于遠(yuǎn)洋，周 凌，鄢長余，姜范成，胡景蓮

（大連市檢驗(yàn)檢測認(rèn)證技術(shù)服務(wù)中心，遼寧 大連 116021）

清熱化毒丸是由連翹；青黛等16味藥材組成的復(fù)方制劑。收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二冊，具有消火化毒、消腫止痛之功效，臨床上可用于治療小兒身熱煩躁，咽喉腫痛等，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有顯微鑒別及鹽酸小檗堿、靛藍(lán)及靛玉紅的TLC定性鑒別，不夠全面?；?015版《中國藥典》要求[1]，本實(shí)驗(yàn)通過TLC法鑒別黃連、青黛、菊花、玄參，為該制劑質(zhì)量的全面控制提供依據(jù)[2-3]。

1 材 料

薄層掃描儀（CAMAG）；Sartorius LE244S (賽多利斯)電子天平；雙頻數(shù)控超聲波清洗器。藥材購自亳州市中正中藥材飲片有限公司，經(jīng)大連市藥品檢驗(yàn)所胡景蓮主任中藥師鑒定，均為2015版《中國藥典》項(xiàng)下規(guī)定品種。對照藥材及對照品購自中國食品藥品檢定研究院。試劑為分析純；水為超純水。清熱化毒丸（某（遼寧）制藥有限責(zé)任公司；某股份有限公司制藥廠；本溪某制藥有限責(zé)任公司；吉林某制藥股份有限責(zé)任公司；丸重3g )

2 方法與結(jié)果

2.1 TLC定性鑒別：

（1）陰性對照溶液制備根據(jù)處方去除藥味，按工藝制成相應(yīng)陰性對照，并按各自供試品溶液制備方法制成相應(yīng)溶液。

（2）黃連

取本品3 丸，剪碎，加乙醇2 0 m L，超聲處理3 0分鐘，濾過，作為供試品溶液。取鹽酸小檗堿對照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液，另取黃連對照藥材0.25 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨溶液（6：3：1.5：1.5：0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視，結(jié)果見圖1。

圖1 黃連TLC色譜圖

（3）青黛

取本品1丸，剪碎，加氯仿10 mL，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取青黛對照藥材50 mg，加三氯甲烷5 mL，充分?jǐn)嚢?，濾過，濾液作為對照藥材溶液。另取靛藍(lán)與靛玉紅對照品加氯仿制成每1 mL各含0.5 mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述四種溶液各8；10；15；0.3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以甲苯-氯仿-丙酮（5：4：1）為展開劑，展開，取出，晾干。置日光燈下檢視。結(jié)果見圖2。

圖2 青黛TLC色譜圖

（4）菊花

取本品3丸，剪碎，加石油醚（30～60℃）20 mL，超聲處理10分鐘，棄去石油醚液，藥渣揮干，加稀鹽酸1 mL與乙酸乙酯50 mL，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。取菊花對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。再取綠原酸對照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各0.5 μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1:15:1:1:2)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，緒果見圖3。

圖3 菊花TLC色譜圖

2.5 取本品3丸

剪碎，加甲醇2 5 m L，浸泡1 小時(shí)，超聲處理3 0分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5 mL使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取玄參對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。再取哈巴俄苷對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4 μL，分別點(diǎn)于同一高效硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（12:4:1）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，置用展開劑預(yù)飽和15分鐘的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果見圖4。

圖4 玄參TLC色譜圖

3 討 論

中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)范化是現(xiàn)代中藥發(fā)展的瓶頸之一，我國現(xiàn)行中成藥標(biāo)準(zhǔn)中藥味鑒別數(shù)較少，且含量測定指標(biāo)較少。清熱化毒丸由16味藥材組成的復(fù)方制劑，原標(biāo)準(zhǔn)中僅對9味藥進(jìn)行鑒別；TLC鑒別中，原標(biāo)準(zhǔn)中僅將黃連、青黛2味藥材的部分TLC鑒別作為其質(zhì)量控制依據(jù)，故本實(shí)驗(yàn)修訂了原標(biāo)準(zhǔn)中黃連、青黛的鑒別方法，新建了玄參、菊花的鑒別方法。