陸鳳云 吳云娟 張曉軍

（南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院，江蘇南京 210029）

復發(fā)性流產（RSA）是常見的生殖醫(yī)學疾病之一，在2016年發(fā)布的復發(fā)性流產診治的專家共識[1]中，將連續(xù)三次或三次以上的自然流產現象稱為復發(fā)性流產。育齡婦女發(fā)生RSA的概率高達5%[2]。遺傳異常、解剖結構異常、內分泌異常、自身免疫異常都可能導致RSA。文獻報道[3]，免疫功能紊亂導致的RSA與患者體內存在抗磷脂抗體（APL）密切相關，特別是APL譜中的抗β2-糖蛋白1抗體（anti-β2-GP1）、抗心磷脂抗體（aCL）。本研究通過對RSA患者血清中的anti-β2-GP1、aCL的定量檢測，探討兩種抗體對RSA的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年12月就診于南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院的RSA患者282例，年齡20～43歲，平均年齡（30.1±4.7）歲。并選取同期66例健康體檢者作為對照組，年齡21～40歲，平均年齡（28.6±3.7）歲。

納入標準：①RSA組患者均符合復發(fā)性流產的診斷標準，無免疫治療史。②對照組均無自然流產史，未接受藥物治療。排除標準：①伴有自身免疫病、血液病患者。②伴有婦科器質性病變患者。③伴有高血脂、房顫等容易引起血栓性疾病患者。本研究已經過南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院倫理委員會審批，入組人員均知情同意，自愿參加本研究。

1.2 方法

采集所有研究對象靜脈血3～5 mL，離心5 min（離心力3 000 r/min），分離血清后，采用酶聯接免疫吸附劑測定（ELISA）法進行anti-β2-GP1抗體、aCL抗體檢測，美國Bio- RAD 680酶標儀進行ELISA結果判讀。anti-β2-GP1抗體試劑盒來自德國歐蒙公司，aCL抗體試劑盒來自美國ZEUS SCIENTIFIC，INC公司。

1.3 判定標準

聯合檢測時，anti-β2-GP1、aCL中有一項水平超過臨界值，判斷檢測結果為陽性。兩項指標水平均低于臨界值時，判斷檢測結果為陰性。

1.4 統(tǒng)計學分析

數據使用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析，計數資料用[例（%）]表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者aCL、anti-β2-GP1血清結果比較

RSA組患者中，38例患者anti-β2-GP1陽性，陽性率為13.48%；26例患者aCL陽性，陽性率為9.22%。對照組中，2例anti-β2-GP1陽性，陽性率為3.03%；1例aCL陽性，陽性率為1.52%。RSA組的anti-β2-GP1、aCL陽性率均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者anti-β2-GP1、aCL血清結果比較[例（%）]

2.2 RSA組anti-β2-GP1、aCL單一檢測和聯合檢測陽性率對比

單一檢測時，anti-β2-GP1的陽性檢出率為13.48%，aCL的陽性檢出率為9.22%。聯合檢測時，陽性檢出率為18.08%，陽性率有了顯著提高。特別是單一檢測antiβ2-GP1的陽性率與聯合檢測的陽性率差異有統(tǒng)計學意義（P=0.02）。這表明，聯合兩種抗體的檢測對RSA的診斷更有應用價值，對比結果見表2。

表2 RSA組aCL、anti-β2-GP1單一檢測和聯合檢測陽性率對比[例（%）]

3 討論

復發(fā)性流產是連續(xù)三次或三次以上在妊娠28周之前出現胎兒丟失的現象，這給女性帶來極大的生育困擾。RSA發(fā)病因素復雜多樣而且缺乏特異性表現，近年的生殖免疫研究表明[4]：妊娠12周之前出現的早期流產與免疫功能紊亂和血栓前狀態(tài)有關。免疫功能紊亂的因素主要包括非特異性自身抗體和組織特異性自身抗體。非特異性自身抗體有抗心磷脂抗體、抗β2-GP1抗體、抗dsDNA抗體等。RSA患者血清檢測到非特異性自身抗體陽性，是RSA重要的且可以治療的病因之一。在復發(fā)性流產診治的專家共識中推薦[5]，有條件的醫(yī)療機構可對病因不明的RSA患者進行自身抗體的篩查。

β2糖蛋白1是一種肝細胞分泌、廣泛存在于人血漿中的糖蛋白，是抗凝過程順利進行不可或缺的物質。一旦體內出現抗β2糖蛋白1抗體，抗體與β2糖蛋白1發(fā)生特異性結合，形成β2-GP1/anti-β2-GP1復合物[6-7]，抗原抗體復合物可活化血小板、內皮細胞等，干擾正常凝血過程形成血栓。另一方面，抗β2-GP1抗體也可直接作用于胎盤滋養(yǎng)細胞[8]，引起妊娠終止。本研究中的282例RSA患者中38例出現anti-β2-GP1陽性，與對照組存在顯著的差異，證實了anti-β2-GP1陽性是RSA的危險因素之一，對RSA的病因診斷有重要的價值。

在RSA治療方面，目前抗磷脂抗體導致的RSA被認為是最可治療的因素[9]之一，在2018年發(fā)布的低分子肝素防治自然流產中國專家共識[10]中提到，對于合并APL陽性的RSA患者，應給與相應的抗凝治療。蘇麗霄[11]的研究提出：對anti-β2-GP1血清水平為15～20 RU/mL的不孕不育人群進行低分子肝素（LMWH）治療，可以明顯提高妊娠分娩率。因此在臨床工作中，我們也要關注antiβ2-GP1血清水平在15～20 RU/mL的不孕不育人 群。

抗心磷脂aCL是一簇免疫球蛋白，靶抗原為內皮細胞和血小板上帶負電荷的磷脂[12]。當機體受損時，內皮細胞和血小板的正常結構被破壞，細胞膜上的心磷脂成分暴露，與aCL發(fā)生特異性結合，干擾正常凝血過程并且累及多個系統(tǒng)。在產科可表現為反復的流產、早產、死胎等癥狀。LOCKSHIN[13]發(fā)表的文章顯示，5%～20%的RSA患者與aCL陽性有關。在本研究中，RSA組的aCL陽性檢出率為9.22%，與對照組差異存在統(tǒng)計學意義，再次證明了aCL的表達異常與RSA的發(fā)生有一定的相關性。

本研究發(fā)現：單一檢測時anti-β2-GP1的陽性率、aCL的陽性率都低于兩者聯合檢測時的陽性率，陽性率有了顯著提高。

綜上所述，聯合檢測anti-β2-GP1、aCL，能夠顯著提高RSA的檢測靈敏度，對于復發(fā)性流產的病因尋找、診斷和指導后續(xù)治療有著重要的意義。