孫婷麗

【摘要】 目的 分析蛹蟲(chóng)草在治療慢性腎臟病（CKD）方面的分子機(jī)制。方法 98例CKD患者， 將所有患者隨機(jī)分為蛹蟲(chóng)草組（服用蛹蟲(chóng)草100 mg/d， 為期3個(gè)月）和對(duì)照組（每日服用等量淀粉作安慰劑， 為期3個(gè)月）， 每組49例。比較兩組患者治療前后腎功能指標(biāo)[尿蛋白、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）]、血脂指標(biāo)[血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）]、氧化還原特征指標(biāo)[血清胱抑素C（Cys-C）、髓過(guò)氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）]水平。結(jié)果 治療3個(gè)月后， 蛹蟲(chóng)草組尿蛋白、BUN、Cr水平分別為（1.36±0.45）g/24 h、（8.84±2.36）mmol/L、（149.1±25.5）μmol/L， 均低于對(duì)照組的（2.65±0.73）g/24 h、（9.72±2.38）mmol/L、（204.0±31.8）μmol/L， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療3個(gè)月后， 蛹蟲(chóng)草組TC、TG、LDL-C分別為（4.9±0.5）、（2.0±0.6）、（1.7±0.5）mmol/L， 均低于對(duì)照組的（5.9±0.7）、（2.4±0.9）、（2.2±0.6）mmol/L， HDL-C水平（1.9±0.5）mmol/L高于對(duì)照組的（1.7±0.5）mmol/L， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。蛹蟲(chóng)草組Cys-C、MPO、MDA水平分別為（0.8±0.2）mg/L、（14.5±3.4）mg/L、（5.4±1.9）mmol/L，?均低于對(duì)照組的（1.0±0.3）mg/L、（23.3±4.3）mg/L、（8.1±2.5）mmol/L， NO（6.8±2.5）μmol/L、SOD（698.4±145.6）U/L均高于對(duì)照組的（5.8±2.1）μmol/L、（521.4±123.8）U/L， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 蛹蟲(chóng)草可通過(guò)影響脂質(zhì)和氧化還原信號(hào)傳導(dǎo)途徑對(duì)CKD起保護(hù)作用， 為目前評(píng)估蟲(chóng)草素對(duì)抑制CKD的臨床試驗(yàn)提供了進(jìn)一步的支持。

【關(guān)鍵詞】 蛹蟲(chóng)草;慢性腎臟病;氧化還原

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.32.002

【Abstract】 Objective? ?To analyze the molecular mechanism of Cordyceps militaris in the treatment of chronic kidney disease （CKD）. Methods? ?A total of 98 CKD patients were randomly divided into Cordyceps militaris group （taking Cordyceps militaris 100 mg/d for 3 months） and control group （taking the same amount of starch as a placebo daily for 3 months）， with 49 cases in each group. The renal function [urinary protein， blood urea nitrogen （BUN）， creatinine （Cr）]， blood lipids [serum total cholesterol （TC）， triglycerides （TG）， low density lipoprotein cholesterol （LDL- C）， high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）]， redox characteristics [serum cystatin C （Cys-C）， myeloperoxidase （MPO）， malondialdehyde （MDA）， nitric oxide （NO）， superoxide dismutase （SOD）] levels before and after treatment were compared between the two groups. Results? ?3 months after treatment， the urine protein， BUN， Cr levels of Cordyceps militaris group were （1.36±0.45） g/24 h， （8.84±2.36） mmol/L?and （149.1±25.5） μmol/L， which were all lower than （2.65±0.73） g/24 h， （9.72±2.38） mmol/L and （204.0±31.8） μmol/L of the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. 3 months after treatment， TC， TG and LDL-C of Cordyceps militaris group were （4.9±0.5）， （2.0±0.6） and （1.7±0.5） mmol/L， which were all lower than （5.9±0.7）， （2.4±0.9） and （2.2±0.6） mmol/L of the control group， and HDL-C （1.9±0.5） mmol/L was higher than （1.7±0.5） mmol/L of the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Cys-C （0.8±0.2） mg/L， MPO （14.5±3.4） mg/L and MDA （5.4±1.9） mmol/L of Cordyceps militaris group were lower than （1.0±0.3） mg/L， （23.3±4.3） mg/L and （8.1±2.5） mmol/L of the control group， and NO （6.8±2.5） μmol/L and SOD （698.4±145.6） U/L were higher than （5.8±2.1） μmol/L and （521.4±123.8） U/L of the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion? ?Cordyceps militaris can protect CKD by affecting lipid and redox signal transduction pathway. It provides further support for the evaluation of cordycepin to inhibit CKD clinical trials.

【Key words】 Cordyceps militaris; Chronic kidney disease; Redox

CKD通常由感染、毒素和自身免疫性疾病引起， 對(duì)公共健康構(gòu)成重大威脅[1]。CKD累及腎小球、腎小管以及腎小球和小管周?chē)拈g質(zhì)組織。CKD常因高水平炎癥細(xì)胞破壞腎小球結(jié)構(gòu)而導(dǎo)致腎小球損傷， 結(jié)果會(huì)阻止血液流動(dòng)， 導(dǎo)致排尿量減少和尿毒毒素的積累。隨后， 受損的腎小球會(huì)釋放出紅細(xì)胞， 從而發(fā)生血尿。目前， 治療CKD的方法有很多種， 包括降糖、降壓、控制尿蛋白， 但治療費(fèi)用高、副作用明顯、耗時(shí)持久、且療效欠佳。此外， CKD的治療還受到一些禁忌證的限制， 因此， 探索新的副作用較小的抗CKD藥物勢(shì)在必行。蛹蟲(chóng)草及其特有成分蟲(chóng)草素具有保健作用（包括抗炎、抗癌、抗糖尿病和抗肥胖）因而受到廣泛關(guān)注[2]。據(jù)報(bào)道， 蟲(chóng)草素具抗糖尿病和調(diào)節(jié)腎上腺的功能， 然而， 對(duì)CKD保護(hù)作用的確切分子機(jī)制尚不明確。CysC、MPO、MDA、NO、SOD參與氧化還原系統(tǒng)并影響腎臟疾病， 脂質(zhì)和氧化還原活性在CKD治療中起重要作用， 因此， 本研究檢測(cè)相關(guān)生物標(biāo)記物和化學(xué)指標(biāo)， 以此探討蛹蟲(chóng)草在治療CKD方面的作用。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年3月～2016年6月本院收治的98例CKD患者， 其中男57例， 女41例， 年齡33～60歲。所有患者均被診斷為CKD 3期或4期（eGFR為25～40 ml/min）。將所有患者隨機(jī)分為蛹蟲(chóng)草組（服用蛹蟲(chóng)草100 mg/d， 為期3個(gè)月）和對(duì)照組（每日服用等量淀粉作安慰劑， 為期3個(gè)月）， 每組49例。兩組一般資料比較， 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。見(jiàn)表1。蛹蟲(chóng)草膠囊（上海泛亞生物醫(yī)藥集團(tuán)有限公司）， 推薦成人服用劑量為100 mg/d。本研究所有程序均經(jīng)大慶油田總醫(yī)院人體研究倫理委員會(huì)（CCT02368）批準(zhǔn)。這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)是根據(jù)世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言進(jìn)行的。所有患者均簽署了同意書(shū)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①尿蛋白>1 g/24 h;②血壓<150/95 mm Hg;③甲狀旁腺激素（PTH）<100 pg/ml;④病情穩(wěn)定;⑤簽署書(shū)面知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①在12個(gè)月內(nèi)服用硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、霉酚酸酯或環(huán)磷酰胺;②服用鈣粘合劑或補(bǔ)充劑、維生素D或磷酸鹽粘合劑;③曾進(jìn)行過(guò)腎血栓微血管成形術(shù)， 妊娠， 既往惡性腫瘤和糖尿病;④預(yù)期依從性低。

1. 2 方法

1. 2. 1 腎功能檢測(cè) 采用尿液分析儀（Beckman Coulter Inc.）測(cè)定患者尿液中的尿蛋白， 采用血尿素氮（BUN）檢測(cè)試劑盒（StressMarq Biosciences）測(cè)定BUN以確定腎功能狀況。BUN是一種廢物， 可從腎臟濾除， 通過(guò)尿液從體內(nèi)排出， 其水平的升高被認(rèn)為與CKD相關(guān);肌酐是肌肉代謝產(chǎn)生的化學(xué)廢物， 是腎功能的可靠生物標(biāo)志物[3， 4]。使用試劑盒（恩佐生命科學(xué)）測(cè)量血肌酐。在治療開(kāi)始前和治療3個(gè)月后使用腎臟疾病飲食調(diào)整研究中的公式計(jì)算eGFR。

1. 2. 2 生化指標(biāo)檢測(cè) 使用免疫測(cè)定法（北京化學(xué)生物技術(shù)有限公司）測(cè)定TG。使用自動(dòng)配對(duì)試劑盒（北京生物技術(shù)有限公司）分析TC。使用自動(dòng)化學(xué)分析儀[高化學(xué)（上海）國(guó)際貿(mào)易有限公司]測(cè)量HDL-C。使用LDL-C試劑盒（上海科信生物技術(shù)研究所， 上海）測(cè)定LDL-C。使用貝林系統(tǒng)（Dade Behring）測(cè)量Cys-C。使用450 nm處用鄰二氨基吡啶比色法測(cè)定MPO。使用硫代巴比妥酸反應(yīng)測(cè)定MDA和SOD。使用多因多實(shí)驗(yàn)室（日本熊本）的試劑盒測(cè)定NO。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較兩組患者治療前后腎功能指標(biāo)（尿蛋白、BUN、Cr）、血脂指標(biāo)（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、氧化還原特征指標(biāo)（Cys-C、MPO、MDA、NO、SOD）水平。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者腎功能指標(biāo)比較 治療前， 兩組患者尿蛋白、BUN、Cr水平比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療3個(gè)月后， 蛹蟲(chóng)草組尿蛋白、BUN、Cr水平， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2. 2 兩組患者血脂指標(biāo)比較 治療前， 兩組患者TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療3個(gè)月后， 蛹蟲(chóng)草組TC、TG、LDL-C均低于對(duì)照組， HDL-C水平（1.9±0.5）mmol/L高于對(duì)照組的（1.7±0.5）mmol/L， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2. 3 兩組患者氧化還原特征指標(biāo)比較 治療前， 兩組患者Cys-C、MPO、MDA、NO、SOD水平比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療3個(gè)月后， 蛹蟲(chóng)草組Cys-C、MPO、MDA水平均低于對(duì)照組， NO、SOD 均高于對(duì)照組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

研究表明[5]， 適量食用蛹蟲(chóng)草的人群發(fā)生腎衰竭的風(fēng)險(xiǎn)較低。在本研究中， 蛹蟲(chóng)草能抑制CKD。蛹蟲(chóng)草改善了腎功能， 并控制了血液尿蛋白、BUN和肌酐水平。根據(jù)以往的報(bào)道， 蛹蟲(chóng)草的活性成分可以使磷酸化蛋白激酶B（AKT）和磷酸化GSK-3beta的水平下降， 減少尿石癥動(dòng)物模型中的氧化， 并發(fā)揮抗腎炎功能。治療3個(gè)月后， 蛹蟲(chóng)草組TC、TG、LDL-C水平均低于對(duì)照組， HDL-C水平高于對(duì)照組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。蛹蟲(chóng)草素可能會(huì)影響血脂譜， 發(fā)現(xiàn)其可以通過(guò)增加脂蛋白脂酶和肝脂酶的活性來(lái)影響脂質(zhì)沉積和改善血脂譜[6]。同時(shí)， 蛹蟲(chóng)草還通過(guò)影響血清Cys-C、MPO、NO、SOD和MDA水平來(lái)改善CKD患者的氧化還原特性[7]。蛹蟲(chóng)草通過(guò)提高SOD水平和降低MDA水平改善了抗氧化特性[8]。

蛹蟲(chóng)草中含有相對(duì)豐富的蟲(chóng)草素， 并通過(guò)誘導(dǎo)自噬去除凋亡細(xì)胞。自噬是一個(gè)高度進(jìn)化的降解過(guò)程， 細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)和受損的細(xì)胞器被降解為基本成分。自噬可以去除一些被破壞的物質(zhì)， 產(chǎn)生新的成分， 促進(jìn)細(xì)胞的正常循環(huán)和穩(wěn)定。器官自噬與腎臟疾病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系已經(jīng)報(bào)道過(guò)。

蛹蟲(chóng)草還是其他多種疾病的潛在替代療法， 例如分離自蛹蟲(chóng)草的多糖（AE-PS）具有α-和β-構(gòu)型的吡喃型多糖， 其在2型糖尿病動(dòng)物模型中表現(xiàn)出抗氧化和降血糖功能[9]。據(jù)報(bào)道， 蛹蟲(chóng)草的蟲(chóng)草素和腺苷可通過(guò)抑制促炎因子和纖維化相關(guān)因子的表達(dá)， 對(duì)肝臟起保護(hù)作用[10， 11]。非常需要進(jìn)一步的研究支持促進(jìn)其在各種慢性疾病中的應(yīng)用。

綜上所述， 蛹蟲(chóng)草可通過(guò)影響脂質(zhì)和氧化還原信號(hào)傳導(dǎo)途徑對(duì)CKD起保護(hù)作用， 為目前旨在評(píng)估蟲(chóng)草素對(duì)抑制CKD的臨床試驗(yàn)提供了進(jìn)一步的支持。

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[收稿日期：2020-09-04]