英娜 秦搏 宋學(xué)鋒

摘要：為減少表面病原對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵的影響，提高受精卵的健康出苗率，采用藥物浸泡法，研究甲醛、雙氧水、次氯酸鈉及聚維酮碘在不同藥物濃度下對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化率以及畸形率的影響，并以健康出苗率作為藥物對(duì)受精卵孵化效果的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn)，聚維酮碘試驗(yàn)組的健康出苗率相對(duì)于對(duì)照組差異不顯著，且當(dāng)藥物質(zhì)量濃度為500 mg/L時(shí)，健康出苗率顯著低于對(duì)照組;次氯酸鈉組的整體健康出苗率與甲醛試驗(yàn)組的效果相當(dāng)，顯著高于對(duì)照組，但是均顯著低于雙氧水組，當(dāng)雙氧水質(zhì)量濃度為1 000 mg/L時(shí)，健康出苗率可達(dá)69.33%，效果最佳。結(jié)果表明，宜選用雙氧水作為綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化時(shí)的消毒藥物，質(zhì)量濃度為1 000 mg/L時(shí)消毒效果最佳。

關(guān)鍵詞：綠鰭?cǎi)R面鲀;受精卵;孵化;健康出苗率;消毒藥物

中圖分類(lèi)號(hào)：S961.2?? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A? 文章編號(hào)：1002-1302（2020）20-0190-05

綠鰭?cǎi)R面鲀，隸屬于鲀形目（Tetraodontiformes）單角鲀科（Monacanthidae）馬面鲀屬（Thamnaconus），又稱(chēng)剝皮魚(yú)、面包魚(yú)等[1-2]。作為經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，具有重要的食用價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其肉質(zhì)鮮嫩，富含豐富的人體必需氨基酸及不飽和脂肪酸EPA、DHA等[3]。綠鰭?cǎi)R面鲀?yōu)橥夂Ｅ越讓郁~(yú)類(lèi)，在西北太平洋的渤海、黃海、東海、南海以及日本海均有分布，其中，東海是我國(guó)綠鰭?cǎi)R面鲀的主要捕撈區(qū)[4]，但隨著網(wǎng)具的發(fā)展，無(wú)序捕撈的加劇，漁業(yè)資源呈現(xiàn)枯竭趨勢(shì)，目前的捕撈量已經(jīng)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足市場(chǎng)需求[5]，因此工廠(chǎng)化增養(yǎng)殖技術(shù)亟需解決。自2011年突破了人工繁育技術(shù)以來(lái)，綠鰭?cǎi)R面鲀工廠(chǎng)化養(yǎng)殖數(shù)量呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)，不僅帶動(dòng)了相關(guān)水產(chǎn)品加工產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，也為魚(yú)苗的增殖放流增加了多樣性。

關(guān)于綠鰭?cǎi)R面鲀?nèi)斯し庇夹g(shù)中的關(guān)鍵點(diǎn)如生殖調(diào)控技術(shù)[6]、受精卵孵化條件[7]、胚胎發(fā)育[8]等技術(shù)已被探索，但是綠鰭?cǎi)R面鲀的受精卵為黏性、沉性卵，其表面黏絲使其容易黏附在其他物體上[7]，同時(shí)也容易黏附藻類(lèi)、有害微生物等從而影響受精卵的孵化及后期發(fā)育。實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中我們發(fā)現(xiàn)，未經(jīng)任何處理的綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵的孵化率遠(yuǎn)低于其他魚(yú)類(lèi)，而畸形率卻遠(yuǎn)高于其他魚(yú)類(lèi)。提高受精卵的孵化率并降低畸形率，是綠鰭?cǎi)R面鲀?nèi)斯し敝尺^(guò)程中的一大技術(shù)要點(diǎn)。

采用消毒藥物對(duì)受精魚(yú)卵進(jìn)行消毒是魚(yú)類(lèi)育苗過(guò)程中通常采用的辦法，已有相關(guān)研究針對(duì)不同魚(yú)類(lèi)的受精卵孵化進(jìn)行最佳消毒藥物以及最佳濃度方面的探索，但是由于不同種類(lèi)的魚(yú)卵表面理化性質(zhì)不一以及地域水環(huán)境、受精卵本身攜帶的病原有差異，最佳消毒藥物及最佳濃度也將因魚(yú)的種類(lèi)不同而異。本研究使用常見(jiàn)的4種藥物（甲醛、雙氧水、次氯酸鈉、聚維酮碘）對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵進(jìn)行消毒處理，觀(guān)察不同藥物對(duì)孵化情況的影響，希望找到適用于提高綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵出苗率的最佳藥物以及最適濃度。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2019年5月在中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所贛榆研究中心進(jìn)行。選擇2齡以上的綠鰭?cǎi)R面鲀經(jīng)過(guò)營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化和人工生殖調(diào)控作為試驗(yàn)親魚(yú)，在產(chǎn)卵池中自然產(chǎn)卵、授精，池底鋪波紋板用于收集受精卵，用海綿或者軟毛刷于波紋板上將綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵輕輕刷至玻璃燒杯中，于解剖鏡下挑選質(zhì)量較好且發(fā)育至原腸期的同一批受精卵用于試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

4種消毒藥物分別是甲醛，含量37%，萊陽(yáng)市康通化工有限公司生產(chǎn);雙氧水，含量3%，廣東恒健制藥有限公司生產(chǎn);次氯酸鈉，含量10%，天津富宇精細(xì)化工有限公司生產(chǎn);聚維酮碘溶液，含量10%，廈門(mén)惠盈動(dòng)物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。依據(jù)相關(guān)要求與標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)之前先將各藥物配制試驗(yàn)液母液，根據(jù)試驗(yàn)需要逐步稀釋到設(shè)定濃度，現(xiàn)配現(xiàn)用?？紤]到實(shí)際生產(chǎn)時(shí)可操作性，參考相關(guān)文獻(xiàn)資料和預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置各藥物質(zhì)量濃度梯度和處理時(shí)間（表1）。甲醛、雙氧水、次氯酸鈉、聚維酮碘4種藥物共設(shè)置4個(gè)質(zhì)量濃度梯度，處理時(shí)間為10 min，每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)置3組平行，并設(shè)置相應(yīng)的空白對(duì)照組。每組采用靜水1次消毒處理，取100粒受精卵，在相應(yīng)質(zhì)量濃度藥物中浸泡10 min，到時(shí)間后迅速將受精卵轉(zhuǎn)至1 000 mL的燒杯中，燒杯內(nèi)提前加好經(jīng)砂濾PP棉（規(guī)格：25.4 cm，孔徑0.5 μm）過(guò)濾的海水，微充氧，水溫控制在22 ℃。經(jīng)48 h孵出仔魚(yú)后，統(tǒng)計(jì)不同試驗(yàn)組孵出仔魚(yú)數(shù)量以及魚(yú)苗脊柱彎曲、油球異位或異數(shù)等畸形仔魚(yú)數(shù)量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

孵化率=孵出魚(yú)苗數(shù)/受精卵數(shù)×100%;

畸形率=畸形個(gè)數(shù)/孵出魚(yú)苗數(shù)×100%;

健康出苗率=（孵出魚(yú)苗數(shù)-畸形魚(yú)苗數(shù)）/受精卵數(shù)×100%。

本研究中的各數(shù)據(jù)結(jié)果采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，數(shù)據(jù)分析軟件采用的是Excel 2017和SPSS 19，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

消毒試驗(yàn)前在Olympus顯微鏡100倍下受精卵觀(guān)察到表面存在念珠藻、細(xì)菌、纖毛蟲(chóng)等微生物（圖1），也可能存在未觀(guān)察到的病毒等病原。不同消毒藥物及相關(guān)質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)的綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化率及畸形率見(jiàn)表2。

2.1 甲醛對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化的影響

甲醛4個(gè)不同質(zhì)量濃度處理的綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化情況見(jiàn)表2。孵化率隨著藥物質(zhì)量濃度增加而逐漸升高，均顯著高于對(duì)照組，2 000 mg/L質(zhì)量濃度組孵化率顯著高于其他3個(gè)質(zhì)量濃度組。畸形率在4組藥物中隨著藥物質(zhì)量濃度增加而逐漸升高，500、1 000 mg/L質(zhì)量濃度組顯著低于對(duì)照組，1 500 mg/L 與對(duì)照組差異不顯著，2 000 mg/L質(zhì)量濃度組畸形率顯著高于對(duì)照組。孵化率和畸形率隨著藥物質(zhì)量濃度增加均有升高趨勢(shì)。

2.2 雙氧水對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化的影響

由雙氧水4個(gè)不同質(zhì)量濃度處理的綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化的情況見(jiàn)表2。隨著藥物質(zhì)量濃度增加，孵化率逐漸升高，處理組顯著高于對(duì)照組，2 000 mg/L 質(zhì)量濃度組孵化率高達(dá)98.00%，顯著高于500 mg/L質(zhì)量濃度組）;畸形率在4組藥物中隨著藥物質(zhì)量濃度增加逐漸升高，500、1 000 mg/L質(zhì)量濃度組均顯著低于對(duì)照組，2 000 mg/L質(zhì)量濃度組的畸形率顯著高于對(duì)照組，達(dá)到36.73%。

2.3 次氯酸鈉對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化的影響

孵化率隨著次氯酸鈉質(zhì)量濃度增加持續(xù)降低，但均顯著高于對(duì)照組，0.2 mg/L質(zhì)量濃度組的孵化率高達(dá)58.67%，畸形率隨著次氯酸鈉質(zhì)量濃度增加持續(xù)升高，0.2 mg/L質(zhì)量濃度組畸形率顯著低于對(duì)照組，1.0、2.0 mg/L 質(zhì)量濃度組的畸形率顯著高于對(duì)照組（表2）。

2.4 聚維酮碘對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化的影響

孵化率隨著聚維酮碘質(zhì)量濃度增加而持續(xù)升高，孵化率在4個(gè)濃度組之間差異不顯著，200、500 mg/L 質(zhì)量濃度組顯著高于對(duì)照組，500 mg/L處理孵化率最高，為41.33%;畸形率隨著聚維酮碘質(zhì)量濃度增加而持續(xù)升高，且顯著高于對(duì)照組，畸形率在4個(gè)質(zhì)量濃度組之間存在顯著差異，500 mg/L處理畸形率最高，達(dá)到88.70%。

2.5 4種藥物對(duì)受精卵健康出苗率的影響

為了評(píng)估不同藥物的綜合效果，本研究分別對(duì)每種藥物及其不同質(zhì)量濃度組的健康出苗率做了比較分析。從圖2可以看出，對(duì)照組的健康孵化率為14.0%，雙氧水4個(gè)質(zhì)量濃度組（由低到高，下同）對(duì)應(yīng)的健康出苗率分別是68.00%、69.33%、6450%、62.00%，效果優(yōu)于其他3種藥物;其次是甲醛，健康出苗率分別是52%、50.67%、44.67%、

46.67%;次氯酸鈉的健康出苗率分別是47.33%、27.33%、18.67%、17.33%，相對(duì)于對(duì)照組而言具有一定的作用，但是效果差于前2種藥物;聚維酮碘的健康出苗率分別是13.33%、12.00%、10.67%，467%，與對(duì)照組相當(dāng)，在4種藥物中效果最差。

3 討論與結(jié)論

3.1 消毒藥物在受精卵孵化過(guò)程中的應(yīng)用

在魚(yú)類(lèi)人工繁育過(guò)程中，制約魚(yú)類(lèi)孵化率的因素有很多，如受精卵質(zhì)量、環(huán)境因子（溫度、鹽度、pH值、病原）等。由于受精卵攜帶的病原，如神經(jīng)壞死病毒（NNV）[9]、水霉[10]等（這些病原可能通過(guò)水體、飼料以及垂直方式傳播而來(lái)），不僅會(huì)破壞受精卵結(jié)構(gòu)阻滯其孵化出膜，即使孵化出膜，也可能繼續(xù)危害魚(yú)苗，造成其早期死亡。為提高受精卵孵化率、降低后期仔稚魚(yú)畸形率，人工育苗過(guò)程中使用化學(xué)藥物對(duì)受精卵進(jìn)行消毒是非常重要的環(huán)節(jié)。但當(dāng)化學(xué)消毒藥物不適宜或者濃度過(guò)高，也存在破壞受精卵卵膜、卵質(zhì)等結(jié)構(gòu)，造成滲透壓失衡、圍心腔和卵黃囊腫大等畸形問(wèn)題[11];采用合適的藥物及適宜濃度對(duì)受精卵進(jìn)行消毒，不僅能殺死受精卵的表面病原，提高孵化率，而且能阻止病原內(nèi)侵，降低幼苗畸形率。

孔祥迪等研究了聚維酮碘、甲醛、二氧化氯和臭氧在不同質(zhì)量濃度及不同處理時(shí)間的條件下對(duì)石斑魚(yú)受精卵孵化效果的影響，結(jié)果表明，聚維酮碘20～70 mg/L以及臭氧0.3～0.5 mg/L處理 1 min，在對(duì)受精卵進(jìn)行消毒的同時(shí)不會(huì)對(duì)受精卵造成顯著刺激，而甲醛和二氧化氯因?qū)Ψ趸试斐娠@著影響而不被推薦使用[12]。楊志強(qiáng)等研究4種消毒藥物對(duì)錦鯉受精卵孵化的影響，甲醛和聚維酮碘分別因畸形率高于對(duì)照組、孵化率低于對(duì)照組而不被推薦使用，二氧化氯雖然可以提高孵化率但同時(shí)畸形率也隨之升高，因此適宜消毒藥物及質(zhì)量濃度范圍為過(guò)氧化氫 500～1 000 mg/L，處理 10 min[13]。吳建紹等研究了聚維酮碘、甲醛、次氯酸鈉、三氯異氰尿酸等藥物對(duì)斜帶石斑魚(yú)受精卵孵化率的影響，并篩選出了不同藥物使用的最佳濃度[11]。

3.2 綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵的特點(diǎn)

綠鰭?cǎi)R面鲀屬暖水性中下層洄游魚(yú)類(lèi)[2]，其受精卵具有黏性、沉性的特點(diǎn)，主要通過(guò)表面的黏絲及不規(guī)則黏膜將其固定在其他物體上[7]。本研究中未經(jīng)消毒劑處理的對(duì)照組，孵化率僅為20.40%，遠(yuǎn)低于同類(lèi)研究中斜帶石斑魚(yú)的88%[11]、棕點(diǎn)石斑魚(yú)的92.9%、錦鯉的85.67%;同時(shí)，綠鰭?cǎi)R面鲀對(duì)照組的畸形率高達(dá)31.45%，高于錦鯉的425%[13]、石斑魚(yú)的6.25%[12]。這些情況可能是由于綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵是黏性卵容易黏附平鋪在產(chǎn)卵池池底附著基上或水中的念珠藻、親魚(yú)糞便和原生動(dòng)物，導(dǎo)致受精卵因表面附著的病原數(shù)量較多造成受精卵缺氧或與水環(huán)境物質(zhì)交換不暢。

3.3 4種消毒藥物對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化的影響

與對(duì)照組相比，4種消毒藥物消毒處理的受精卵都呈現(xiàn)畸形率升高的趨勢(shì)，與吳建邵研究的9種藥物對(duì)斜帶石斑魚(yú)受精卵孵化率的影響[11]，潘魯青研究的幾種消毒劑對(duì)中國(guó)對(duì)蝦受精卵和無(wú)節(jié)幼體的影響結(jié)果[14]相一致。除次氯酸鈉外，其他3種消毒藥物處理的受精卵孵化率呈升高趨勢(shì)，與孟思妤等的“菌毒消”能夠提高試驗(yàn)魚(yú)的孵化率，除菌效果明顯結(jié)果[15]相同。說(shuō)明3種消毒藥物能夠在不破壞卵質(zhì)的基礎(chǔ)上殺滅表面病原，提高孵化率，而次氯酸鈉可能因?yàn)榫哂懈g性和氧化性在消毒過(guò)程中對(duì)受精卵產(chǎn)生一定的破壞，導(dǎo)致受精卵孵化率隨濃度增加而降低，也與吳建紹等研究的次氯酸鈉對(duì)斜帶石斑魚(yú)受精卵孵化結(jié)果[11]一致。

受精卵孵化率和仔魚(yú)畸形率是評(píng)價(jià)孵化效果的常用指標(biāo)[12]。消毒藥物的效果評(píng)價(jià)，不僅要考慮孵化率的高低，也要注意對(duì)畸形率的影響。本研究在同類(lèi)研究中首次使用健康出苗率這一指標(biāo)，它是指所有試驗(yàn)受精卵中能孵出健康魚(yú)苗的比例，將孵化率和畸形率同時(shí)考慮在內(nèi)，可以作為消毒效果的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)。聚維酮碘組的健康出苗率與對(duì)照組差異不大，且當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到500 mg/L時(shí)的健康出苗率顯著低于對(duì)照組，使用低質(zhì)量濃度聚維酮碘健康出苗率與對(duì)照組差異不顯著，這與孔祥迪等得出的聚維酮碘對(duì)石斑魚(yú)孵化率效果穩(wěn)定[12]不一致，可能是因?yàn)榫G鰭?cǎi)R面鲀受精卵對(duì)聚維酮碘耐受性差，聚維酮碘在殺滅病原的同時(shí)破壞了受精卵的滲透壓、卵質(zhì)等造成孵化率低。次氯酸鈉組在質(zhì)量濃度為0.2、0.5 mg/L時(shí)，健康出苗率顯著高于對(duì)照組，但是最高值僅為47%，且降幅較大，表明次氯酸鈉毒性高于甲醛和聚維酮碘，可能對(duì)受精卵后期致畸影響較大，因而在實(shí)際生產(chǎn)中要慎用此類(lèi)藥物。甲醛藥物組的整體健康出苗率顯著高于聚維酮碘和次氯酸鈉，當(dāng)質(zhì)量濃度為500 mg/L時(shí)，健康出苗率最高，為52%，但在使用過(guò)程中，由于甲醛刺激性氣味較重，會(huì)對(duì)人體各個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)生一定的危害[16]，已經(jīng)在許多國(guó)家被禁止使用[17];本研究中，雙氧水消毒后的受精卵健康出苗率均高于其他3種藥物，與Rasowo等的研究結(jié)果[18]一致，且當(dāng)藥物質(zhì)量濃度為500～1 500 mg/L時(shí)，健康出苗率趨于穩(wěn)定，當(dāng)高于1 500 mg/L時(shí)，健康出苗率有下降趨勢(shì)，表明高質(zhì)量濃度過(guò)氧化氫對(duì)受精卵的孵化不利。

本研究通過(guò)比較4種藥物對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化率、畸形率的影響，以健康出苗率作為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)，同時(shí)從消毒藥物對(duì)試驗(yàn)人員盡量安全的角度，認(rèn)為雙氧水的消毒效果最佳，當(dāng)質(zhì)量濃度為 1 000 mg/L 時(shí)，健康出苗率最高，達(dá)69.33%，并且相對(duì)于甲醛、次氯酸鈉等藥物，雙氧水對(duì)人體危害程度較低，適合作為綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化時(shí)的消毒藥物。

本研究結(jié)果可為人工養(yǎng)殖過(guò)程中的綠鰭?cǎi)R面鲀受精卵孵化時(shí)消毒藥物的選擇提供指導(dǎo)，將對(duì)提高受精卵健康出苗率具有一定的積極意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]上海市水產(chǎn)研究所資源室.綠鰭?cǎi)R面鲀[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào)，1975（8）：29-30.

[2]許成玉. 綠鰭?cǎi)R面鲀[J]. 海洋漁業(yè)，1984（1）：6.

[3]徐大鳳，劉 琨，王鵬飛，等. 綠鰭?cǎi)R面鲀肌肉營(yíng)養(yǎng)成分分析和營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)[J]. 海洋科學(xué)，2018，42（5）：122-129.

[4]丁民權(quán).東海綠鰭?cǎi)R面鲀?nèi)后w及其分布[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1994，18（1）：45-56.

[5]許學(xué)龍，鄭元甲，劉松.東、黃海綠鰭?cǎi)R面鲀的資源評(píng)估[J]. 海洋與湖沼，1992，23（6）：651-656.

[6]張家男. 綠鰭?cǎi)R面鲀的生殖調(diào)控與苗種繁育技術(shù)[D]. 青島：中國(guó)海洋大學(xué)，2011.

[7]關(guān) 健，陳志信，張家男，等. 人工培育條件下綠鰭?cǎi)R面鲀Thamnaconus modestus胚胎發(fā)育的研究[J]. 海洋科學(xué)進(jìn)展，2011，29（4）：498-505.

[8]關(guān) 健，劉洪軍，鄭永允，等. 綠鰭?cǎi)R面鲀外部器官的早期發(fā)育[J]. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，2012，33（4）：26-33.

[9]Muroga K. Viral and bacterial diseases of marine fish and shellfish in Japanese hatcheries[J]. Aquaculture，2001，202（1/2）：23-44.

[10]夏文偉，曹海鵬，王浩，等. 彭澤鯽卵源致病性水霉的鑒定及其生物學(xué)特性[J]. 微生物學(xué)通報(bào)，2011，38（1）：57-62.

[11]吳建紹，林克冰，何麗斌，等. 九種藥物對(duì)斜帶石斑魚(yú)受精卵孵化率的影響[J]. 水產(chǎn)科學(xué)，2012，31（12）：697-702.

[12]孔祥迪，陳 超，李炎璐，等. 4種常用消毒藥物對(duì)棕點(diǎn)石斑魚(yú)（♀）×鞍帶石斑魚(yú)（♂）受精卵孵化的影響[J]. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，2014，35（5）：122-127.

[13]楊志強(qiáng)，李瀟軒.4種常用消毒藥物對(duì)錦鯉受精卵孵化的影響[J]. 水產(chǎn)養(yǎng)殖，2018，39（6）：1-3.

[14]潘魯青. 幾種消毒劑對(duì)中國(guó)對(duì)蝦受精卵和無(wú)節(jié)幼體的影響研究[J]. 海洋科學(xué)，1997，21（1）：7-9.

[15]孟思妤，孟長(zhǎng)明，陳昌福.“菌毒消”消毒對(duì)魚(yú)類(lèi)受精卵孵化率的影響[J]. 漁業(yè)致富指南，2011，14（19）：78-79.

[16]于頤光，王 瑞. 甲醛暴露的健康危害[J]. 預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2015，21（2）：130-133，136.

[17]杜佳垠. 過(guò)氧化氫作為魚(yú)卵水霉病防治藥物的應(yīng)用[J]. 河北漁業(yè)，2004，32（1）：33-35.

[18]Rasowo J，Okoth O E，Ngugi C C. Effects of formaldehyde，sodium chloride，potassium permanganate and hydrogen peroxide on hatch rate of African catfish Clarias gariepinus eggs[J]. Aquaculture，2007，269（1/2/3/4）：271-277.劉力源，盧龍飛，常麗榮，等. 低溫對(duì)南北越冬后皺紋盤(pán)鮑的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，48（20）：195-199.