□ 陳 梅 黃家瑞 貴州省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗檢測院 董 睿 貴州中煙工業(yè)有限責任公司技術(shù)中心

我國傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品常具有取材自然、價格高昂的特點，高昂的售價導致了摻假造假手段層出不窮，讓消費者難于分辨；而天然的取材也使得通過分子生物學方法檢測DNA 鑒定產(chǎn)品真?zhèn)问强尚蟹椒ㄖ弧?/p>

為初步了解貴陽市售傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品的真實性，本研究安排專業(yè)抽樣人員對上述產(chǎn)品進行隨機少量抽樣，依據(jù)SN/T 3957—2014《冬蟲夏草真?zhèn)舞b別 實時熒光PCR 方法》、SN/T 3033—2011《燕窩的分子生物學鑒別方法 實時熒光PCR 法和雙向電泳法》第一法、SN/T 3589—2013《出口食品中常見魚類及其制品的鑒偽方法》等標準方法，設(shè)計相關(guān)DNA 引物探針進行檢測，結(jié)果分析如下。

1 樣品

樣品均為市場隨機抽樣，抽樣范圍為產(chǎn)品標簽明示以蟲草、雪蛤、燕窩、鹿茸、海參和花膠等為主要原料的食品。

2 方法

2.1 取樣、制樣

按表1 依次將樣品編為1 ～18 號，樣品的取樣和前處理按SN/T 1194—2014 執(zhí)行，進行雙平行檢測。

2.2 DNA 提取

DNA 提取試劑盒為Toyobo Mag-Extractor?Genome，樣 品DNA 提 取后，用Thermofisher NanoDrop One進行DNA 純度和濃度測定，若1.6 ＜OD260/280＜1.8 則進行后續(xù)實驗，否則重新進行DNA 提取；濃度若低于20 ng/μL， 則 用Thermofisher SPD 1010 真空濃縮DNA 濃度至20 ng/μL以上，若高于50 ng/μL，超純水釋至50 ng/μL 以下。

2.3 檢測方法

如表1、2 所示。熒光PCR 試劑為Toyobo Thunderbird qPCR Mix，熒光PCR 體系配置及反應參數(shù)按試劑盒說明書，用熒光PCR 儀ABI 7500 Fast 檢測。

對照組：陽性對照為采購的可明顯確認物種形態(tài)的個體或組織，如蟲草株、林蛙干、雨燕標本、鹿茸枝、干海參與鮮魚，提取其DNA 進行檢測。陰性對照為植源性DNA、空白對照為3dH2O 超純水。

表1 食品種類及其檢測方法

3 結(jié)果

如圖1 所示，18 批次樣品均具有明顯熒光增長曲線，Ct值＜30，表明均檢出其關(guān)鍵成分。陽性對照也具有明顯熒光增長曲線，且15＜Ct值＜30；陰性對照、空白對照無明顯熒光增長曲線，且Ct值≥40。

圖1 樣品檢測結(jié)果

1 ～3 為蟲草樣品的蟲草源性檢測結(jié)果，4 ～6 為雪蛤樣品的林蛙源性檢測結(jié)果、7 ～9 為燕窩樣品的燕源性檢測結(jié)果，10 ～12 為鹿茸樣品的鹿源性檢測結(jié)果，13 ～15 為海參樣品的海參源性，16 ～18 為花膠樣品的魚源性檢測結(jié)果。

4 討論

4.1 檢出率

本研究中所抽的在售傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品中均檢出含有標示內(nèi)容所述關(guān)鍵成分，可初步估計本地市場上該類產(chǎn)品在真實性上表現(xiàn)較好。但由于這些傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品售價高昂，限制了所抽樣品的批次數(shù)，因此在代表性上受到影響。這也體現(xiàn)了目前在監(jiān)抽過程中遇到的矛盾之一：一方面，隨著消費水平的提升，傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品消費量快速增長，在利益驅(qū)動下，傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品成為了摻假造假的重災區(qū)，加之其通常具有原料罕見或是深加工品的特點，消費者又難于通過感官鑒別摻假造假，導致了傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品的質(zhì)量檢測和真?zhèn)舞b別成為消費者關(guān)心的熱點之一；另一方面，傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品的監(jiān)抽數(shù)量和覆蓋面通常會受到經(jīng)費限制，難于全面揭示其市場情況。

4.2 檢測方法

通過食品分子生物學方法鑒定傳統(tǒng)高檔營養(yǎng)保健品中主要源性成分，目前是主流技術(shù)手段之一，但仍有一些不足。①適用范圍限制：如阿膠、魚油等熬制藥膏，DNA 損失大，以DNA 為標靶的PCR 檢測法通常存在假陰性，應采取其他技術(shù)手段進行檢測，如用液質(zhì)檢測耐高溫的特殊肽段。②檢測對象限制：如蟲草、雪蛤、花膠等產(chǎn)品，因野生與馴化、品種和產(chǎn)地等方面的不同價格差異巨大，但在DNA序列上卻無明顯差異，PCR 檢測，只能揭示其價值底限。③定性檢測限制：對于蟲草制劑、雪蛤油、花膠等不保留原材料形態(tài)的產(chǎn)品，由于當前PCR檢測法僅作定性使用，在定量使用上仍存在許多難于克服的實際局限，只能證實其部分真實性。