù)目減少、變薄，伴有異型增生或腸腺體化生［1］。此病的主要臨床表現(xiàn)為噯氣、消瘦、貧血、食欲不振、上腹部隱痛等，臨床表現(xiàn)不典型，未能引起患者重視，難以獲得確切的患病率［2］。在1978年世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）就將此病明確定義為一種胃癌前病變，對患者的日常生活和工作造成嚴(yán)重的影響，嚴(yán)重者甚至危及生命。據(jù)WHO癌癥報(bào)告［3］，2020年全球胃癌的發(fā)病率在惡性腫瘤的第5位，病死例數(shù)在全球惡性腫瘤病死率的第4位。表皮生長因子（Epidermal growth factor，EGF）是小分子多肽類生長因子，可通過與胃黏膜細(xì)胞上的表皮生長因子受體（Epidermal growth factor receptor，EGFR）結(jié)合；腸道特異性轉(zhuǎn)錄因子2（Intestinal specific transcription factor 2，CDX2）是腸道特異性尾型同源異型盒轉(zhuǎn)錄因子中的一員，在腸道中呈特異性表達(dá)；其中EGF、CDX2在CAG患者體內(nèi)表達(dá)均呈特異性，其基因突變、轉(zhuǎn)錄水平、表達(dá)異常均可成為促進(jìn)癌前病變甚至腫瘤發(fā)生發(fā)展的原因［4-5］。在本文研究中，主要探究麥冬湯加減對胃陰不足型慢性萎縮性胃炎患者EGF、CDX2表達(dá)的影響，結(jié)果如下。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

選取2019年2月～2020年1月我院接診的胃陰不足型慢性萎縮性胃炎患者126例，按照分層抽樣法（將126例胃陰不足型慢性萎縮性胃炎患者劃分為若干個(gè)同質(zhì)層，在各層組按照隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)行抽樣）分為對照組和麥冬湯加減組各63例。兩組患者在一般資料中比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具有可比性。見表1。本次研究所有患者及其家屬均知情，均簽署了知情同意書，且經(jīng)過我院倫理委員會(huì)審批，批件號：（2019）倫審第（58）號。

表1 兩組患者一般資料比較

納入標(biāo)準(zhǔn)：西醫(yī)納入標(biāo)準(zhǔn)：符合2017年《中國慢性胃炎共識意見》［6］（2017，上海）中的診斷標(biāo)準(zhǔn)；中醫(yī)納入標(biāo)準(zhǔn)：符合2017年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)頒布的《慢性胃炎中醫(yī)診療專家共識意見》［7］中胃陰不足證的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：存在慢性萎縮性胃炎癥狀，但不符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)者；伴有心、肺、腎等器質(zhì)性病變及神經(jīng)、結(jié)締組織、血液等系統(tǒng)疾病者；伴有幽門螺旋菌感染者；GAG伴高級別上皮內(nèi)瘤變者或病理診斷疑有惡變，上消化道出血、消化性潰瘍及胃腸道腫瘤者；近1周有飲酒史者；備孕、妊娠期及哺乳期婦女；需服用除研究用藥等其他會(huì)影響胃腸功能藥物或?qū)λ盟幬镉羞^敏史者；有精神系統(tǒng)及精神疾病史者；依從性較差或個(gè)人原因不能按約定配合此次試驗(yàn)者；資料不全者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 對照組采用多潘立酮片（海南制藥廠有限公司制藥一廠；國準(zhǔn)字號：H20 094059；10 mg／片）進(jìn)行治療（多潘立酮片是治療胃陰不足型慢性萎縮性胃炎的常用藥物），10 mg／次，每天3次，餐前30 min口服；麥冬湯加減組在其基礎(chǔ)上加服麥冬湯加減，由醫(yī)院藥房統(tǒng)一煎煮，主方：扁豆、生甘草6 g，玉竹10 g，沙參、麥冬、天花粉15 g。若有胃脘灼熱、嘈雜且反酸現(xiàn)象者加黃連6 g、吳茱萸3 g；若有胃熱熾盛化火現(xiàn)象者加生大黃10 g、生石膏25 g；若有心煩意亂現(xiàn)象者加生地、竹茹、香附各10 g；若難以排便者加瓜萎仁30 g；若無食欲或飯量減少者加焦神曲、焦麥芽、雞內(nèi)金各12 g。煎煮后取藥汁400 mL，1劑／天，早晚各200 mL。兩組患者在治療期間用藥后均禁食刺激性食物或藥物，不飲濃茶或咖啡，禁煙酒，兩組患者均持續(xù)治療4周。

1.2.2 兩組患者PGE2、GAS、MTL水平評價(jià) 抽取兩組患者治療前1 d及治療后天清晨空腹靜脈血3 mL，以離心半徑為5 cm、以轉(zhuǎn)速3 000 r／min離心處理10 min，分離上層血清，-80℃保存，待用。采用酶聯(lián)免疫法檢測前列腺素E2（prostaglandin，PGE2）、胃泌素（gastrin，GAS）、胃動(dòng)素（motilin，MTL）水平，實(shí)驗(yàn)步驟：將血清樣本置于室溫后，取出試劑盒，標(biāo)記酶標(biāo)板，制作標(biāo)準(zhǔn)品，以1∶2的稀釋液稀釋樣品；在反應(yīng)孔上依次加入稀釋好的待測血清及標(biāo)準(zhǔn)品100μL／孔，放置37℃恒溫孵育箱中濕育2 h；用專用洗滌液將反應(yīng)板清洗3次后，加入抗體工作液（1∶100倍稀釋后）100μL／孔，置于37℃恒溫孵育箱中濕育45 min；繼續(xù)清洗反應(yīng)板4次后，在反應(yīng)孔內(nèi)加入TMB溶液100μL／孔，置于37℃恒溫孵育箱中濕育45 min后在反應(yīng)孔內(nèi)加入終止液100μL／孔以終止反應(yīng)，在450 nm波長（參考波長570～630 nm）測定吸光度，經(jīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算PGE2、GAS、MTL水平。

1.2.3 兩組患者PGⅠ、TNF-α、SOD、MDA水平評價(jià) 抽取兩組患者治療前1 d及治療后天清晨空腹靜脈血3 mL，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測胃蛋白酶原Ⅰ（pepsinogenⅠ，PGⅠ），采用雙抗體夾心法檢測腫瘤壞死因子（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平。

1.2.4 兩組患者EGF水平、CDX2表達(dá)評價(jià) 抽取兩組患者治療前1 d及治療后清晨空腹靜脈血3 mL，采用雙抗體夾心法檢測表皮生長因子（Epidermal Growth Factor，EGF），實(shí)驗(yàn)步驟：取出試劑盒至室溫平橫復(fù)融標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品，將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和稀釋后待測樣本加入抗人CHI3L1抗體包被微孔板37℃孵育1 h，形成抗原抗體復(fù)合物，洗板機(jī)洗板5次，加入生物素標(biāo)記的抗人CHI3L1抗體37℃孵育1 h，，形成抗體-抗原-生物素標(biāo)記抗體復(fù)合物，洗板機(jī)洗板5次，加入HRP標(biāo)記的親和素37℃孵育30 min，形成抗體-抗原-生物素標(biāo)記抗體-酶標(biāo)親和素復(fù)合物，洗板機(jī)洗板5次，加入四甲基聯(lián)苯胺底物系統(tǒng)，顯色15 min，顯色反應(yīng)后加終止液，酶標(biāo)儀檢測450 nm吸光度值；采用免疫組化染色SP法檢測（尾部型同源框轉(zhuǎn)錄因子2，caudal type homeobox transcription factor 2，CDX2），實(shí)驗(yàn)步驟：取胃黏膜組織經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)脫水、石蠟包埋、4μm連續(xù)切片。將切片侵入0.01 M構(gòu)櫞酸鹽緩沖液高壓30 min之后冷卻20 min，使用PBS緩沖液進(jìn)行清洗，滴加5%BSA封閉液，室溫10 min，甩去多余液體，滴加一抗4℃環(huán)境下過夜后使用PBS緩沖液清洗3次，每次2 min，滴加生物素化的山羊抗兔IgG，37℃30 min后，使用PBS緩沖液清洗3次，每次2 min，滴加試劑辣根酶標(biāo)記聯(lián)霉卵白素，使用PBS緩沖液清洗4次，每次5 min，使用DAB顯色試劑盒，取1 mL蒸餾水，加設(shè)計(jì)盒A，B，C試劑各1滴，混勻后加至切片，室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間，一般5～30 min之間，蒸餾水洗滌，最后使用蘇木素輕度復(fù)染2 min、脫水、透明、封片，使用顯微鏡觀察。

1.2.5 兩組患者中醫(yī)癥候評分評價(jià) 評價(jià)患者治療前1 d與治療后中醫(yī)證候積分，根據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》［8］和2017年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)《慢性胃炎中醫(yī)診療專家共識意見》［9］制定中醫(yī)癥候積分，主癥胃脘灼熱、脅肋脹痛評分標(biāo)準(zhǔn)為：無0分、輕2分、中4分、重6分，次癥反酸噯氣、情緒抑郁評分標(biāo)準(zhǔn)為：無0分、輕1分、中2分、重3分，其中評分越高，則說明病情越嚴(yán)重。

1.2.6 兩組患者中醫(yī)癥候療效統(tǒng)計(jì) 參照參考文獻(xiàn)［8］，將治療效果分為顯效、有效、無效三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，其中患者癥狀消失或基本消失，療效指數(shù)≥90%為顯效；患者癥狀有所緩解，療效指數(shù)≥30%，＜90%為有效；癥狀未消失甚至加重，療效指數(shù)＜30%為無效。療效指數(shù)=（療前積分-療后積分）／療前積分×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組患者PGE2、GAS、MTL水平比較

如表2所示，治療前兩組患者PGE2、GAS、MTL水平對比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，兩組患者PGE2、GAS、MTL水平均升高，且麥冬湯加減組PGE2、GAS、MTL水平高于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），兩組患者治療前后差值對比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。

表2 兩組患者PGE2、GAS、MTL水平比較（）

表2 兩組患者PGE2、GAS、MTL水平比較（）

2.2 兩組患者PGⅠ、TNF-α、SOD、MDA水平比較

如表3所示，治療前兩組患者PGⅠ、TNF-α、SOD、MDA水平對比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，兩組患者PGⅠ、SOD水平均升高，TNF-α、MDA水平均降低，且麥冬湯加減組PGⅠ、SOD水平高于對照組，TNF-α、MDA水平低于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），兩組患者治療前后差值對比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。

表3 兩組患者PGⅠ、TNF-α、SOD、MDA水平比較（）

表3 兩組患者PGⅠ、TNF-α、SOD、MDA水平比較（）

2.3 兩組患者EGF水平、CDX2表達(dá)比較

如表4所示，治療前兩組患者EGF水平、CDX2表達(dá)對比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，兩組患者EGF水平均升高，CDX2水平均降低，且麥冬湯加減組EGF水平高于對照組，CDX2水平低于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），兩組患者治療前后差值對比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。

表4 兩組患者EGF水平、CDX2表達(dá)比較（）

表4 兩組患者EGF水平、CDX2表達(dá)比較（）

2.4 兩組患者中醫(yī)癥候評分比較

如表5所示，治療前兩組患者中醫(yī)癥候評分對比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，兩組中醫(yī)癥候評分均降低，且麥冬湯加減組中醫(yī)癥候評分低于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），兩組患者治療前后差值對比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。

表5 兩組患者中醫(yī)癥候評分比較［（），分］

表5 兩組患者中醫(yī)癥候評分比較［（），分］

2.6 兩組患者中醫(yī)癥候療效比較

如表6所示，麥冬湯加減組中醫(yī)癥候療效總有效率高于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。

表6 兩組患者中醫(yī)癥候療效比較［n（%）］

3 討論

慢性萎縮性胃炎屬于一種多發(fā)、難治性消化系統(tǒng)疾病，中醫(yī)根據(jù)其臨床癥狀的不同，將其歸屬于“胃脘痛”、“噯氣”、“反酸”等病范疇［10］。CAG的病變部位在胃部，與肝脾、兩臟密切相關(guān)。大多數(shù)醫(yī)學(xué)家認(rèn)為該病的病因主要是情緒失調(diào)、飲食不節(jié)制、外部邪氣入侵胃部、服用藥物受其損傷以及先天的體質(zhì)缺陷等都會(huì)使脾胃受損，導(dǎo)致脾臟運(yùn)化功能失常、胃氣通降功能受阻、正常的生理功能運(yùn)行受到阻礙，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)的氣體滯留，血瘀，濕氣聚集成痰，受涼、體質(zhì)虛弱導(dǎo)致氣滯寒凝、熱郁等病理產(chǎn)物，會(huì)進(jìn)一步妨礙脾胃氣體的升降、長時(shí)間過后病邪會(huì)引發(fā)氣病及于血的傳變趨勢，產(chǎn)生血瘀現(xiàn)象，胃絡(luò)失養(yǎng)，胃腑萎縮［11-12］。慢性萎縮性胃炎的病因諸多，病機(jī)復(fù)雜，有“正虛”和“邪實(shí)”兩方面，基本病機(jī)是氣滯血瘀。麥冬湯加減由扁豆、生甘草、玉竹、沙參、麥冬、天花粉組成，具有甘寒生津，清養(yǎng)肺胃的功效，常用于治療肺胃陰傷導(dǎo)致口渴咽干、干咳少痰、舌紅少苔等癥狀［13］。此藥方中扁豆具有治吐瀉轉(zhuǎn)筋、瘡毒、跌打創(chuàng)傷，還可健脾、去濕氣的功效；生甘草具有治臟燥、瀉火解毒、緩急止痛的功效；玉竹具有治肺胃陰傷、燥熱咳嗽、內(nèi)熱消渴的功效；沙參具有養(yǎng)陰清熱、潤肺化痰、益胃生津的功效；麥冬具有降低血糖、口干、增強(qiáng)免疫功能的功效；天花粉具有熱病煩渴、肺熱燥咳、內(nèi)熱消渴的功效［14-15］。在郭明浩［16］等人研究中，采用多潘立酮治療慢性萎縮性胃炎可有效的調(diào)節(jié)TNF-α、IL-8水平，進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥。在趙文［16］等人研究中，采用多潘立酮治療慢性萎縮性胃炎，可有效改善患者臨床癥狀，降低中醫(yī)證候積分、炎性因子水平，獲得較好的臨床效果。在本文研究中，主要探究麥冬湯加減對胃陰不足型慢性萎縮性胃炎患者EGF、CDX2表達(dá)，對炎性因子、氧化應(yīng)激水平的影響。

建議多搜集一些多潘立酮的使用情況，引用用一些較好的雜志文章，最好是說明這是治療的金標(biāo)準(zhǔn)！

建議在這里說明一下研究的設(shè)計(jì)方案和思路！

GAS又被稱為促胃液素，是重要的胃腸激素之一，由開放性G細(xì)胞分泌，主要分布在胃竇部，具有促進(jìn)胃腸道的分泌功能，刺激胃泌酸腺區(qū)黏膜和十二指腸黏膜的DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成并促進(jìn)其生長，還可促進(jìn)胰島素和降鈣素的釋放［17］。在李靜［18］研究中，經(jīng)治療后患者GAS水平顯著提升，可有效促進(jìn)胃腸激素的分泌，促進(jìn)胃腸功能恢復(fù)，與本文研究一致。MTL由M細(xì)胞分泌，主要分布在小腸，具有促進(jìn)和影響胃腸運(yùn)動(dòng)及胃腸道兌水、電解質(zhì)的運(yùn)輸，還可調(diào)節(jié)腸道神經(jīng)系統(tǒng)［19］。在李加虎［20］等人研究中，經(jīng)治療后患者M(jìn)TL水平降低，胃黏膜萎縮與腸上皮化生明顯轉(zhuǎn)歸，對患者的臨床癥狀有明顯的改善作用，與本文研究一致。在本文研究中，治療后兩組患者GAS、MTL水平均優(yōu)于治療前，且麥冬湯加減組治療效果優(yōu)于對照組，說明麥冬湯加減治療CAG效果更佳，可在短時(shí)間內(nèi)有效緩解患者臨床癥狀，調(diào)節(jié)胃腸道激素，恢復(fù)胃腸功能。

TNF-α是由巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子，在炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)起重要的作用［21］。SOD是生物體系中抗氧化酶系的重要組成成員之一，在治療炎癥、自身免疫性、心腦血管疾病等都取得顯著療效［22］。EGF是人體分泌的重要細(xì)胞生長因子，具有很強(qiáng)的生理活性，可促進(jìn)皮膚細(xì)胞的分裂，還可抑制衰老基因表達(dá)、組織皮膚衰老。在胡曉珍［23］研究中，EGF在治療后水平降低，對逆轉(zhuǎn)癌前病變，阻止CAG向胃癌發(fā)展具有明顯的優(yōu)勢，與本文研究一致。CDX2在腸道呈特異性表達(dá)，其基因突變、轉(zhuǎn)錄水平下降及異位均會(huì)成為促成癌前病變甚至腫瘤發(fā)生發(fā)展的原因。上述指標(biāo)GAS、MTL、TNF-α、SOD水平變化可用于評估患者胃腸道功能、機(jī)體炎癥反應(yīng)，氧化應(yīng)激，EGF、CDX2指標(biāo)水平高低可有效了解疾病是否存在癌前病變或向腫瘤發(fā)生發(fā)展。在李玄［24］等人研究中，CDX2通過作用于IL-6／STAT3通路，抑制胃癌細(xì)胞的增殖，可有效阻止癌前病變。在本文研究中，治療前兩組患者TNF-α、SOD、EGF水平及CDX2表達(dá)對比無差異，但治療后兩組患者TNF-α、SOD、EGF水平及CDX2表達(dá)均優(yōu)于治療前，且麥冬湯加減組者TNF-α、SOD、EGF水平及CDX2表達(dá)優(yōu)于對照組，說明麥冬湯加減治療胃陰不足型慢性萎縮性胃炎，可有效緩解患者臨床癥狀，減輕機(jī)體炎癥，增強(qiáng)細(xì)胞生長因子活性，降低CDX2表達(dá)，效果顯著。

綜上所述，麥冬湯加減治療胃陰不足型慢性萎縮性胃炎，可有效緩解患者的臨床癥狀，有效調(diào)節(jié)胃腸道激素水平，減輕機(jī)體炎癥，降低氧化應(yīng)激相關(guān)因子水平，在臨床治療中取得良好的療效。但因本研究所采用的樣本數(shù)量有限和研究時(shí)間較短，為證實(shí)和對比麥冬湯加減治療胃陰不足型慢性萎縮性胃炎的臨床效果還需進(jìn)一步開展大樣本試驗(yàn)證實(shí)。但在此研究中并未深入探究麥冬湯的作用機(jī)制，后續(xù)研究旨在探究其作用機(jī)制，為臨床研究提供重要依據(jù)。