李銀華，彭玉次，許鐘元，余夢(mèng)婷，王振，馬衛(wèi)興*，董自波

(1.江蘇海洋大學(xué)環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院，江蘇 連云港 222005；2.江蘇海洋大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 連云港 222005；3.江蘇海洋大學(xué)海洋科學(xué)與水產(chǎn)學(xué)院，江蘇 連云港 222005；4.江蘇省海洋藥物篩選重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 連云港 222005； 5.江蘇省海洋藥用資源開發(fā)工程研究中心，江蘇 連云港 222005)

苯扎氯銨是一種精細(xì)化工產(chǎn)品，屬于季銨鹽類陽離子表面活性劑[1]，具有廣譜殺菌的作用，在日常生活中得到廣泛應(yīng)用。因此，建立簡(jiǎn)便且靈敏度高的苯扎氯銨測(cè)定方法具有現(xiàn)實(shí)意義。

目前，關(guān)于苯扎氯銨的測(cè)定方法主要有碘酸鉀滴定法[2]、化學(xué)電離質(zhì)譜法[3]、紫外-分光光度法[2]、示差分光光度法[4]、高效液相色譜法[5,6]、電位傳感器法[7]和氣相色譜法[8]等，這些測(cè)定方法存在前期處理過程繁瑣費(fèi)時(shí)、以及實(shí)驗(yàn)成本高等問題，為避免以上問題，本文建立了共振光散射光譜法測(cè)定苯扎氯銨。共振光散射光譜屬于同步光譜，具有靈敏度高、簡(jiǎn)便高效等優(yōu)點(diǎn)。此法常用于材料分析[9,10]、生化分析[11-13]、食品分析[14]等方面，目前未出現(xiàn)SDBS共振光散射光譜測(cè)定苯扎氯銨的文獻(xiàn)報(bào)道。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 原料與儀器

苯扎氯銨，分析純，德國(guó)Fluka公司；十二烷基苯磺酸鈉(SDBS)，分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

F-7000型熒光分光光度計(jì)(激發(fā)和發(fā)射狹縫寬度為2.5 nm)，日本日立公司；FA2204N分析天平，上海高致精密儀器有限公司；pHS-2型酸度計(jì)，上海雷磁儀器廠。

1.2 溶液配制

苯扎氯銨標(biāo)準(zhǔn)溶液：ρ(苯扎氯銨)=10.0 mg/L，準(zhǔn)確稱取苯扎氯銨2.5 mg于小燒杯中，加少量水充分溶解后轉(zhuǎn)移至250 mL容量瓶中，加水定容，搖勻待用。

標(biāo)準(zhǔn)樣品配制方法：在10 mL的比色管中，準(zhǔn)確移取適量ρ(苯扎氯銨)=10.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后再依次加入c(SDBS)=5.0×10-4mol/L的SDBS溶液0.50 mL和pH=8.40的Clark-Lubs緩沖溶液1.20 mL，加水定容，搖勻使其充分溶解；

空白溶液配制方法：在10 mL的比色管中，依次加入c(SDBS)=5.0×10-4mol/L的SDBS溶液0.50 mL和pH=8.40的Clark-Lubs緩沖溶液1.20 mL，加水定容，搖勻使其充分溶解。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

將標(biāo)準(zhǔn)樣品和空白溶液均放置5 min后置于熒光分光光度計(jì)中，設(shè)定激發(fā)波長(zhǎng)(λex)和發(fā)射波長(zhǎng)(λem)均為285 nm，同步掃描得共振光散射光譜譜圖，記錄標(biāo)準(zhǔn)樣品的共振光散射強(qiáng)度IRLS和空白溶液的共振光散射強(qiáng)度I0，并計(jì)算出共振光散射強(qiáng)度差ΔIRLS(ΔIRLS=IRLS-I0)。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定

準(zhǔn)確移取體積為0.05、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20和1.4 mLρ(苯扎氯銨)=10.0 mg/L的苯扎氯銨標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于8只10 mL比色管中，根據(jù)1.3分別配制成標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，同時(shí)配制空白溶液，分別測(cè)定在285 nm處標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的共振光散射強(qiáng)度IRLS和空白溶液的的共振光散射強(qiáng)度I0，計(jì)算ΔIRLS，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié)果與討論

2.1 光譜分析

在200～600 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)(λex=λem)，分別掃描空白溶液及不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，所得共振光散射光譜如圖1所示，空白溶液的共振光散射強(qiáng)度最弱，加入苯扎氯銨后反應(yīng)體系的共振光散射強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，且體系的共振光散射強(qiáng)度隨苯扎氯銨濃度的增大逐漸增強(qiáng)。最大吸收峰位于285 nm處，故選擇285 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

圖1 共振光散射光譜

2.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化

2.2.1 Clark-Lubs緩沖溶液的影響

針對(duì)Clark-Lubs、HAc-NaAc、Britton-Robinson等緩沖介質(zhì)對(duì)反應(yīng)體系共振光散射強(qiáng)度的影響進(jìn)行考察，結(jié)果表明Clark-Lubs緩沖介質(zhì)最佳。探究pH值在7.00～10.00的Clark-Lubs緩沖介質(zhì)對(duì)體系的影響，結(jié)果如圖2，反應(yīng)體系共振光散射強(qiáng)度在pH=8.40時(shí)達(dá)到最大，且用量為1.20 mL時(shí)最佳。

圖2 pH值的影響

2.2.2 SDBS用量的影響

SDBS屬于陰離子表面活性劑，是苯扎氯銨的離子締合劑，其用量對(duì)體系共振光散射強(qiáng)度影響較大。對(duì)體積在0.20 ～1.20 mL范圍c(SDBS)=5.0×10-4mol/L的SDBS進(jìn)行考察，結(jié)果見圖3。SDBS用量為0.50 mL時(shí)體系的共振光散射強(qiáng)度達(dá)到最大。故選擇0.50 mL為SDBS最佳用量。

圖3 SDBS用量的影響

2.2.3 反應(yīng)時(shí)間的影響

離子締合反應(yīng)的時(shí)間能影響體系共振光散射強(qiáng)度，對(duì)時(shí)間進(jìn)行考察，結(jié)果見圖4。

圖4 時(shí)間的影響

反應(yīng)體系的共振光散射強(qiáng)度差值在15 min內(nèi)達(dá)到最大且基本穩(wěn)定，隨后急劇下降。因此需在15 min內(nèi)完成檢測(cè)。

2.2.4 共存物質(zhì)的影響

金屬離子、糖類以及氨基酸等共存物質(zhì)會(huì)影響反應(yīng)體系共振光散射強(qiáng)度，對(duì)此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)考察。結(jié)果見表1，根據(jù)1.3進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得相對(duì)誤差均不超過±5%的條件下，表1中的物質(zhì)對(duì)體系的測(cè)定沒有干擾，說明建立的方法具有良好的選擇性。

表1 干擾試驗(yàn)結(jié)果

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5，ΔIRLS與濃度在0.05～1.40 mg/L范圍內(nèi)的苯扎氯銨呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔIRLS=6 918.05c-441.28，c的單位是mg/L，相關(guān)系數(shù)R為0.999 2，檢出限為0.045 mg/L。

圖5 工作曲線

2.4 回收實(shí)驗(yàn)

根據(jù)處方配比，精密稱取苯扎氯銨，分別加入相應(yīng)的輔料配制成苯扎氯銨模擬貼。將該模擬貼(約含苯扎氯銨20.0 mg)放入燒杯中，加適量水充分溶解，再轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，加水定容，充分搖勻，將其過濾，棄去初始50 mL濾液，準(zhǔn)確移取后續(xù)濾液10.00 mL置于50 mL容量瓶中，加水定容，充分搖勻待用，將此溶液作為待測(cè)溶液。平行操作8次得出結(jié)果，測(cè)得回收率在 97.60%～103.0%之間，平均回收率為101.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.62%， RSD不超過±5%，滿足分析工作需要。

2.5 樣品分析

取10片市售的邦迪創(chuàng)可貼(標(biāo)示量為每貼0.50 mg)，分別剪成碎片，置于小燒杯中，加適量水充分溶解，將溶液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，加水定容，充分搖勻，過濾待用。精密移取一定體積的濾液稀釋至所需要的溶液濃度，測(cè)定其共振光散射強(qiáng)度，平行測(cè)定6次，計(jì)算出創(chuàng)可貼中苯扎氯銨的含量和RSD，并且與高效液相色譜法(HPLC)[15]作比較，結(jié)果基本一致，結(jié)果見表2。

表2 樣品中苯扎氯銨含量的分析結(jié)果

3 結(jié) 論

在pH=8.40的Clark-Lubs緩沖溶液中，基于苯扎銨根陽離子與十二烷基苯磺酸根靜電結(jié)合形成離子締合物，引起反應(yīng)體系的共振光散射強(qiáng)度增強(qiáng)這一機(jī)理，建立了一種用于檢測(cè)苯扎氯銨的共振光散射光譜新方法，其檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm。研究結(jié)果表明，回收率為101.3%，RSD為1.62%，符合精細(xì)化工產(chǎn)品含量分析的要求，成功地應(yīng)用于邦迪中苯扎氯銨的檢測(cè)。相比傳統(tǒng)的方法，此方法具有高效便捷、選擇性好且成本低等優(yōu)勢(shì)。