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        不同濃度五倍子提取液對變形鏈球菌影響的體外研究

        2020-11-20 06:54:20
        中國當代醫(yī)藥 2020年29期
        關(guān)鍵詞:五倍子齲病鏈球菌

        余 晶 鄧 蔚

        南昌市第一醫(yī)院口腔科,江西南昌 330008

        齲病是口腔臨床常見和多發(fā)的細菌性疾病,我國的平均患齲率在38%左右,兒童的患齲率可高達76.6%[1-2]??谇坏闹饕慢x菌種為變形鏈球菌,參與齲病的發(fā)生與發(fā)展,并且在早期產(chǎn)生菌斑生物膜的過程中起到不可忽視的作用[3]。因此,對菌斑的產(chǎn)生進程進行有效抑制,阻礙變形鏈球菌等致齲菌的出現(xiàn)、繁殖可有效防治齲病。當前,氯已定、氟化物等在口腔領域內(nèi)是公認的有較強抗菌能力的藥物,若長期使用會造成口腔菌群紊亂,口苦、著色等不良反應,具有一定的局限性[4]。五倍子越來越被廣泛用于齲病的防治中,但其濃度的選擇不盡相同。本研究回顧性分析100 例齲病患者的臨床資料,探討不同濃度五倍子提取液對變形鏈球菌的影響,現(xiàn)報道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        回顧性分析2015年6月~2019年1月于我院治療的100 例齲病患者的臨床資料,根據(jù)患者治療方式的不同將其分為A 組(n=40)、B 組(n=30)和C 組(n=30)。A 組中,男20 例,女20 例;年齡6~25 歲,平均(12.16±2.09)歲;病程1~5年,平均(2.50±0.49)年。B組中,男15 例,女15 例;年齡5~26 歲,平均(12.11±2.14)歲;病程1~6年,平均(2.52±0.44)年;C 組中,男16 例,女14 例;年齡6~25 歲,平均(12.15±2.10)歲;病程1~4年,平均(2.54±0.46)年。三組的一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

        納入標準:①患者均經(jīng)臨床確診為齲?。虎诨颊卟v資料完整。排除標準:①合并其他口腔疾病者;②患傳染性疾病者;③口腔嚴重感染者;④患有精神及意識障礙,不能配合采集口腔唾液者。

        1.2 方法

        A 組患者使用院內(nèi)自制的含氟漱口液漱口,使用中性或者酸性氟化鈉配方,0.2% NaF(900 mg/LF-),10 ml/次,含漱1 min 后吐出,半小時內(nèi)不進食或漱口,1 次/周。

        B 組患者使用液體二倍稀釋法稀釋為16 mg/ml濃度的五倍子提取液漱口,10 ml/次,含漱1 min 后吐出,半小時內(nèi)不進食或漱口,1 次/周。五倍子提取液的提取方法:五倍子可購于中藥材市場;將1 kg 五倍子粉碎后置于60~70℃下用3 L 去離子水進行10 h 的水浴,并多次振搖、過濾,合并濾液,將活性碳加入其中脫色、過濾,直至濾液濃縮為稠膏狀,獲取五倍子原藥;置入95%乙醇中后進行攪拌溶解、過濾,乙醇液減壓濃縮得類白色粉末狀物,然后冷凍干燥,獲取五倍子水提取物純品干粉;依據(jù)具體需求配制不同濃度五倍子水提取物溶液,分裝后鈷(Co)-60 照射備用,并放于棕色玻璃瓶4℃下避光儲存[5]。

        C 組患者使用液體二倍稀釋法稀釋為32 mg/ml濃度的五倍子提取液漱口,10 ml/次,含漱1 min 后吐出,半小時內(nèi)不進食或漱口,1 次/周。五倍子提取液的提取方法同B 組。

        三組患者均連續(xù)治療3 個月,并進行為期半年的隨訪。

        1.3 觀察指標及評價標準

        比較三組的細菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)、不良反應發(fā)生情況及隨訪期間復發(fā)情況。

        ①變形鏈球菌菌落數(shù):分別于治療前后取患者口腔唾液制作細菌培養(yǎng)基,將口腔唾液樣本在BHI 瓊脂培養(yǎng)基上接種,放于37℃恒溫厭氧箱(85% N2,10%H2,5% CO2)中培養(yǎng)24 h;選取單克隆菌株轉(zhuǎn)種于內(nèi)有5 ml BHI 培養(yǎng)液試管內(nèi),放于37℃YQX-Ⅲ型號的恒溫厭氧箱中(上海喬躍電子科技有限公司)持續(xù)培養(yǎng)24 h,制備菌懸液,調(diào)整濃度為100 CFU/ml 備用。對變形鏈球菌菌落數(shù)進行計數(shù),每組實驗重復3次,取平均值。②不良反應總發(fā)生率:統(tǒng)計并比較三組患者治療期間口腔神經(jīng)損傷、氟牙癥、氟中毒等并發(fā)癥總發(fā)生率。③復發(fā)率:統(tǒng)計并比較三組患者隨訪期間齲病復發(fā)情況,齲病治愈后又開始發(fā)展為淺齲(外表白堊色或黑褐色,探之有粗糙感或表面缺損、質(zhì)地松軟),或出現(xiàn)自覺癥狀(對冷、酸、熱、甜可出現(xiàn)激發(fā)性痛,刺激去除,癥狀消失)為復發(fā)。

        1.4 統(tǒng)計學方法

        采用SPSS 20.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析,計量資料用均數(shù)±標準差(±s)表示,三組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用獨立樣本t 檢驗,組內(nèi)比較采用配對樣本t 檢驗; 計數(shù)資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗,以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 三組治療前后細菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)的比較

        治療前,三組細菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后,三組細菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)均少于治療前,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);治療后,C 組的細菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)少于A、B 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05); 治療后,B 組細菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)少于A 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(表1)。

        表1 三組治療前后細菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)的比較(CFU/ml,±s)

        表1 三組治療前后細菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)的比較(CFU/ml,±s)

        “-”表示未測定,無數(shù)據(jù)

        組別 治療前 治療后 t 值 P 值A 組(n=40)B 組(n=30)C 組(n=30)F 值P 值1325.25±200.04 1300.27±220.25 1315.27±210.66 0.122 0.885 6.618 7.058 15.532 0.000 0.000 0.000 tC 組與A 組比較值PC 組與A 組比較值tC 組與B 組比較值PC 組與B 組比較值tB 組與A 組比較值PB 組與A 組比較值------1056.98±160.33 956.66±150.33 622.75±123.55 78.200 0.000 12.217 0.000 8.788 0.000 2.823 0.006

        2.2 三組患者不良反應總發(fā)生率的比較

        三組患者均未出現(xiàn)氟中毒,C 組患者治療期間的不良反應總發(fā)生率低于A 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);B 組患者治療期間的不良反應總發(fā)生率低于A組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);C 組患者治療期間的不良反應總發(fā)生率與B 組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(表2)。

        表2 三組患者不良反應總發(fā)生率的比較[n(%)]

        2.3 三組患者復發(fā)率的比較

        C 組患者隨訪期間的復發(fā)率為0.00%(0/30),低于A 組的20.00%(8/40),差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.774,P=0.009);B 組患者隨訪期間的復發(fā)率為3.33%(1/30),低于A 組,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.250,P=0.039);C組患者隨訪期間的復發(fā)率與B 組比較,差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.017,P=0.313)。

        3 討論

        齲病是口腔臨床常見和多發(fā)的細菌性疾病,是導致中國人失牙的第二大病因[6]。引發(fā)口腔疾病的主要致齲菌為變形鏈球菌、黏性放線菌、血鏈球菌等。其中變形鏈球菌在齲病的產(chǎn)生中起到最為主要的作用,在早期產(chǎn)生菌斑生物膜中作用也十分明顯。一般而言,沒有致齲菌,就不會引起齲病。菌斑生物膜這種特定的生態(tài)環(huán)境是致齲菌賴以生存的基礎,因此對菌斑的形成進行控制,對變形鏈球菌等致齲菌的生長繁殖進行有效的抑制能有效防治齲病[7]。

        以往臨床多使用氟化物防齲,氟可以較為明顯的降低患齲率,是當前全球范圍內(nèi)公認的最有效的防齲手段之一[8]。但如果對水、牛奶及食鹽中的有效濃度不能嚴格進行控制會引發(fā)氟牙癥、氟骨癥等,且長時間使用含氟牙膏會產(chǎn)生耐氟菌株,不利于防齲。因此,尋求一種無毒副作用并具有防齲功能的方式來防治齲病十分重要。中草藥為自然生藥,其抗菌作用一般比抗生素和化學藥劑弱,但對機體副作用小,有著較弱的耐藥性,且對需氧菌以及厭氧菌抗菌效果好,故用中草藥治療感染性疾病有較大的優(yōu)勢[9-10]。其中五倍子對細菌的抑制作用早已得到證實,在口腔領域中的應用已備受關(guān)注。五倍子具有斂肺降火、 澀腸止瀉、收濕斂瘡等功效,抗菌性能好,且毒副作用相對較小[11-12]。同時五倍子提取物不但能抑制致齲菌,也能對牙齒硬組織產(chǎn)生影響。因為五倍子中主要化學成分為鞣質(zhì),有抑制細菌、絡合、抗氧化等多重功效,口腔科學者們將五倍子用于口腔領域,發(fā)現(xiàn)其對各種口腔常見致病菌有抑制作用,同時能夠抑制脫礦,促進再礦化[13-14]。且有體外和動物實驗研究表明在五倍子對齲病防治、牙周病治療、根管消毒等方面有著巨大的潛力[15]。本研究結(jié)果顯示,治療后,三組細菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)均少于治療前,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);治療后,B、C 組細菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)少于A 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);治療后,C 組細菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)少于B 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);B、C 組患者治療期間的不良反應總發(fā)生率均低于A 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);B、C 組患者隨訪期間的復發(fā)率均低于A 組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。提示32 mg/ml的高濃度五倍子提取液用于齲病患者的臨床治療中,能有效減少變形鏈球菌菌落數(shù),對變形鏈球菌的抑菌作用更強,且能有效降低不良反應總發(fā)生率以及復發(fā)率,安全性較高,治療效果較好。

        綜上所述,在齲病患者中使用32 mg/ml 高濃度五倍子提取液的抑菌效果較好,能有效提高抑制鏈球菌的效果,降低不良反應發(fā)生率以及復發(fā)率,安全性較高。

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