王麗梅， 何紹港， 龍析宇， 路 通， 周海盟， 何玉華， 孫學釗

(1. 吉林農(nóng)業(yè)科技學院 反芻動物精準營養(yǎng)及智慧養(yǎng)殖科技創(chuàng)新中心， 吉林左家132109 ; 2.吉林省反芻動物精準營養(yǎng)與智慧生態(tài)養(yǎng)殖跨區(qū)域合作科技創(chuàng)新中心， 吉林左家132109)

鹿胎是從懷孕母鹿腹中取出的整個子宮，里面包括成形小鹿，連同胎衣、羊水，以酒浸，整形，烘烤，風干即為鹿胎[1]。將鹿胎以煎煮，焙炒，粉碎，加紅糖熬制，即為鹿胎膏。鹿胎是非常珍貴的藥材，鹿胎中所含的營養(yǎng)成分較多，富含蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、雌激素、維生素、礦物質(zhì)等，所含有的賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸，而且氨基酸成分與人胎盤相近[2]，能夠補氣、補血，具有調(diào)理內(nèi)分泌的功效，對婦女經(jīng)期紊亂、宮冷難孕等癥有很好的療效[1]。

本試驗將不同水平的鹿胎蛋白對小鼠進行灌服，觀測其對小鼠的生長性能、生殖器官指數(shù)、血清性激素水平、抗炎因子的影響，探討梅花鹿胎盤在小鼠上應用的效果，為梅花鹿胎盤產(chǎn)品的開發(fā)奠定基礎，為梅花鹿胎盤的藥用功能提供更加精準的數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 梅花鹿鹿胎干粉，購自吉林吉春制藥股份有限公司。IgG、IgA、IgM試劑盒，購自南京建成生物工程研究所。

1.2 實驗動物及飼養(yǎng)管理 選擇100只體重為(20±2) g 的4周齡清潔級昆明雌性小鼠，購自江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責任公司。飼養(yǎng)室溫度為25 ℃，濕度為30%～45%，自由采食和飲水。

1.3 試驗儀器 懸掛式小鼠籠(HL-XG，合力科創(chuàng))、小鼠籠架(HL-XG，合力科創(chuàng))、小鼠用耳標、耳號鉗(ST101，美國 CLARKBIO)、手術剪(9.5 cm直頭，上海紅尊醫(yī)療器械有限公司)、采血管(10 mL，泰州民健醫(yī)療器械有限公司)、手術刀、移液器等實驗室常用器械。

1.4 試驗設計 將100只小鼠隨機分成A、B、C、D、E共5組，每組20 只，A組作為對照組，B、C、D、E為試驗組，用鹿胎粉對小鼠灌服，劑量分別為0 mg/(kg·bw)、20 mg/(kg·bw)、40 mg/(kg·bw)、80 mg/(kg·bw)、 160 mg/(kg·bw)，連續(xù)灌服21 d。

1.5 測定指標及方法

1.5.1 血清生化指標 試驗結束的最后1天早上6：00，每組隨機取4只小鼠進行摘眼球釆血，采完之后將采血管在4 ℃冰箱中過夜，于第2天3 000 r/min離心5 min，然后用移液器吸取血清裝在1.5 mL的離心管中，于-20 ℃的條件下保存。

免疫球蛋白的測定：IgG、IgA、IgM的測定用試劑盒(免疫透射比濁法)，操作步驟完全按試劑盒說明書進行。

1.5.2 器官指數(shù) 試驗結束的最后1天早上8：00頸椎脫臼處死小鼠，然后馬上解剖并釆集胸腺、脾臟、肝臟，剔除其上面的結締組織及脂肪組織后稱量重量，分別計算各個器官的指數(shù)。

器官指數(shù)(mg/g)=器官重/體重

1.5.3 肝臟抗氧化功能 取小鼠的肝臟，按文獻方法測定超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量[3]。

1.6 數(shù)據(jù)分析 所得數(shù)據(jù)采用平均值±標準誤來表示，數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析用 SPSS 20.0 軟件處理。

2 結果

2.1 鹿胎粉對小鼠免疫器官指數(shù)的影響 從表1可知，灌服鹿胎粉后，胸腺指數(shù)升高，D組、E組與其他各組相比差異顯著(P<0.05)；胸臟指數(shù)先升高后降低，C組最高且與其他各組相比差異顯著(P<0.05)；肝臟指數(shù)無顯著變化。

表1 鹿胎粉對小鼠免疫器官指數(shù)的影響Table 1 Effect of deer fetal powder on immune organ index of mice (mg/g)

2.2 鹿胎粉對小鼠血清免疫球蛋白的影響 從表2可知，灌服鹿胎粉后血清中的IgG、IgA、IgM含量呈現(xiàn)升高的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。

2.3 鹿胎粉對小鼠肝臟抗氧化功能的影響 從表3可知，小鼠肝臟中SOD、CAT、GSH-Px的活性逐漸升高，E組最高，與其對照組相比差異顯著(P<0.05)；MDA的含量逐漸降低，D組、E組最低，與其他各組相比差異顯著(P<0.05)。

表2 鹿胎粉對小鼠血清免疫球蛋白的影響Table 2 Effect of fetal powder on serum immunoglobulin of mice (g/L)

表3 鹿胎粉對小鼠肝臟抗氧化功能的影響Table 3 Effect of deer fetal powder on antioxidant function of mouse liver

3 討論

3.1 鹿胎粉對小鼠免疫功能的影響 胸腺和脾臟是動物體的免疫器官，其指數(shù)的高低體現(xiàn)了動物機體免疫機能的強弱[4]。IgG、IgA、IgM是主要的免疫球蛋白，血清中IgG、IgA、IgM的水平反應動物機體的免疫力和抵抗疾病的能力[5]。本試驗灌服鹿胎粉后，胸腺指數(shù)升高，D組、E組與A組、B組、C組相比差異顯著(P<0.05)；脾臟指數(shù)升高，C組最高且與其余各組相比差異顯著(P<0.05)；肝臟指數(shù)無顯著變化。血清中的IgG、IgA、IgM含量呈現(xiàn)升高的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。

趙國財?shù)萚6]給老年雌性大鼠的飲用水中添加鹿胎制劑，結果表明，鹿胎制劑能夠提高老年雌性大鼠血清中的總蛋白含量，提高了其免疫功能。魏力等[7-8]的研究表明，鹿胎制劑對足趾腫脹炎性模型大鼠、腹腔滲出性炎性模型小鼠具有一定的抗炎作用；鹿胎膠囊與軟膠囊可有效緩解小鼠炎性疼痛與痛經(jīng)性疼痛反應，且不影響投藥小鼠子宮組織的病理學改變。冷愛晶等[9]用鹿胎顆粒治療痛經(jīng)84例的結果表明，以鹿胎為主要原料的鹿胎顆?？梢栽鰪婓w質(zhì)，對內(nèi)分泌具有調(diào)節(jié)功能，并且可增強機體的免疫力。

3.2 鹿胎粉對小鼠抗氧化功能的影響 MDA是膜脂過氧化過程中最重要的產(chǎn)物之一，它的產(chǎn)生可以加劇膜的損傷，所以在抗性生理和衰老生理的研究方面，MDA的含量是一個非常重要的指標[10]。SOD可以清除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的過氧化的產(chǎn)物[11]。對人體不斷地補充SOD具有抗衰老的特殊效果。CAT的作用是使過氧化氫還原成水。GSH-Px是機體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化過氧化氫分解的酶。

以鹿胎為核心成分的制劑具有抗衰老、抗氧化、活血化瘀等功效[1]。我國應用鹿胎作為中藥治療疾病已有很長歷史[12]。本試驗的結果顯示，小鼠肝臟中SOD、CAT、GSH-Px的活性逐漸升高，E組最高，與其對照組相比差異顯著(P<0.05)；MDA的含量逐漸降低，D組、E組最低，與其他各組相比差異顯著(P<0.05)。

孫蘭等[13]的研究結果表明，以馬鹿胎為主的沖擊可以清除雄果蠅血清的過氧化物自由基，能夠延緩衰老。孫德珍等[14]的研究表明，鹿胎口服液也具有抗氧化的作用。金巖等[15]用鹿胎膏治療圍絕經(jīng)期失眠癥32 例的結果表明，鹿胎膏對失眠有一定的治療效果。鄒興淮等[16]的研究表明，鹿胎及胎盤制劑通過降低老年雄性大鼠腦和肝臟中單胺氧化酶活性對老年雄性大鼠具有延緩衰老的作用。