盧小偉

慢性心力衰竭是由心功能不全導(dǎo)致的障礙性疾病。該病具有發(fā)病率高、死亡率高等特征[1-2]。目前，慢性心力衰竭的具體發(fā)病機(jī)制尚不明確，常見的病因包括心肌損傷、心肌梗死，特別是心肌損傷會降低心臟的排血量，使血管阻力增加，心率加快與心室充盈壓升高，促使多種內(nèi)源性的神經(jīng)內(nèi)分泌和細(xì)胞因子激活，導(dǎo)致心肌重構(gòu)，其中被激活的內(nèi)源性細(xì)胞因子與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)在慢性心力衰竭的發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮重要作用[3-5]。慢性心力衰竭的治療目的是改善心臟功能、改善血流動力學(xué)、延緩心室重構(gòu)的進(jìn)程[6]，當(dāng)前血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)及β-受體阻滯劑雖然能夠改善心力衰竭病人的癥狀及預(yù)后，但是仍不能完全阻斷心力衰竭的進(jìn)展[7-8]。依普利酮是新醛固酮受體，與常規(guī)藥物相比，對于鹽皮質(zhì)激素受體具有較高的選擇性，而對于雄激素、雌激素的作用則較弱[9-10]。已有研究顯示，依普利酮可明顯降低心力衰竭病人一級聯(lián)合重點(diǎn)事件發(fā)生率、全因死亡率與心源性猝死發(fā)生率，且安全性較好[11]，但是對病人血流動力學(xué)和運(yùn)動能力的影響尚無相關(guān)報道。本研究通過制作心力衰竭動物模型，探討依普利酮對慢性心力衰竭大鼠血流動力學(xué)和運(yùn)動能力的影響，以明確依普利酮的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 成年健康清潔級SD雄性大鼠18只，體重250～350 g，購于湖北醫(yī)藥學(xué)院實驗動物中心[實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK2018-0004]，實驗過程經(jīng)過我院動物倫理委員會審批。飼養(yǎng)環(huán)境溫度(20±2)℃，濕度60%～75%，分籠給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由飲水，通風(fēng)良好。依普利酮由江西奧勃納制藥有限公司提供(批號：20180221)。

1.2 動物分組與處理 將18只SD雄性大鼠隨機(jī)分為空白組、心力衰竭組與依普利酮組，每組6只大鼠。心力衰竭組與依普利酮組均采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心力衰竭模型，依普利酮組在心力衰竭模型建立后2周給予依普利酮20 mg/(kg·d)灌胃，連續(xù)應(yīng)用4周。

在心力衰竭模型建立中，3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠并固定，充分暴露心臟部位，將氣管插管一端插入氣管開口處，建立呼吸通道。左胸部備皮，于心臟搏動最強(qiáng)處縱向剪開皮膚，在左胸第3肋、第4 肋間開胸，鈍性分離肌肉層至胸膜，保證呼吸順暢，撕開心包膜，在左心耳與肺動脈圓錐之間用帶線縫合針橫跨心肌3 mm 左右，結(jié)扎心肌。隨后，關(guān)閉第3肋、第4 肋骨，調(diào)回潮氣量，擠壓胸廓排氣，縫合兩肋間，逐層關(guān)閉肌肉層。術(shù)后進(jìn)行抗感染干預(yù)，常規(guī)喂食、喂水。

1.3 觀察指標(biāo) ①所有大鼠在實驗0周、實驗2周與實驗6周后采用生物醫(yī)學(xué)信號采集處理系統(tǒng)同步記錄大鼠尾動脈收縮壓和舒張壓，每只大鼠每次測量3遍，取平均值。②采用右頸動脈插管入左心室在實驗0周與實驗6周檢測兩組大鼠心功能，使用生物機(jī)能實驗系統(tǒng)壓力換能器詳細(xì)記錄左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)。③在實驗0周與實驗6周使用多導(dǎo)生理記錄儀檢測大鼠左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)和左室內(nèi)壓最大下降升速率(-dp/dtmax)，可反映大鼠的運(yùn)動能力。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠一般情況 所有大鼠都存活，空白組大鼠一般狀態(tài)良好，心力衰竭組與依普利酮組大鼠在造模過程中陸續(xù)出現(xiàn)精神萎靡、口唇發(fā)紺、進(jìn)食減少、呼吸困難、活動量下降等心力衰竭表現(xiàn)。

2.2 3組大鼠不同時間點(diǎn)收縮壓、舒張壓比較 心力衰竭組、依普利酮組實驗2周、6周的收縮壓與舒張壓均明顯高于空白組(P<0.05)，依普利酮組實驗6周的收縮壓與舒張壓均明顯低于心力衰竭組(P<0.05)。詳見表1。

表1 3組大鼠不同時間點(diǎn)收縮壓、舒張壓比較(±s) 單位：mmHg

2.3 3組大鼠不同時間點(diǎn)LVEDD與LVESD比較 實驗6周，心力衰竭組與依普利酮組LVESD明顯高于空白組(P<0.05)，依普利酮組LVESD低于心力衰竭組(P<0.05)。3組LVEDD比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。詳見表2。

表2 3組大鼠不同時間點(diǎn)LVEDD與LVESD比較(±s) 單位：mm

2.4 3組大鼠不同時間點(diǎn)運(yùn)動能力比較 實驗6周，心力衰竭組與依普利酮組+dp/dtmax和-dp/dtmax值均低于空白組(P<0.05)，依普利酮組+dp/dtmax和-dp/dtmax均高于心力衰竭組(P<0.05)。詳見表3。

表3 3組大鼠不同時間點(diǎn)運(yùn)動能力比較(±s) 單位：mmHg/s

3 討 論

慢性心力衰竭是各種心臟疾病的嚴(yán)重及終末階段，也是任何心臟結(jié)構(gòu)異常和/或功能異常導(dǎo)致的心室充盈或射血能力受損的臨床綜合征[12]。慢性心力衰竭在我國的發(fā)病人數(shù)逐年增加，其5年存活率與惡性腫瘤相仿。心肌梗死致心功能受損是導(dǎo)致慢性心力衰竭最常見的原因，建立心力衰竭動物模型，對研究人類心力衰竭的病因病機(jī)具有重要意義[13]。大鼠具有易獲得、體型較小、易操作、價格低等特點(diǎn)，采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心力衰竭模型也能反映機(jī)體的心力衰竭狀況，且造模成功率高[14]。

依普利酮是由螺內(nèi)酯衍生而來，口服依普利酮后約1.5 h血漿濃度達(dá)高峰，對醛固酮受體有較高的選擇性，口服生物利用度高；肝臟代謝產(chǎn)物無藥理活性，消除半衰期為4～6 h，血漿蛋白結(jié)合率為50%[15]。已有研究顯示依普利酮能夠減少血管的炎癥反應(yīng)，依普利酮可以濃度依賴的方式抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的釋放[16]。特別是長期醛固酮增高能夠激活活性氧簇和促炎癥反應(yīng)，使醛固酮受體激活，從而改善機(jī)體的心功能。本研究結(jié)果顯示，心力衰竭組、依普利酮組實驗2周、6周的收縮壓與舒張壓都明顯高于空白組(P<0.05)，依普利酮組實驗6周的收縮壓與舒張壓明顯低于心力衰竭組(P<0.05)；實驗6周，心力衰竭組與依普利酮組LVESD明顯高于空白組(P<0.05)，依普利酮組LVESD低于心力衰竭組(P<0.05)，表明依普利酮能改善心力衰竭大鼠的心功能。既往也有研究顯示依普利酮可減輕冠狀動脈周圍的炎癥反應(yīng)，抑制左心室肥大和纖維化，改善心功能[17]，并且該藥可促進(jìn)血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)變?yōu)檠芫o張素Ⅱ，從而引發(fā)心肌重構(gòu)，也可抑制心肌的氧化應(yīng)激以及鹽皮質(zhì)激素受體激活所引起的冠狀動脈炎癥反應(yīng)[18]。 心力衰竭病人多伴隨有運(yùn)動功能的下降，所以該病的治療除了消除誘因及治療原發(fā)疾病之外還應(yīng)抑制神經(jīng)內(nèi)分泌過度激活，改善機(jī)體的運(yùn)動狀況[19]。醛固酮對腎臟有直接的損害作用，醛固酮作為腎素-血管緊張素系統(tǒng)的主要效應(yīng)分子之一，在器官纖維化的發(fā)生中發(fā)揮重要作用。醛固酮可以促發(fā)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致動脈粥樣硬化[20-21]。依普利酮具有降壓、抗動脈粥樣硬化、保護(hù)心臟和腎臟等作用，依普利酮能抑制醛固酮引起的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，明顯降低心力衰竭病人的發(fā)病率和死亡率[22-23]。本研究結(jié)果顯示，實驗6周，心力衰竭組與依普利酮組+dp/dtmax和-dp/dtmax值均低于空白組(P<0.05)，依普利酮組+dp/dtmax和-dp/dtmax值高于心力衰竭組(P<0.05)，表明依普利酮能改善病人的運(yùn)動功能。特別是依普利酮的半衰期更短，缺少有活性的代謝產(chǎn)物，也降低了引起高鉀的危險性，提高了運(yùn)動的安全性[24-25]。本研究也有一定的不足，由于心力衰竭大鼠自身的缺陷，運(yùn)動功能的指標(biāo)沒有選擇行為學(xué)判定，導(dǎo)致研究可能存在一定的偏倚；且研究的樣本量不足。

總之，采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心力衰竭模型能反映大鼠的心力衰竭狀況，依普利酮可改善慢性心力衰竭大鼠血流動力學(xué)狀態(tài)，提高心功能與運(yùn)動能力。