汪彤
食用農(nóng)產(chǎn)品是人們賴(lài)以生存和發(fā)展的基礎(chǔ),?涉及種植業(yè)、林業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)等,與人們的生活飲食有著密切的聯(lián)系?;诖?,農(nóng)產(chǎn)品安全問(wèn)題對(duì)人們的健康會(huì)產(chǎn)生一定的影響。隨著經(jīng)濟(jì)水平的不斷發(fā)展和生活水平的日漸提高,人們對(duì)農(nóng)產(chǎn)品安全也提出了更高的要求,食用農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)獸藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)也在不斷更新和完善。
一、酶抑制法
目前,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的應(yīng)用較為廣泛,同時(shí)也是農(nóng)藥殘留毒性最高的。這兩類(lèi)農(nóng)藥能夠抑制昆蟲(chóng)神經(jīng)中樞和周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性,使神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿不斷積累,影響正常傳導(dǎo),導(dǎo)致昆蟲(chóng)中毒死亡。因此可以通過(guò)提取蔬果中的農(nóng)藥殘留成分,判斷膽堿酯酸酶是否有抑制性。農(nóng)藥殘留抑制實(shí)驗(yàn)離不開(kāi)底物和顯色劑的加入,并結(jié)合所測(cè)定酶反應(yīng)透光率的變化,對(duì)以上兩類(lèi)農(nóng)藥中的總殘留量進(jìn)行測(cè)定。常用的檢測(cè)方法包括比色皿法和試紙法。
1.比色皿法。(1)抽取2克的蔬果樣品,剪碎后放到樣品杯中;配置10毫升緩沖液,運(yùn)用移液槍加入樣品杯中,進(jìn)行2分鐘震蕩提取,用濾紙過(guò)濾提取液,得到樣品待測(cè)液。(2)充分利用移液槍?zhuān)瑢?.5毫升待測(cè)液放入比色皿中,再加入酶和顯色劑,將比色皿上端封住,搖晃10分鐘;然后放在預(yù)熱好的儀器中進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)檢測(cè)儀器讀數(shù),從而獲取檢測(cè)結(jié)果。
2.卡片試紙法。(1)取5克蔬果作為樣品,剪碎后放入樣品杯中;配好10毫升緩沖液,充分利用移液槍將緩沖液放入樣品杯中,蓋上樣品杯蓋進(jìn)行震蕩,震蕩時(shí)間為2分鐘。(2)提取2滴在藥片上,進(jìn)行恒溫反應(yīng),恒溫溫度要在37度以下,反應(yīng)時(shí)間10分鐘;沿中央線(xiàn)對(duì)折試劑卡,在恒溫下反應(yīng)3分鐘,使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng);將試劑卡打開(kāi),觀察白色藥片的顏色變化,根據(jù)儀器對(duì)顏色提供的標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)肉眼對(duì)樣品的農(nóng)藥殘留情況進(jìn)行判定。
二、免疫分析法
免疫分析法的化學(xué)檢測(cè)器為抗體,定性和定量檢測(cè)化合物、酶和蛋白質(zhì),主要是識(shí)別抗原抗體異性和分析結(jié)合反應(yīng)。免疫分析法的主要優(yōu)點(diǎn)是:方便快捷,有著較強(qiáng)的特異性、較高的靈敏度,安全可靠等。在免疫實(shí)驗(yàn)中用到的標(biāo)記物和檢測(cè)方法是不同的,比如放射免疫分析技術(shù)和免疫酶技術(shù)等。
1.放射免疫分析技術(shù)。在快速檢測(cè)藥物殘留時(shí),放射免疫分析法采用的是放射性受體競(jìng)爭(zhēng)原理,能夠?qū)㈣奉?lèi)藥物總量檢測(cè)出來(lái)??捎糜跈z測(cè)蝦、飼料和豬尿樣中的璜胺類(lèi)殘留,并對(duì)此進(jìn)行深入研究,將璜胺類(lèi)殘留放射免疫分析法建立出來(lái)。與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比,放射免疫分析法能夠更好地解決單種磺胺類(lèi)藥物殘留檢測(cè)等問(wèn)題。
2.免疫酶技術(shù)。酶免疫法的典型代表試驗(yàn)是酶聯(lián)免疫吸附(ELISA),主要是將抗原抗體反應(yīng)與酶對(duì)底物的高度催化反應(yīng)相結(jié)合,并進(jìn)行廣度測(cè)定。在檢測(cè)過(guò)程中,酶催化的作用是高度放大免疫反應(yīng)效果,而且多種酶分子每分鐘生成的產(chǎn)物較多,能夠進(jìn)行定性和定量分析,從而達(dá)到良好的檢測(cè)效果。