河南省開封市傳染病醫(yī)院（475000）于天威

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取我院經(jīng)肝穿刺活檢取不同病變肝組織標(biāo)本108例（2016年9月～2019年5月），術(shù)前均為實(shí)施放化療治療。其中35例HCC標(biāo)本（28例合并肝硬化），12例膽管細(xì)胞癌標(biāo)本，6例肝臟異型增生結(jié)節(jié)標(biāo)本（4例低級(jí)別、2例高級(jí)別），6例肝腺瘤標(biāo)本，6例肝局灶增生結(jié)節(jié)標(biāo)本，30例肝硬化組織標(biāo)本，13例正常肝組織標(biāo)本。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批同意。

1.2 方法 ①標(biāo)本處理 108例標(biāo)本均經(jīng)甲醛溶液（40g/L）固定，石蠟包埋，連續(xù)切片（厚度為4μm），其中1張切片行-蘇木精-伊紅染色，剩余切片均應(yīng)用免疫組化檢測。②ATAD2檢測 切片通過脫蠟、水化后以免疫組化PV6000法實(shí)施檢測，試劑盒購自英國Abcam公司：應(yīng)用過氧化氫（體積分為0.03）清除內(nèi)源酶，并以乙二胺四乙酸（1mmol/L）實(shí)施高壓熱抗原修復(fù)（pH值為8.0），自然冷卻，磷酸鹽緩沖液沖洗2次，滴加一抗（4℃）過夜，后滴加二抗（37℃），孵育20min，磷酸鹽緩沖液沖洗，氨基聯(lián)苯胺顯色劑顯色，蘇木精再次染色，中性樹膠封片。

1.3 觀察指標(biāo) ①不同病變肝組織中ATAD2表達(dá)。②ATAD2在HCC中表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（±s）表示、t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同病變肝組織中ATAD2表達(dá) 35例HCC標(biāo)本中32例ATAD2呈高表達(dá)狀態(tài)，平均表達(dá)量為（24.90±11.11）%；12例膽管細(xì)胞癌標(biāo)本中10例ATAD2呈高表達(dá)狀態(tài)，平均表達(dá)量為（21.39±9.85）%；2例高級(jí)別肝臟異型增生結(jié)節(jié)標(biāo)本ATAD2呈低表達(dá)狀態(tài)，平均表達(dá)量為（1.04±0.35）%；4例低級(jí)別肝臟異型增生結(jié)節(jié)標(biāo)本、6例肝腺瘤標(biāo)本、6例肝局灶增生結(jié)節(jié)標(biāo)本、30例肝硬化組織標(biāo)本及13例正常肝組織標(biāo)本中ATAD2均不表達(dá)。HCC標(biāo)本ATAD2平均表達(dá)量較高級(jí)別肝臟異型增生結(jié)節(jié)標(biāo)本高（t=29.916，P＜0.001）。

2.2 ATAD2在HCC中表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系 不同血清甲胎蛋白（AFP）水平、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）性質(zhì)、是否合并肝硬化ATAD2平均表達(dá)量存在顯著差異（P＜0.05），見附表。

附表 ATAD2在HCC中表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系（±s）

臨床病理特征 n ATAD2平均表達(dá)量（%） t P性別 男 30 26.30±11.57 1.855 0.073女 5 16.50±4.03 AFP（ng/ml） ≤20 18 18.92±5.34 4.272 ＜0.001＞20 17 31.23±10.93 HBsAg 陰性 6 11.52±3.65 3.425 0.002陽性 29 27.67±11.31合并肝硬化 是 28 27.69±11.52 3.077 0.004否 7 13.74±6.00遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 是 4 16.49±5.73 1.678 0.103否 31 25.99±11.03病理分級(jí) Ⅰ～Ⅱ 22 23.20±11.44 1.175 0.249Ⅲ～Ⅳ 13 27.78±10.61

3 討論

HCC發(fā)生、進(jìn)展與肝細(xì)胞異型增生密切相關(guān)。ATAD2作為三磷酸腺苷（ATP）家族成員之一，包含ATP溴結(jié)構(gòu)域、酶結(jié)構(gòu)域，可與雌激素受體α、雄激素受體聯(lián)合，發(fā)揮強(qiáng)效協(xié)同作用。另外，相關(guān)報(bào)道指出，ATAD2高表達(dá)可加快宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移過程，且ATAD2高表達(dá)與HCC、結(jié)直腸癌等預(yù)后不良存在明顯關(guān)聯(lián)性[1]。同時(shí)王文青等[2]發(fā)現(xiàn)，ATAD2水平在肝門部膽管癌中呈特異性高表達(dá)狀態(tài)。而本研究發(fā)現(xiàn)，HBsAg陽性HCC患者ATAD2平均表達(dá)量較HBsAg陰性高（P＜0.05）。提示ATAD2在HCC病情進(jìn)展中具有顯著促進(jìn)作用，可加快細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化進(jìn)程。此外，本研究數(shù)據(jù)還發(fā)現(xiàn)，不同血清AFP水平、是否合并肝硬化ATAD2平均表達(dá)量存在顯著差異（P＜0.05）。說明乙型肝炎病毒感染所致慢性肝炎、肝硬化一定程度可誘發(fā)HCC，有助于為臨床早期診斷HCC提供循證數(shù)據(jù)支持。

綜上可知，ATAD2在HCC病情進(jìn)展中具有顯著促進(jìn)作用，可加快細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化進(jìn)程，為臨床早期診斷HCC提供循證數(shù)據(jù)支持。