魏沙沙 ，陳志丹,4，孫威江,4*

1福建農林大學園藝學院，福州 350002；2福建省安溪縣現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)園協(xié)同創(chuàng)新中心，泉州 362400；3福建省茶產業(yè)工程技術研究中心，福州 350002；4福建農林大學安溪茶學院，泉州 362400

黃酮醇苷類物質受茶葉品種、葉片成熟度、采收季節(jié)和茶葉加工工藝等因素影響，至今已在不同茶葉中報道了超過二十多種黃酮醇苷[13]，雖然黃酮醇及其糖苷類物質已逐漸引起研究者的關注，但目前國內外的研究多集中在茶樹體內黃酮醇苷的檢測方法、保健功效及影響因素的探究，對其合成途徑和代謝網絡等研究還未深入。

1 茶樹黃酮醇苷成分和含量差異的影響因素

1.1 茶樹品種

黃酮醇及其糖苷物質在茶樹品種之間的差異很大，可以作為區(qū)分茶樹起源或栽培品種類型的有效生物標志物[14-16]。Zheng等[16]探究了不同栽培品種對黃酮醇苷和兒茶素組成的影響，結果顯示無論總量還是單體的含量，黃酮醇苷在茶樹品種間的變化大于兒茶素，可用于區(qū)分不同茶樹栽培品種。Monobe等[17]篩選了高黃酮醇含量的品種“Saemidori”、“Sofu”、“Surugawase”、“Fukumidori”和“Asatsuyu”，“Saemidori”和“Sofu”中的槲皮素糖苷含量較高(110170 μg/mL)，被認為是槲皮素的有效來源。Tian等[18]在云南熟普中鑒定出10種黃酮醇苷(8-17)，其中黃酮醇苷(8-11)首次在茶樹中被鑒定出。茶樹品種不同，黃酮醇的種類和含量存在明顯差異，Zhao等[19]檢測武夷巖茶和武夷水仙兩份茶葉樣品，發(fā)現(xiàn)表兒茶素沒食子酸(epicatechin gallate，ECG)、楊梅素糖苷等物質可能是影響兩種茶葉獨特風味的主要因素。Li等[20]檢測了13個茶樹品種的差異代謝物以全面了解適制綠茶品種(GT)和適制紅綠茶品種(G&BT)之間的差異，結果表明所有芹菜素糖苷和楊梅素糖苷(楊梅素3-半乳糖基蕓香苷除外)、三種槲皮素糖苷在GT栽培品種中更高；代謝途徑分析表明，黃酮類化合物途徑傾向于GT品種中黃酮醇苷的合成，而傾向于G&BT品種中兒茶素和酚酸的合成，該研究結論也為茶樹品種適制性和品種調查奠定基礎。

1.2 茶葉產品種類

不同的茶葉產品種類中黃酮醇苷的含量及組成有差異，白茶中壽眉和白牡丹中山奈酚-O-糖苷、槲皮素-O-糖苷和楊梅素-O-葡萄糖苷含量均高于白毫銀針，而山奈酚3-(6″-沒食子酰葡糖苷)、山奈酚7-(6″-沒食子酰葡糖苷)和槲皮素3-O-半乳糖苷在銀針中含量最高[21]。Bai等[22]在六安瓜片中鑒定出21種黃酮醇及糖苷類物質，其中4種是?；镔|、12種化合物是異構體組，并且發(fā)現(xiàn)了一種新型?；S酮醇四糖苷：山奈酚3-O-[(E)-p-香豆酰-(1→2)][α-L-阿拉伯吡喃糖基-(1→3)][β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-α-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(camellikaempferoside C，1)。Tian 在茯磚茶(FBT)中鑒定出一種新的?；S酮醇糖苷：山奈酚3-O-[Ep-香豆酰-(→2)][α-1-阿拉伯吡喃糖基-(1→3)][α-1-吡喃吡喃糖基(1→6)]-β-二吡喃葡萄糖苷，命名為camellikaempferoside A，從FBT中與camelliquercetiside C一起分離[23]。Pedan[24]在陳年生普茶(APT)和新熟普茶(YPT)中首次鑒定了黃酮醇及其苷元，如槲皮素-半乳糖苷(Q-gal)、槲皮素-葡萄糖苷(Q-glu)等，發(fā)現(xiàn)在APT中黃酮醇苷含量始終高于YPT，但是YPT中含有的槲皮素和山奈酚高于APT，結合PCA和HCA分析發(fā)現(xiàn)，槲皮素和山奈酚可以作為區(qū)別YPT和APT的化學標記物，為多變量因子表征不同茶葉品類開辟了新途徑。

1.3 茶葉加工工藝

已有一些研究者研究了茶葉的加工工藝對黃酮醇糖苷組成的影響[25-29]，但實驗的商品茶通常是從不同的廠家和公司收集[25,30]，難以控制茶葉品種和葉片成熟度，而這兩者都影響黃酮醇糖苷的組成。Fang等[4]用福鼎大白品種分別制成綠茶、黃茶、白茶、烏龍茶和紅茶，探究黃酮醇苷在加工過程中的動態(tài)變化，結果顯示紅茶總黃酮糖苷含量最低(9.83 mg/g)，其次是烏龍茶(11.96 mg/g)；殺青工序因高溫使酶失活，對保持黃酮糖苷的穩(wěn)定起重要作用；在紅茶發(fā)酵和干燥過程中，楊梅素糖苷、槲皮素糖苷及單糖苷、二糖苷、三糖苷大量損失，而山奈酚糖苷的含量保持相對穩(wěn)定，表明發(fā)酵和干燥工序是導致加工過程中黃酮糖苷大量減少的關鍵因素。Bai等[22]用龍井長葉品種分別制成白茶、綠茶、黃茶、紅茶、黑茶和烏龍茶，發(fā)現(xiàn)9種黃酮醇苷在這六大茶類中分布呈多樣性，山奈酚3-O-葡萄糖基蕓香苷在六種茶類中含量最高，槲皮素3-O-葡萄糖基蕓香苷次之，二者含量都隨著發(fā)酵程度的增加而減少，并且認為它們可以區(qū)別不同加工類型的茶葉。Liu等[31]研究了不同半發(fā)酵時間處理的鐵觀音烏龍茶黃酮醇苷的變化，發(fā)現(xiàn)隨著半發(fā)酵時間的增加，楊梅素、楊梅素-鼠李糖、槲皮素-蕓香苷的含量大大降低，而槲皮素、山奈酚、山奈酚-半乳糖、山奈酚-蕓香苷顯著增加。

1.4 茶葉生產季節(jié)

黃酮醇苷的含量隨著季節(jié)性變動。Dai等[32]比較了春季、夏季和秋季采摘的9個品種的綠茶代謝物譜圖，發(fā)現(xiàn)槲皮素-O-糖苷表現(xiàn)出明顯的季節(jié)性波動，且黃酮醇及其糖苷的變化趨勢由其苷元決定：如山奈酚-O-糖苷(山奈酚-3-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-半乳糖苷、山奈酚-3-葡萄糖基-蕓香苷和山奈酚-3-半乳糖基-蕓香苷)在夏茶樣品中含量最低，春、秋茶樣品之間無明顯差異，而夏季茶葉中槲皮素-O-糖苷(槲皮素-3-O-半乳糖苷、槲皮素3-O-半乳糖基-蕓香苷和槲皮素3-O-葡萄糖基-蕓香苷)的含量高于秋季茶葉中的含量。綠茶的感官品質在春季不同時期變化較大，Liu等[33]對早春、中春和晚春季節(jié)采摘的幼嫩枝葉進行代謝物分析，顯示晚春季節(jié)茶葉碳水化合物、黃酮類及其糖苷含量大量提高，三羧酸循環(huán)和光呼吸強烈增強，從而提高了所制茶葉的感官品質。

1.5 茶樹組織部位

不同的茶葉組織部位黃酮醇苷的含量不同，總體呈現(xiàn)出在茶樹嫩葉的含量高于成熟葉。黃酮醇單糖苷、二糖苷和三糖苷主要積累在茶樹的幼葉中，在老莖和根中含量極低[3]。Wu等[34]在茶樹鮮葉中鑒定了13種黃酮醇及其糖苷物質，第二葉位總黃酮醇苷含量最高(4 018.0 μg/g)，其次是第四葉和第六葉，芽中含量最低(1 780.0 μg/g)，Li等[35]的研究也得出相似結果，在成熟葉和幼嫩葉中檢測到比莖和根含量更高的黃酮醇。與山奈酚和楊梅素相比，槲皮素是黃酮醇類中含量最為豐富的一類物質，成熟葉中的槲皮素和楊梅素與幼葉相比顯著增加，而幼葉中山奈酚的含量比成熟葉高。蘆丁(二糖苷)在茶樹成熟葉中的含量大約是幼葉的兩倍，在茶樹中僅檢測到少量的槲皮素單糖苷，這些研究結果揭示了茶樹中黃酮醇糖苷分布的時空變化。

1.6 溫度與光照

溫度和光照均影響黃酮醇苷的含量。Zhang等[36]分析了遮光處理下光強和溫度對茶葉中黃酮醇苷的影響，發(fā)現(xiàn)在遮蔭處理中黃酮醇及其糖苷含量顯著下降，而適當?shù)母邷赜欣邳S酮醇苷的積累，尤其是山奈酚3-bd-吡喃葡萄糖苷，對光強變化的敏感性高于對溫度變化。光為植物的生長和發(fā)育提供能量，然而過量的光會導致光損傷，因此避免光脅迫對植物至關重要[37-39]，黃酮類化合物對茶樹光保護的作用已有大量研究[40]。與具有單羥基的類黃酮相比，B環(huán)中具有鄰二羥基結構的類黃酮在葉片中優(yōu)先積累[41]，Zhang等[42]發(fā)現(xiàn)與正常綠葉相比，光敏型黃化茶“黃金芽”葉片中二羥基黃酮類化合物含量較高，主要是槲皮素及其糖苷(槲皮素3-半乳糖苷，槲皮素4′，7-二葡萄糖苷等)，而楊梅素及其糖苷(楊梅素3-阿拉伯糖苷，楊梅素3，3′-二半乳糖苷等)的含量低于正常綠葉，表明二羥基黃酮類化合物在茶葉中的功能存在很大差異，特別是槲皮素及其糖苷在黃化葉中對光保護及清除活性氧自由基有巨大作用。

1.2.2 腸外營養(yǎng) 采取全腸外營養(yǎng)支持，靜脈營養(yǎng)配伍方案與腸內營養(yǎng)組相同，總熱量約為110kj/（kg·d），給予靜脈支持。

1.7 其它因素

Qi等[43]分析了不同砧木對新鮮茶葉中代謝物的不同影響，發(fā)現(xiàn)大多數(shù)差異代謝物屬于茶多酚(黃烷-3-醇，黃酮，黃酮醇等)，表明嫁接的影響主要集中在多酚相關的途徑。Dong等[44]探究了“龍井43”茶樹中黃酮醇及其糖基化衍生物對缺氮、正常氮、過量氮供應的響應機制，發(fā)現(xiàn)用正常氮處理時，大多數(shù)黃酮醇糖苷(槲皮素-3-葡萄糖苷、山奈酚-3-葡萄糖基-鼠李糖苷-葡萄糖苷)積累到最高水平。而黃酮醇糖苷的碳水化合物底物水平(如蔗糖、蔗糖-6-磷酸、D-果糖1，6-二磷酸和葡萄糖-1-磷酸)與黃酮醇糖苷含量呈正相關，表明正常的氮水平下茶樹通過基因調節(jié)底物含量來促進黃酮醇糖苷的生物合成，而異常的氮處理，尤其是過量氮處理則具有抑制作用。

2 黃酮醇苷類物質檢測方法

由于茶葉中黃酮糖苷的種類非常多，又缺少相應的商業(yè)標準品，因此建立一種快速且成本低廉的方法來檢測茶葉中的黃酮醇苷非常重要。隨著物質分離檢測技術的不斷發(fā)展，高效液相色譜、超高效液相色譜、色譜-質譜聯(lián)用等技術逐漸應用于茶葉中黃酮醇苷的定性與定量研究。

2.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法是在傳統(tǒng)液相色譜法的基礎上發(fā)展起來的新型檢測方法，具有檢測限制低、靈敏度高、分析效率高等優(yōu)點。高效液相色譜儀常與紫外(UV)、二極管陣列(DAD)等檢測系統(tǒng)結合使用，成為分析茶樹中黃酮醇苷物質最有效的定量定性分析技術之一。Fanali[45]用一種標準品的UV吸收來量化黃酮醇苷元的其他糖苷物質，以這種方式在白茶樣品中定量了十種黃酮醇糖苷。Lakenbrink為了保證樣品的純度，在檢測時利用聚酰胺柱層析進行了前處理[46]，Hilal[47]使用聚酰胺、Sephadex LH 20色譜和制備型HPLC在白茶中鑒定出新的楊梅素三糖苷(鼠李糖苷)，在烏龍茶中檢測到新型乙?；S酮醇四糖苷。早期研究報道中多使用糖苷配基作為標準溶液定量黃酮醇苷，或者是制備茶葉提取液分離黃酮醇苷然后量化。然而一些黃酮醇糖苷在茶樹中微量積累，不能在單次HPLC運行中有效分離和精確定量。因此，在現(xiàn)有的分離檢測體系下建立更加高效的分析技術和設備方法成為黃酮醇苷類物質分析的必然趨勢。

2.2 液相色譜-質譜檢測法

液相色譜-質譜檢測聯(lián)用技術(HPLC-MS)可以實現(xiàn)對目標化合物的相對分子質量、離子碎片以及物質結構進行綜合分析，同時具有高效、抗干擾能力強的優(yōu)點。近年來該技術已運用于茶樹中黃酮醇苷類物質的鑒定[48]，在綠茶和紅茶中鑒定了19種黃酮醇糖苷[49]，其中14種被確定為紅茶中澀味的主要貢獻者[2]。Sultana等[50]采用HPLC-UV/ESI-MS同時對綠茶、紅茶、烏龍茶中的黃酮醇等24種酚類物質進行檢測，不僅能區(qū)分不同品種茶葉中的酚類物質構成，在缺乏標準品的情況下，還可以根據色譜的保留時間和碎片離子鑒定目標化合物。Rha[51]用HPLC-MS法鑒定了綠茶中16種黃酮醇糖苷，證明此方法作為檢測茶葉中黃酮醇苷組分穩(wěn)定有效。但其操作難度大、儀器成本高，且難以對一些復雜結構的目標化合物進行有效識別，目前的應用還有很大的發(fā)展空間。

2.3 超高效液相色譜

超高效液相色譜(UPLC)是在HPLC的基礎上發(fā)展起來的，具有高效快速、分辨率高、靈敏度好等特點。Jiang等[28]首次采用UPLC法對綠茶、紅茶、烏龍茶的黃酮醇苷類物質進行檢測，通過電噴霧串聯(lián)質譜識別了18種黃酮醇苷類物質，并發(fā)現(xiàn)綠茶中主要以山奈酚糖苷為主，烏龍茶則以槲皮素和楊梅素糖苷為主，紅茶中以槲皮素糖苷為主，表明黃酮醇苷可以作為區(qū)別不同品種的標志物質。QQQ-MS/MS是一種串聯(lián)質譜儀，可以分析和提供分子離子特征產物離子的信息，其MRM模式是一種高靈敏度的方法[52]。Wu、Dong等[3,44]建立了UPLC-QQQ-MS/MS MRM模式的方法，測定了不同茶樹品種的黃酮醇苷類化合物。Bai等[22]建立的UPLC方法可以在六種加工類型的茶中同時測定含有一至四個糖單元的不同黃酮醇糖苷的方法。Zhao、Wu等也利用UHPLC-DAD-MS/MS對不同茶葉中黃酮醇糖苷的鑒定和測定進行了多項研究[53-56]。超高效液相色譜法以其操作簡便、準確度高、檢測時間短高效，對目標化合物的分離能力強等優(yōu)點，已逐漸成為茶樹中黃酮醇苷類物質檢測的有力方法之一。

3 黃酮醇苷類物質合成途徑的關鍵酶類

3.1 黃酮醇苷類物質合成上游途徑的相關酶

茶樹中黃酮醇的生物合成途徑是類黃酮化合物代謝途徑的一個分支，由苯丙氨酸途徑經丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸-4-羥化酶(C4H)、4-香豆酸輔酶A連接酶(4CL)、查爾酮合成酶(CHS)產生柚皮素查耳酮，之后在查耳酮異構酶(CHI)催化下被特異環(huán)化形成柚皮素，然后在一種或多種黃烷酮羥化酶(F3H)或類黃酮羥化酶(類黃酮3′-羥化酶，F(xiàn)3′H和類黃酮3′，5′-羥化酶，F(xiàn)3′5′H)催化下產生不同的二氫黃酮醇，如二氫山柰酚、二氫槲皮素、二氫楊梅素等。二氫黃酮醇可以在黃酮醇合成酶(FLS)作用下氧化形成黃酮醇苷元，然后在尿苷二磷酸糖基轉移酶(UGTs)催化下發(fā)生糖基化等修飾，形成穩(wěn)定多樣的黃酮醇衍生物[57]。

3.2 黃酮醇苷合成途徑的糖基轉移酶

3.2.1 糖基轉移酶的分類

茶樹中的黃酮類化合物有黃烷-3-醇、酚酸、花青素和黃酮醇等，賦予茶獨特的風味，使茶湯苦味和澀味之間取得平衡。大多數(shù)的黃酮類化合物在黃酮類糖基轉移酶作用下以糖苷形式存在于植物中，增加了其穩(wěn)定性、溶解性以及生物利用度[58]；在茶樹中，黃酮醇糖苷物質的上游合成途徑已基本明了，但將黃酮醇苷元催化形成黃酮醇衍生物的UGTs還處于研究的初級階段。由于UDP-糖基轉移酶是由多基因家族編碼，所以難以篩選茶樹中特異性參與黃酮醇化合物的目標UGT基因。迄今為止，基于高度保守的PSPG基序，已經從各種植物基因組中鑒定了超過1500個推測的UGT基因，這些UGT序列已被分為16個不同的組(從A到P)[59]。Noguchi等[60]將黃酮類糖基轉移酶分為四個官能團，命名為簇I、II、IIIa、IIIb和IV，推測四組轉移酶分別編碼3-O、5-O和7-O糖基轉移酶和二糖苷/二糖鏈糖基轉移酶。

3.2.2 茶樹中鑒定出的糖基轉移酶

在茶樹中發(fā)現(xiàn)的178個UGT基因中，很少具有功能特征[61]。Jiang等[62]從茶樹轉錄組數(shù)據庫中篩選出132個UGT基因(CsUGT)，其中CsUGT73A20、CsUGT75L12、CsUGT78A14和CsUGT78A15被分類到不同的簇中，這些CsUGT是導致茶樹中不同組織器官中不同黃酮醇糖苷的積累的原因。

3.2.3 CsUGT78A14、CsUGT78A15基因與黃酮醇苷合成

在茶樹中，黃酮類化合物主要以3-O-葡萄糖苷[62]的形式存在，其可能是由未成熟葉片中的CsUGT78A14和CsUGT78A15產生。研究表明，CsUGT78A14在3-OH糖基化位點用UDP-葡萄糖作為糖供體促進了黃酮醇葡萄糖苷的合成，CsUGT78A15則以UDP-半乳糖作為糖供體促進黃酮醇半乳糖苷的增加。在過表達CsUGT78A14、CsUGT78A15兩個基因的擬南芥和煙草中，鑒定出黃酮醇苷山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷和山奈酚-3-O-β-D-半乳糖苷，分別為這兩個基因的催化產物，即CsUGT78A14和CsUGT78A15的酶特異性的產生具有區(qū)域選擇性的3-O-葡糖苷/半乳糖苷[61]。

3.2.4 CsUGT73A20與黃酮醇苷的合成

有研究發(fā)現(xiàn)，在CsUGT73A20表達的植物中，參與3-OH和7-OH位點的糖基化反應的黃酮醇糖苷的含量顯著增加，但黃烷-3-醇的含量降低[62]。Zhao等[60]從茶樹中分離出屬于簇IIIa的黃酮醇糖基轉移酶(CsUGT73A20)，發(fā)現(xiàn)其表現(xiàn)出廣泛的底物耐受性，對黃酮醇(山奈酚，槲皮素和楊梅素)，黃酮(芹菜素)和黃烷酮(柚皮素)具有活性，其中山奈酚是最佳底物，使用UDP-半乳糖作為糖供體時，未檢測到產物。體外實驗表明，CsUGT73A20對黃酮醇化合物進行多位點糖苷化，主要形成3-O-葡萄糖苷和7-O-葡萄糖苷。pH對糖基轉移酶的活性也有影響，CsUGT73A20在pH8.0下積累的K7G產物更多，但K3G是pH9.0時的主要產物，高pH抑制體外7-OH位點的糖基化反應。在過量表達CsUGT73A20的煙草中，生成一種新的槲皮素-3-O-鼠李糖苷-7-O-鼠李糖苷(Q-3-R-7-R)黃酮醇糖苷[62]。

3.2.5 CsUGT78A17與黃酮醇苷的合成

Ohgami[63]發(fā)現(xiàn)UGT73A17基因在成熟葉中高豐度表達，隨著葉片成熟，其表達量與槲皮素糖苷的積累曲線一致，表明UGT73A17部分參與茶樹中黃酮醇糖基化。Su[64]進一步鑒定了UGT73A17基因，其負責多種類黃酮糖苷的生物合成，序列分析表明UGT73A17蛋白在氨基酸水平上與7-O-糖基轉移酶顯示出高度同一性，并且它與其他植物物種的幾種7-O-糖基轉移酶聚集在同一進化枝中。rUGT73A17在高溫(例如50 ℃)下的活性高于低溫時的活性，表明UGT73A17負責多種黃酮糖苷的生物合成，也與茶樹的熱響應和品質有關。CsUGT73A17比目前在茶樹中鑒定的其他UGT具有更廣泛的底物特征，體外酶促測定還證實，CsUGT73A17主要產生7-O-葡糖苷，產生少量的3，3′-，4′-O-葡糖苷；從酶動力學結果來看，CsUGT73A17對所有黃酮醇和黃酮底物顯示出較高的親和力和較低的Km值，但CsUGT73A20似乎對山奈酚比對其他底物更具活性。CsUGT73A17類似于CsUGT73A20，也主要產生7-O-葡萄糖苷，但是含有少量的3-O-葡萄糖苷[30]。CsUGT78A14和CsUGT78A15以及CsUGT73A20都不能在成熟葉片中高度表達，而蘆丁在成熟葉中高水平積累[65]，UGT73A17也在成熟葉中高度表達，所以猜測UGT73A17可能是產生蘆丁的原因[64]。

3.2.6 CsUGT75L12與黃酮醇苷的合成

研究證實CsUGT75L12是黃酮醇7-O-糖基轉移酶。Dai等[66]在大腸桿菌中表達的重組CsUGT75L12蛋白在7-OH位置對多個酚類底物表現(xiàn)出葡萄糖基化活性，但花青素，兒茶素和酚酸除外。在過表達CsUGT75L12的擬南芥植物中，槲皮素3-O-鼠李糖苷-7-O-吡喃葡萄糖苷和山奈酚3-O-鼠李糖苷-7-O-吡喃葡萄糖苷的積累被顯著促進。

3.2.7 CsUGT72AM1與黃酮醇苷的合成

Zhao等[67]從茶樹中分離出屬于簇IIIb的糖基轉移酶(CsUGT72AM1)，rCsUGT72AM1可以在體外對黃酮醇進行糖苷化，分別形成3-O-葡萄糖苷或4-O-葡萄糖苷。這種酶對黃烷酮也可以進行多位點糖苷化，產物是柚皮素-7-O-葡糖苷和-4′-O-葡糖苷。此外，在用花青素作為底物的酶測定中，CsUGT72AM1的糖基化活性被高濃度的花色素苷顯著抑制。He[68]從龍井43品種的天然雜交種群中獲得了一種新的紫葉茶品種“Mooma1”，HPLC和LC-MS分析顯示花青素和O-糖基化黃酮醇在“Mooma1”葉片中顯著積累，通過轉錄組數(shù)據鑒定出紫葉茶中的一個新的UGT基因(CsUGT72AM1)，體外酶促測定證實CsUGT72AM1具有作為黃酮醇3-O-葡糖基轉移酶的催化活性，并顯示出廣泛的底物特異性。

4 展望

黃酮醇及糖苷物質作為參與茶樹抵抗逆境及茶葉滋味、色澤及具有保健功能的次生代謝物，其在不同茶樹品種、加工工藝、茶葉品類的合成、積累已有一些研究基礎，黃酮醇類物質與多種環(huán)境因子均有互作[69]，其生物合成的環(huán)境調控因素研究目前以光照和溫度為主，但其他環(huán)境脅迫因素如CO2、干旱或水澇、病蟲害等生物脅迫對黃酮醇生物合成的影響方面的探索較少。黃酮醇類化合物種類多、結構復雜，相關標準品的缺乏使其定性和定量檢測工作比較困難。近年來高效液相色譜法、液相色譜-質譜檢測法、高效液相色譜法等多種方法已在茶樹黃酮醇苷類物質的測定過程中得到應用，但今后的研究還需使用多種檢測儀器建立更加高效便捷的檢測方法，加強分析檢測工作的系統(tǒng)性和精確性。黃酮醇及糖苷生物合成途徑中已有諸多基因被克隆、鑒定及部分功能驗證，但由于該通路代謝網絡復雜，各基因間協(xié)同表達及調控機制尚較模糊。在不同條件下，多轉錄因子互作及其對黃酮醇及糖苷合成相關結構基因的調控機制有待闡明。在今后的研究中，應將檢測分析及代謝途徑和關鍵基因表達相結合，從根本上解決茶樹黃酮醇及糖苷類物質的積累及代謝調控的有關問題，為篩選黃酮醇類物質特異性積累的茶樹種質資源以及膳食性黃酮醇食品的利用和品質提升奠定基礎。