中國禽流感的防控措施與經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)

近幾十年來，多種亞型（H9N2、H5N1、H7N9）禽流感病毒（AIV）在我國廣泛傳播，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，對(duì)公眾健康也構(gòu)成了相當(dāng)大的威脅。本文分析了AIV 在我國持續(xù)存在的原因，闡述了我國采取的控制措施，并總結(jié)了經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)。

AIV 在我國的流行源于根深蒂固的生態(tài)系統(tǒng)特征和社會(huì)經(jīng)濟(jì)特征。在過去30 年中，我國的家禽數(shù)量增加了10倍，但生物安全防護(hù)卻相對(duì)滯后，且更多家禽和野鳥受到AIV感染，進(jìn)一步增加了我國AIV傳播的風(fēng)險(xiǎn)。為了控制AIV，中國政府主要采取了三種控制策略：撲殺感染禽類、大規(guī)模疫苗接種和提高生物安全水平。由于撲殺和提高生物安全水平都無法阻止AIV 傳播，因此，大規(guī)模疫苗接種是抑制AIV傳播最有效的方法，目前已在我國取得較好的防控效果。

在過去的30年里，AIV在中國傳播的風(fēng)險(xiǎn)大大增加，但由于生態(tài)系統(tǒng)和社會(huì)經(jīng)濟(jì)特征的變化，預(yù)計(jì)在未來幾十年內(nèi)會(huì)顯著降低。我國實(shí)施的撲殺感染禽類和大規(guī)模疫苗接種成功控制了禽流感疫情，減少了經(jīng)濟(jì)損失及人類感染風(fēng)險(xiǎn)。本文的研究成果將有助于將來更好地控制AIV在中國及全球的傳播。

H7亞型禽流感病毒重組酶介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法的建立

H7亞型禽流感病毒感染是亞洲一些國家新興的人畜共患病，也是全球范圍內(nèi)重要的禽類疫病。在疫病暴發(fā)期間，需要一種快速而簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法來確認(rèn)疑似病例的感染狀況?；诖四康?，本研究建立了H7亞型禽流感病毒重組酶介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（RT-RAA）檢測(cè)方法，該方法在單溫度（39℃）下反應(yīng)20 min，即可獲得檢測(cè)結(jié)果。

結(jié)果顯示，該方法與影響禽類的主要呼吸道病毒—新城疫病毒和傳染性支氣管炎病毒均無交叉反應(yīng)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，該方法的檢測(cè)靈敏度為102個(gè)RNA拷貝/反應(yīng)，特異性為100%。通過檢測(cè)342 份臨床禽源樣本，該方法與已發(fā)表的熒光RT-PCR 法K 值為0.988（p＜0.001），靈敏度為100%（95%CI，90.40%～100%），特異性為99.96%（95%CI，97.83%～99.98%）。以上結(jié)果表明，本試驗(yàn)建立的RT-RAA方法是檢測(cè)H7亞型禽流感病毒的有力工具。

H7N9禽流感病毒血凝素優(yōu)勢(shì)非中和表位的鑒定

H7N9 禽流感疫苗可誘導(dǎo)高水平的抗血凝素（HA）非中和（nonNeu）抗體。然而，誘導(dǎo)這種特殊抗體反應(yīng)的抗原表位尚不明確。本研究制備了13株抗H7N9病毒HA蛋白的單克隆抗體，其中12株無血凝抑制和病毒中和活性。

利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和噬菌體展示隨機(jī)肽庫篩選技術(shù)，研究人員發(fā)現(xiàn)了3株單克隆抗體識(shí)別的線性表位373-TAA-375和1株單克隆抗體識(shí)別的構(gòu)象表位220Q-225S-227G。競(jìng)爭(zhēng)ELISA結(jié)果顯示，220Q-225S-227G表位在誘導(dǎo)nonNeu 抗體中具有免疫優(yōu)勢(shì)。此外，373-TAA-375表位在H1-H17亞型中是保守的，識(shí)別該表位的單克隆抗體與不同亞型病毒均表現(xiàn)出交叉反應(yīng)。

本研究成果為H7N9 疫苗的抗體免疫提供了全新的分子基礎(chǔ)，并為疫苗的設(shè)計(jì)和改造提供了有益啟示。

H9N2 型禽流感病毒受體結(jié)合偏好和人畜共患潛力的遺傳決定因素

受體識(shí)別與結(jié)合是病毒感染的第一步，也是決定宿主特異性的關(guān)鍵因素。禽流感病毒不能有效地結(jié)合類人唾液酸受體是其無法在人體內(nèi)有效傳播和流行的主要原因。H9N2 型禽流感病毒在亞洲和非洲部分地區(qū)的家禽中流行，偶爾會(huì)感染人類，因此被認(rèn)為是具有人畜共患病潛力的病毒。本研究采用基因突變方法，通過改變H9血凝素中的單個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)，然后用生物膜層反射光干涉技術(shù)測(cè)試突變后的病毒與禽和人類受體類似物的結(jié)合情況。

經(jīng)過試驗(yàn)，科研人員確定了H9N2 的偏好結(jié)合位點(diǎn)，分別是起決定性作用的190、226和227位氨基酸及作用相對(duì)較小的位點(diǎn)159、188、193、196、198 和225。此外，135、137、147、157、158、184、188和192位氨基酸變化也可以調(diào)節(jié)病毒受體的親和力。

本文研究成果將有助于指導(dǎo)未來的H9N2監(jiān)測(cè)工作，并促進(jìn)人類了解具有更大人畜共患病潛力的禽流感病毒。

一株誘導(dǎo)快速免疫的廣譜HVT-H5禽流感病毒載體疫苗

目前，應(yīng)對(duì)家禽中高致病性禽流感（HPAI）暴發(fā)的主要方法是撲殺和預(yù)防性撲殺，但這會(huì)導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失。緊急疫苗接種可以作為一種替代方案，防止疫情擴(kuò)散。目前常規(guī)的禽流感滅活疫苗不具備大規(guī)模適用性，也無法實(shí)現(xiàn)快速免疫。本文旨在進(jìn)一步研究火雞皰疹病毒（HVT）作為含有HPAI H5N1 重組H5 血凝素載體疫苗的潛力。

結(jié)果顯示，HVT-H5疫苗在SPF蛋雞接種后2周，可對(duì)其提供4 株不同HPAI H5N1 毒株的完全保護(hù)效力。HVT-H5疫苗在接種后3周可誘導(dǎo)3周齡SPF蛋雞對(duì)11株HPAI H5N1 菌株和HPAI H5N8 A/ch/Neth/14015531/2014株產(chǎn)生高滴度保護(hù)性抗體（≥4）。除了誘導(dǎo)保護(hù)性抗體應(yīng)答外，HVT-H5還可誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞反應(yīng)。

以上數(shù)據(jù)表明，HVT-H5疫苗符合理想禽流感疫苗標(biāo)準(zhǔn)，可能是對(duì)抗全球禽流感暴發(fā)的有用工具?！?/p>