高文博

（廣州血液中心檢驗(yàn)科 廣東 廣州 510000）

核酸檢測技術(shù)和酶免檢測技術(shù)相比，具有更高的敏感性和特異性，能夠顯著縮短病原體檢出的“窗口期”[1]，從而可降低輸血?dú)堄囡L(fēng)險(xiǎn)[2]，對提高血液質(zhì)量和保障臨床用血安全具有重要意義。但是核酸檢測儀器自動化程度高，檢測成本高，檢測無效結(jié)果的出現(xiàn)不僅造成了試劑的浪費(fèi)，也會影響檢驗(yàn)結(jié)果的發(fā)布。因此本文通過回顧并分析本實(shí)驗(yàn)室2018 年7 月—2018 年9 月Procleix Panther System 和Procleix Tigris System 兩種核酸檢測系統(tǒng)陽性結(jié)果和無效結(jié)果，以進(jìn)一步提高核酸檢測性能，完善血站質(zhì)量體系。

1.材料與方法

1.1 標(biāo)本準(zhǔn)備

5mL EDTA-K2抗凝真空試管（帶分離膠），采集后4h內(nèi)（1600g，12min）離心，分離血漿，嚴(yán)格按標(biāo)本處理程序操作。

1.2 儀器與試劑

Procleix Panther System 全自動核酸檢測系統(tǒng)（美國諾華公司）3 臺；Procleix Tigris System 全自動核酸檢測系統(tǒng)（美國諾華公司）2 臺；使用配套Procleix Ultrio Elite Assay 聯(lián)檢試劑（美國諾華公司）；臺式離心機(jī)（北京白洋）。

1.3 方法與數(shù)據(jù)來源

Panther 和Tigris 核酸檢測系統(tǒng)均采用轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的核酸擴(kuò)增技術(shù)（transcription mediated amplification，TMA）原理，對2018-07-01—2018-9-30 的獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行HBV DNA/HCV RNA/HIV RNA病毒核酸3項(xiàng)聯(lián)檢初篩，如結(jié)果呈反應(yīng)性，則判定為陽性。

查詢本實(shí)驗(yàn)室每臺Panther 和Tigris 儀器上標(biāo)本檢測情況，記錄陽性標(biāo)本數(shù)、無效測試數(shù)和總測試數(shù)。

1.4 分析Panther 和Tigris 兩套核酸檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果

計(jì)算公式：聯(lián)檢陽性率=（聯(lián)檢反應(yīng)性標(biāo)本數(shù)÷總檢測標(biāo)本數(shù)）×100%；無效檢測率=（無效檢測結(jié)果數(shù)÷總測試數(shù)）×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 2 套核酸檢測系統(tǒng)聯(lián)檢陽性率比較

Panther 和Tigris 聯(lián)檢陽性率分別為0.87%和1.16%，聯(lián)檢陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），結(jié)果見表1。

表1 2 套核酸檢測系統(tǒng)聯(lián)檢陽性率比較

2.2 2 套核酸檢測系統(tǒng)無效率比較

Panther 和Tigris 無效率分別為0.58%和2.31%，無效率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），結(jié)果見表2。

表2 2 套核酸檢測系統(tǒng)無效率比較

3.討論

由結(jié)果可以看出，Tigris 系統(tǒng)的聯(lián)檢陽性率高于Panther系統(tǒng)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01。由于Panther 和Tigris 兩種檢測系統(tǒng)均為TMA 原理且本實(shí)驗(yàn)室按照ISO15189對兩套設(shè)備進(jìn)行性能驗(yàn)證，理論上兩臺設(shè)備性能相當(dāng)，故分析Panther 和Tigris 兩種檢測系統(tǒng)陽性率不同，考慮有可能是由標(biāo)本群差異造成的。Panther 系統(tǒng)加樣靈活且檢測用時(shí)較短，所以多用于機(jī)采血小板的檢測。機(jī)采血小板獻(xiàn)血員多為固定重復(fù)獻(xiàn)血者，血液安全相對高于普通的初次獻(xiàn)血者。同時(shí)擴(kuò)大檢測標(biāo)本量來進(jìn)一步觀察也很有必要。

表2顯示Panther和Tigris的無效率分別為0.58%和2.31%，且兩者之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01。其中Panther 檢測系統(tǒng)無效率低于天津[3]和浙江[4]的報(bào)道，應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大檢測的標(biāo)本量來觀察分析。值得一提的是，Tigris 的無效率雖介于相關(guān)報(bào)道之間[3,4]，但高于本實(shí)驗(yàn)室早期報(bào)道的2014 年的無效率[5]，觀察具體無效報(bào)警情況發(fā)現(xiàn)，Tigris 核酸檢測系統(tǒng)無效率高主要是由于兩次硬件故障引起列表（worklist）前面的質(zhì)控（control）加樣失敗，從而整個(gè)worklist 無效造成的。分析原因，一是Panther 檢測系統(tǒng)加樣靈活，沒有完全worklist的概念，只要不是儀器致命性錯(cuò)誤，worklist 會繼續(xù)進(jìn)行，而Tigris 核酸檢測系統(tǒng)worklist 概念強(qiáng)，如果前面的control無效，那么整個(gè)worklist 均無效。二是考慮到Tigris 核酸檢測系統(tǒng)是本實(shí)驗(yàn)室最早引進(jìn)的檢測系統(tǒng)，從2010 年至2018 年已投入使用八年，雖然儀器一直有廠家工程師維護(hù)且按時(shí)進(jìn)行保養(yǎng)，但儀器有不同程度的損耗，故而發(fā)生洗站堵塞等硬件問題相對較多，一旦發(fā)生在worklist 前面的control 部分，就會造成整個(gè)worklist 無效。這也提醒我們在進(jìn)行標(biāo)本質(zhì)量管理和檢測人員培訓(xùn)的同時(shí)，儀器硬件故障引起的無效也是不容忽視的，所以定期對儀器進(jìn)行更新?lián)Q代，也是很有必要的?？紤]到Panther 檢測系統(tǒng)加樣靈活、檢測用時(shí)短的優(yōu)勢，故本實(shí)驗(yàn)室于2018 年8 月Panther 檢測系統(tǒng)開始逐步取代Tigris 檢測系統(tǒng)。