李清強(qiáng)

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）會(huì)引起自身免疫性疾病。文獻(xiàn)報(bào)道，ANCA 相關(guān)性小血管炎（AASV）是一組包括韋格納肉芽腫、顯微鏡下多血管炎及特發(fā)性、壞死性、新月體性腎小球腎炎等疾病的綜合征[1]，在西方國(guó)家是最常見的自身免疫性疾病之一[2]。腎臟為本病常見和致死性受累部位，ANCA 陽性的腎炎被稱為ANCA 相關(guān)性腎炎，也稱為原發(fā)性急進(jìn)性腎小球腎炎，病情多進(jìn)展迅速，如不及時(shí)治療，往往造成不可逆的腎小球損害而導(dǎo)致終末期腎衰竭[3]。我國(guó)對(duì)此類的ANCA 相關(guān)性腎炎報(bào)道不多，近幾年來北京大學(xué)第一醫(yī)院腎臟內(nèi)科新診斷出400 多例，說明該病在我國(guó)也不少見[1，2]。ANCA 已逐漸受到重視，為了探討兒童腎病中ANCA 相關(guān)性腎炎檢出率以及ANCA 測(cè)定在ANCA 相關(guān)性腎炎早期診斷的意義，本研究對(duì)296 例腎病兒童進(jìn)行ANCA 檢測(cè)并與腎病相關(guān)的生化檢測(cè)情況進(jìn)行初步分析和探討。

1 材料與方法

1.1 樣品選擇樣品來源于2018年1月～2019年12月門診與住院的腎病兒童血清296 例，均具有腎病的一種或多種臨床癥狀或臨床已明確診斷為各種腎病。在該院體檢正常的兒童血清樣品50 例作為正常對(duì)照組，經(jīng)ANCA 檢測(cè)陰性的樣品中隨機(jī)選取50例作為陰性對(duì)照組。296 例血清樣品經(jīng)ELTSA 法測(cè)定ANCA 為陽性的37 例為ANCA 陽性組。

1.2 材料采用美國(guó)Zeus Scientific，Inc 公司生產(chǎn)的ANCA 酶免試劑盒。上海科華KHBst-360 自動(dòng)多功能酶標(biāo)儀。日本日立7170A 全自動(dòng)生化分析儀。生化檢測(cè)試劑是：Cr 試劑（日本第一化學(xué)株式會(huì)社）、Urea（中生北控生物科技股份有限公司）。

1.3 方法空腹抽血2ml，2 000rpm 離心5min 分離血清。ANCA 測(cè)定應(yīng)用ELISA 法。原理：患者血清中含有的特異的抗體與反應(yīng)板上包被的MPO 和PR-3混合抗原結(jié)合，加入酶結(jié)合物后與結(jié)合在固相上的抗體結(jié)合，經(jīng)過孵育、洗滌洗去未結(jié)合的抗體及酶標(biāo)結(jié)合物，加入底物后顯色深淺與標(biāo)本中抗體的濃度成比例。操作及結(jié)果判定嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。生化指標(biāo)（Cr、Urea）用酶法檢測(cè)，操作嚴(yán)格按日立7170A 全自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法統(tǒng)計(jì)分析用SPSS 10.0 統(tǒng)計(jì)軟件。檢測(cè)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

296 例腎病患兒臨床表現(xiàn)為腎病初期癥狀者186 例，其中血尿154 例，ANCA 陽性20 例（12.99%），浮腫32 例，陽性4 例（12.50%）。臨床診斷為腎炎42 例，ANCA 陽性9 例（21.43%），腎病綜合征68 例，陽性4 例（5.88%）。

ANCA 陽性組與ANCA 陰性組以及與正常對(duì)照在腎病生化指標(biāo)（Cr、Urea）方面比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05）。

表1 ANCA 陽性與陰性及正常對(duì)照各組之間 血清Cr、Urea 水平比較

3 討論

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（Antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）是一簇能與人中性白細(xì)胞胞質(zhì)成分反應(yīng)，并與臨床一些炎性疾病密切相關(guān)的多樣化的自身抗體。最早是在壞死性或新月型腎小球腎炎患者的血液中發(fā)現(xiàn)的，是近10 多年來發(fā)展起來的一種診斷原發(fā)性小血管炎的重要檢測(cè)項(xiàng)目[3，4]。ANCA 相關(guān)性小血管炎（ANCA associated systemic vasculitis，AASV）是西方國(guó)家最常見的自身免疫性疾病之一[5]，是一組可累及全身各臟器的疾病，也是繼發(fā)因素所致快速進(jìn)行性腎小球腎炎的常見原因[2]。本組結(jié)果顯示ANCA 在腎病患兒中檢出率達(dá)12.50%，可見兒童AASV 累及腎臟病變的可能性較大，應(yīng)引起重視。而且有文獻(xiàn)報(bào)道該病采用腎穿刺活檢證實(shí)有一定的困難，尋求一種早期診斷的指標(biāo)顯得尤為重要[3]。目前臨床已將ANCA 相關(guān)性腎炎歸入原發(fā)性系統(tǒng)性血管炎的腎損害范疇，血清中存在抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體正是本病最具特征的佐證[6]。本組研究中，ANCA 陽性組、ANCA 陰性組及正常對(duì)照組中血清的Cr、Urea 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明依靠血清生化指標(biāo)是無法鑒別更無法診斷出ANCA 相關(guān)性腎炎，但能依靠ANCA 檢測(cè)作出鑒別并對(duì)進(jìn)一步的診斷起重要作用。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1可知ANCA 陽性組Cr 水平為（73.23±139.71）μmol/L，Urea 水平為（6.82±11.91）mmol/L（SD 值較大，這是由于該組有2 例腎衰的患者樣品，其血清Cr 和Urea 含量較高而引致這種情況的出現(xiàn)）。這種情況反過來又更證明了Cr、Urea 不能反映ANCA陽性與陰性之間的差異，因?yàn)槟I衰已不是腎病早期，腎衰患者標(biāo)本可不計(jì)算在內(nèi)，那么陰陽兩組間的比較將更無差異。

本組研究還發(fā)現(xiàn)ANCA 陽性組37 例中臨床診斷為腎衰的有兩例，其發(fā)病率為5.4%（2/37），這與文獻(xiàn)報(bào)道老年患者高達(dá)91.1%相差甚遠(yuǎn)，其原因可能是兒童腎臟的代償能力較好，這提示我們ANCA相關(guān)性腎炎的疾病進(jìn)程與預(yù)后兒童與成人可有所不同，他們之間的區(qū)別尚有待進(jìn)一步的研究。

對(duì)于ANCA 相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理尚未完全清楚，在一些體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，ANCA 是通過激活毛細(xì)血管中中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞，引起溶酶菌釋放，導(dǎo)致大面積血管或組織損害；或ANCA 引發(fā)T 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫協(xié)同造成組織損傷（如造成腎小球腎炎、小血管炎等）的結(jié)果[3]。

因此，檢測(cè)血清中ANCA 對(duì)ANCA 相關(guān)性腎炎的早期診斷、治療與療效分析都有重要的臨床意義，特別是兒童患兒。兒童AASV 累及腎臟病變的可能性較高，即腎病患兒中有一部分為ANCA 相關(guān)性腎炎，血清中存在抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體是本病最具特征的佐證，其發(fā)病機(jī)制、治療及預(yù)后等有它自己的特點(diǎn)，應(yīng)引起重視。

依靠血清生化指標(biāo)無法鑒別或診斷出ANCA相關(guān)性腎炎，只能依靠ANCA 檢測(cè)；在腎病早期血清中已可檢測(cè)出ANCA，所以血清ANCA 檢測(cè)在ANCA 相關(guān)性腎炎的早期診斷中具有重要意義。