郝一影

(河南省化工研究所有限責任公司，河南 鄭州 450052)

克百威是一種氨基甲酸酯類高毒性的殺蟲劑，具有高效、廣譜、殘留低、持效期較長的特點，可通過內(nèi)吸、觸殺、胃毒多種致毒方式達到目的，同時還有一定的殺卵作用；既適用于防治多種大豆、水稻、棉花、煙草等作物上的害蟲，也可以作為專門的種子處理劑使用[1]。噻蟲嗪是一種全新結構的殺蟲劑，屬于第二代煙堿類，具有高效低毒的特點，在推薦用量范圍下使用對作物安全、無藥害，可以用于果樹、稻類、豆類、煙草、油菜、向日葵等多種作物[2]。不僅可以直接用于種子和莖葉處理，還可以用來進行處理土壤[3]。對噻蟲嗪和克百威的分析方法多有報道，但目前噻蟲嗪·克百威種子處理懸浮劑還未見關于高效液相色譜的分析方法[4-6]。本文使用高效液相色譜法，使用反相C18柱對試樣中的噻蟲嗪和克百威進行定量分析，該方法操作簡便、分析速度快，精密度和準確度均符合分析要求，可以滿足常規(guī)分析和生產(chǎn)中的質(zhì)量控制。

1 實驗部分

1.1 試劑和溶液

試驗中的試劑和溶液如下：甲醇，色譜純；純凈水；標品有克百威(質(zhì)量分數(shù)≥98.3%)、噻蟲嗪(質(zhì)量分數(shù)≥98.5%)，標準品均由國家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心提供；噻蟲嗪·克百威種子處理懸浮劑，某公司提供。

1.2 儀器

試驗中的儀器如下：Agilent1200高效液相色譜儀；紫外檢測器； Caprisil-C18(5 μm，150 mm×4.5 mm ) 色譜柱；超聲波清洗器；過濾膜，0.45 μm。

1.3 色譜操作條件

室溫條件下，體積比55∶45的甲醇-水作流動相，以1.0 mL/min的流速進樣5 μL，在220 nm波長進行測試，各組分的保留時間分別為：噻蟲嗪約2.1 min，克百威約6.2 min，見圖1、圖2。

圖1 克百威和噻蟲嗪標準品液相色譜圖

圖2 噻蟲嗪·克百威懸浮種衣劑液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1標樣溶液的配制

稱取噻蟲嗪標準品0.030 g(精確至0.000 2 g)，克百威標準品0.018 g(精確至0.000 2 g)，置于同一50 mL容量瓶中，加入30 mL甲醇放置于超聲波清洗器中，超聲使其充分溶解，取出后冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻后靜置，備用。

1.4.2試樣溶液的配制

稱取0.60 g 樣品(精確至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，加入30 mL甲醇放置于超聲波清洗器中，超聲使其充分溶解，取出后冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻后靜置，過濾，備用。

1.4.3測定

在1.3所述條件下，當儀器基線運行平穩(wěn)后，標樣溶液被連續(xù)注入幾次，比較各次的特征色譜峰的保留時間和峰面積，如果相鄰兩針的保留時間和峰面積的變化均小于1.5%，那么可以進樣進行測定，測試按照標樣、試樣、試樣、標樣的順序進行。

1.5 計算

分別對測得的2針標準溶液和試樣溶液的各成分的特征峰的峰面積進行平均計算后，按下式計算噻蟲嗪、克百威的質(zhì)量分數(shù)(X)。

式中：A1，標樣溶液中噻蟲嗪(或克百威)峰面積的平均值；A2，試樣溶液中噻蟲嗪(或克百威)峰面積的平均值；m1，噻蟲嗪(或克百威)標樣的質(zhì)量，g；m2，試樣的質(zhì)量，g；P，標樣中噻蟲嗪(或克百威)質(zhì)量分數(shù)，%。

2 結果分析

2.1 流動相的選擇

為了實現(xiàn)噻蟲嗪和克百威的有效分離，分別使用甲醇-水、乙腈-水作為流動相進行試驗，其中乙腈-水作為流動相時噻蟲嗪的峰形對稱性差，故流動相選擇甲醇-水。對不同比例的甲醇-水對分離效果的影響進行試驗，分別為80∶20、65∶35、55∶45、40∶60。結果表明：當流動相中甲醇比例過高時，流出時間過短，甲醇比例低時，克百威的保留時間較長，綜合考慮選擇體積比55∶45為試驗流動相。此時噻蟲嗪和克百威保留時間適中，峰形對稱，分離效果好，可以滿足分析要求。

2.2 檢測波長的選擇

通過Agilent 1200高效液相色譜儀的紫外光譜采集功能，經(jīng)紫外光譜掃描噻蟲嗪在215、250 nm左右均有很好的吸收，克百威在210 nm有最大的吸收峰，考慮低波長時試劑的干擾較大，經(jīng)優(yōu)化試驗，采用220 nm為檢測波長。

2.3 線性關系的測定

分別稱取噻蟲嗪標準品0.030 4 g、克百威標準品0.018 4 g置于同一50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容后，用移液管分別準確移取2.0、5.0、10.0、15.0 mL于20 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容后進行測定。測試結果被繪制成標準曲線，如圖3、圖4所示，其中橫坐標表示各成分的進樣濃度，縱坐標表示其特征峰的峰面積。各有效成分的線性回歸方程分別為：噻蟲嗪y=11 020x+17.419，相關系數(shù)為0.999 9；克百威y=8 471.5x-38.873，相關系數(shù)為0.999 3。

圖3 噻蟲嗪標準曲線

圖4 克百威標準曲線

2.4 方法精密度測定

按1.3所述操作條件對同一樣品進行平行試驗，測定5次。測定結果如表1所示，噻蟲嗪、克百威的標準偏差分別為0.024、0.023，變異系數(shù)分別為0.44%、0.88%。

2.5 方法準確度測定

一定量的標準品被添加到樣品(含量已知)中后，在1.3所述條件下測試，測定結果如表2所示。

表1 精密度的測定結果

測得噻蟲嗪的回收率為99.84%～100.06%，平均回收率為99.92%；克百威的回收率為99.64%～100.07%，平均回收率為99.85%。

表2 回收率的試驗測定結果

3 結論

通過試驗表明，本方法能夠滿足定量分析的要求，準確快速地對噻蟲嗪·克百威種子處理懸浮劑進行含量測試。