姜雨杉，劉 穎，王子龍，薛美蘭，常志尚，梁 惠,*

（1.青島大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，山東 青島 266021；2.青島大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，山東 青島 266071；3.青島大學(xué)生物醫(yī)學(xué)公共支撐平臺(tái)，山東 青島 266021）

抑郁癥作為一種常見(jiàn)的精神障礙，已被世界衛(wèi)生組織列為全球殘疾或非致命健康損失首要單一因素，它也是造成全球疾病負(fù)擔(dān)以及自殺的主要因素之一[1-3]。酒精濫用是誘發(fā)抑郁癥的關(guān)鍵危險(xiǎn)因素[4-5]，由此引發(fā)的嚴(yán)重危害已引起社會(huì)廣泛關(guān)注，并成為公共衛(wèi)生領(lǐng)域研究熱點(diǎn)。腸道黏膜屏障是防止腸道內(nèi)有害物質(zhì)入侵機(jī)體內(nèi)環(huán)境并維持其穩(wěn)態(tài)的一道重要屏障[6-8]，腸黏膜屏障完整性的破壞與炎癥性腸病、酒精性肝病等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[9-11]。多項(xiàng)研究表明，抑郁癥患者常伴有腸道屏障功能受損和腸黏膜通透性增加[12-13]。因此，修復(fù)腸黏膜損傷、減少腸滲漏，可望作為新的作用靶點(diǎn)用于抑郁癥防治。煙酰胺核糖（nicotinamide riboside，NR）作為一種VB3，主要來(lái)源于牛奶和酵母等[14]。近年來(lái)，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，NR作為一種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑具有神經(jīng)保護(hù)作用[15-17]，而神經(jīng)可塑性、神經(jīng)發(fā)生、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、神經(jīng)元死亡等都與抑郁癥的發(fā)生密切相關(guān)[18-19]。但目前關(guān)于NR對(duì)酒精性抑郁改善效果及腸黏膜屏障修復(fù)作用的研究卻鮮有報(bào)道。本研究以酒精暴露小鼠為研究對(duì)象，探討NR對(duì)其抑郁樣行為的改善效果，并系統(tǒng)觀察NR對(duì)其腸黏膜通透性的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

SPF級(jí)7 周齡雄性C57BL/6J小鼠，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006。

NR（純度96%） 湖北巨勝科技有限公司；乙醇（分析純） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；組織蛋白提取試劑盒、蛋白檢測(cè)試劑盒 江蘇碧云天生物技術(shù)有限公司；occludin及ZO-1抗體 美國(guó)Cell Signaling Technolog公司；β-actin抗體及各相應(yīng)二抗北京中山金橋生物技術(shù)有限公司；生物素（EZ-link Sulfo-NHS-Biotin） 美國(guó)Pierce Chemical公司；鏈霉親和素（Streptavidin DyLightTM488 Conjugated） 美國(guó)Thermo公司。

1.2 儀器與設(shè)備

DYY-6C電泳儀 北京六一儀器廠；JEM 1200型電子透射顯微鏡 日本JEOL公司；RM 2135型石蠟切片機(jī)德國(guó)LEICA公司；BX53熒光顯微鏡 美國(guó)Olympus公司；RT-6100型酶標(biāo)儀 美國(guó)Rayto公司；ChemiDoc化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng) 美國(guó)Bio-Rad公司。

1.3 方法

1.3.1 模型建立與分組

30 只雄性C57BL/6J小鼠，隨機(jī)分為3 組：對(duì)照組、模型組和NR干預(yù)組（NR組），每組10 只。按以下方法進(jìn)行酒精暴露和NR干預(yù)：每周一至周四8∶00～16∶00給予模型組和NR組小鼠新鮮配制的體積分?jǐn)?shù)15%乙醇水溶液自由飲用，16∶00～8∶00給予其自來(lái)水自由飲用，對(duì)照組小鼠全天給予自來(lái)水自由飲用，周五和周六切斷3 組小鼠一切水源，周日給予3 組小鼠自來(lái)水自由飲用。每天8∶00～16∶00給予小鼠光照，16∶00～8∶00剝奪小鼠光照。于每天12∶00對(duì)各組小鼠進(jìn)行灌胃處理，其中，對(duì)照組和模型組小鼠給予0.2 mL生理鹽水灌胃，NR組小鼠給予400 mg/kg mbNR灌胃。干預(yù)期間，各組小鼠自由進(jìn)食。實(shí)驗(yàn)持續(xù)10 周后，進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)。隨后禁食不禁水12 h，40 mg/kg mb戊巴比妥鈉麻醉，眼球取血，分離血清，-80 ℃凍存；留取腦組織、空腸及結(jié)腸組織，部分用于病理學(xué)觀察及滲透性實(shí)驗(yàn)，部分于-80 ℃凍存，用于后續(xù)檢測(cè)。

1.3.2 行為學(xué)檢測(cè)

所有行為學(xué)測(cè)試均于9∶00～12∶00在同一個(gè)光照微弱且安靜的房間內(nèi)進(jìn)行。于測(cè)試前2 h將小鼠引入該實(shí)驗(yàn)室以充分適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

1.3.2.1 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

于酒精暴露10 周后進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，以評(píng)估小鼠的運(yùn)動(dòng)能力以及抑郁樣行為。曠場(chǎng)裝置是一個(gè)長(zhǎng)寬高為40 cm×40 cm×30 cm的開放敞箱，內(nèi)壁全部覆蓋白色涂層，上方裝有攝像機(jī)并連接電腦，使用SMART V3.0軟件在敞箱中央標(biāo)出20 cm×20 cm的中央?yún)^(qū)域，并記錄分析小鼠的運(yùn)動(dòng)情況。每次測(cè)試前，使用蘸有體積分?jǐn)?shù)75%乙醇溶液的棉球擦拭曠場(chǎng)內(nèi)壁，以消除殘留的小鼠尿液、糞便、氣味等對(duì)待測(cè)試小鼠運(yùn)動(dòng)情況的影響。測(cè)試時(shí)，將小鼠由敞箱中央放入，適應(yīng)性探索1 min，消除小鼠對(duì)新環(huán)境的緊張感以免影響其探索運(yùn)動(dòng)。記錄小鼠隨后7 min總運(yùn)動(dòng)距離和在中央?yún)^(qū)域的停留時(shí)間。

1.3.2.2 糖水偏好實(shí)驗(yàn)

于酒精暴露前及暴露10 周后分別進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)。本研究參照文獻(xiàn)[20-21]報(bào)道的糖水實(shí)驗(yàn)方案并進(jìn)行了一定改進(jìn)。在正式測(cè)試之前，為每只小鼠提供兩瓶1 g/100 mL蔗糖溶液，持續(xù)飲用24 h后，將其中一瓶蔗糖溶液換成自來(lái)水，繼續(xù)飲用24 h，以避免小鼠對(duì)蔗糖溶液這一新鮮事物產(chǎn)生恐懼。隨后，切斷小鼠一切飲水和食物，持續(xù)24 h后，進(jìn)行糖水偏好測(cè)試。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，為每只小鼠提供一瓶1 g/100 mL蔗糖溶液和一瓶自來(lái)水使其自由飲用。并在小鼠飲用前、飲用后1 h和12 h時(shí)分別稱量瓶質(zhì)量，以計(jì)算小鼠飲用蔗糖溶液和自來(lái)水的量。于第0.5小時(shí)和第6小時(shí)，分別交換兩個(gè)瓶子的位置，以避免小鼠位置偏好對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。按下式計(jì)算小鼠糖水偏愛(ài)度。

1.3.2.3 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)

于酒精暴露10 周后進(jìn)行強(qiáng)迫游泳測(cè)試。將小鼠置于圓柱形玻璃容器中（高25 cm、直徑10 cm），水深10 cm，水溫（23±1）℃。每次實(shí)驗(yàn)持續(xù)6 min，記錄小鼠在最后4 min的運(yùn)動(dòng)情況。抑郁小鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)“不動(dòng)”狀態(tài)，主要表現(xiàn)為停止掙扎，被動(dòng)地漂浮在水中，僅通過(guò)一些輕微動(dòng)作以保持頭部浮在水面以上。本研究使用SMART v3.0軟件，將運(yùn)動(dòng)速率小于0.6 cm2/s作為小鼠“不動(dòng)”的標(biāo)準(zhǔn)，每隔0.5 s進(jìn)行一次判斷和記錄。每次強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)后，更換新鮮自來(lái)水，消除其對(duì)待測(cè)小鼠的干擾。測(cè)試結(jié)束后，將小鼠拭干，放回飼養(yǎng)籠中。

1.3.3 海馬組織病理學(xué)檢查

快速分離小鼠海馬組織，置于體積分?jǐn)?shù)10%中性甲醛固定過(guò)夜，進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋，隨后進(jìn)行連續(xù)切片，厚度為5～7 μm，脫蠟。行蘇木精-伊紅染色，中性樹膠封片，光學(xué)顯微鏡下觀察各組小鼠海馬組織形態(tài)學(xué)變化。每組觀察5 張切片，每張切片觀察5 個(gè)視野。

1.3.4 血清中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子質(zhì)量濃度檢測(cè)

采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組小鼠血清中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）質(zhì)量濃度，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作。

1.3.5 腸黏膜通透性檢測(cè)

1.3.5.1 血清脂多糖質(zhì)量濃度檢測(cè)

采用ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組小鼠血清中脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）質(zhì)量濃度，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作。

1.3.5.2 空腸及結(jié)腸組織細(xì)胞連接裝置超微結(jié)構(gòu)觀察

迅速留取小鼠空腸及結(jié)腸1 mm×2 mm組織塊，生理鹽水漂洗，體積分?jǐn)?shù)2.5%戊二醛溶液固定。24 h后采用pH 7.2 PBS漂洗3 次，體積分?jǐn)?shù)1%鋨酸溶液固定80 min，雙蒸水漂洗后，梯度丙酮脫水，環(huán)氧樹脂包埋。制備半薄切片用于組織定位，將定位后的樣品塊以70 nm厚度切片，質(zhì)量分?jǐn)?shù)3%醋酸雙氧鈾染色30 min，檸檬酸鉛染色15 min，雙蒸水沖洗，于透射電子顯微鏡下觀察腸上皮細(xì)胞連接裝置并拍攝。每組觀察5 張切片，每張切片觀察5 個(gè)視野。

1.3.5.3 空腸及結(jié)腸組織滲透性示蹤實(shí)驗(yàn)

取空腸和結(jié)腸中部2 cm，將一端結(jié)扎，采用小鼠灌胃針從另一端緩慢注入2 mg/mL生物素，之后將另一端結(jié)扎。室溫孵育5 min，體積分?jǐn)?shù)4%多聚甲醛固定3 h以上，冰PBS漂洗3 次，每次3 min。將灌注樣品制備成5 μm厚度石蠟組織切片，與鏈霉親和素（1∶500稀釋）在暗室共孵育30 min。利用熒光顯微鏡觀察生物素在腸道中分布情況。每組觀察5 張切片，每張切片觀察5 個(gè)視野。

1.3.5.4 空腸及結(jié)腸組織緊密連接相關(guān)蛋白表達(dá)水平檢測(cè)

采用Western blot檢測(cè)空腸及結(jié)腸組織中occludin及ZO-l蛋白表達(dá)水平，以β-actin作為內(nèi)參，結(jié)果經(jīng)化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量檢測(cè)和圖片采集。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，多組間比較采用單因素方差分析，以±s表示，P＜0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠認(rèn)知功能損傷和行為的影響

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組小鼠的總運(yùn)動(dòng)距離和中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間較對(duì)照組分別縮短了15.9%和27.7%，NR組小鼠則較模型組分別升高了10.5%和18.5%，但3 組間比較均未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）（圖1B）。糖水偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，酒精暴露前，各組小鼠1 h和12 h的糖水偏愛(ài)度均未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）；酒精暴露10 周后，3 組小鼠1 h糖水偏愛(ài)度無(wú)明顯差異，但12 h后，模型組小鼠糖水偏愛(ài)度較對(duì)照組顯著降低了15.1%，NR組小鼠則較模型組顯著提高了21.0%（P＜0.05）（圖1C2）。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組小鼠不動(dòng)時(shí)間達(dá)到（168.6±34.4）s，與對(duì)照組（（107.9±47.4）s）相比，顯著延長(zhǎng)了56.3%，NR補(bǔ)充使小鼠不動(dòng)時(shí)間達(dá)到（95.8±24.8）s，較模型組明顯縮短了43.2%（P＜0.05）（圖1D）。

圖1 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠抑郁樣行為的影響Fig. 1 Effect of NR on depression-like behavior in mice

2.2 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠海馬組織病理學(xué)的影響

圖2 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠海馬組織病理學(xué)的影響（×400）Fig. 2 Effect of NR on hippocampal histopathology in mice (× 400)

由圖2可知，對(duì)照組和NR組小鼠海馬組織CA1區(qū)細(xì)胞形態(tài)完整規(guī)則，排列整齊有序；模型組小鼠海馬組織CA1區(qū)表現(xiàn)為部分胞體空染，細(xì)胞排列無(wú)序化，有部分不規(guī)則狀的深染細(xì)胞，提示神經(jīng)元損傷甚至死亡。

2.3 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠血清BDNF水平的影響

圖3 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠血清BDNF質(zhì)量濃度的影響Fig. 3 Effect of NR on serum BDNF level in mice

由圖3可知，模型組小鼠血清BDNF質(zhì)量濃度達(dá)到（438.9±46.7）pg/mL，與對(duì)照組（（638.1±77.3）pg/mL）相比，顯著降低了31.2%；NR干預(yù)后，小鼠血清BDNF質(zhì)量濃度達(dá)到（735.7±55.7）pg/mL，較模型組顯著增加了67.6%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，均具有顯著性差異（P＜0.05）。

2.4 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠腸黏膜通透性的影響

圖4 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠血清LPS水平的影響Fig. 4 Effect of NR on serum LPS level in mice

由圖4可知，對(duì)照組血清LPS質(zhì)量濃度為（13.2±3.0）ng/mL，模型組達(dá)到（22.5±1.8）ng/mL，較對(duì)照組顯著升高了70.5%（P＜0.05）；透射電子顯微鏡結(jié)果顯示，模型組小鼠空腸及結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接模糊，電子密度降低，中間連接縫隙異常增寬；示蹤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組小鼠空腸和結(jié)腸組織生物素示蹤劑向黏膜下層滲透（圖5）；Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)（圖6），與對(duì)照組比較，模型組小鼠空腸及結(jié)腸occludin和ZO-1蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P＜0.05）。NR補(bǔ)充使酒精暴露小鼠血清LPS質(zhì)量濃度較模型組減少，達(dá)到（17.5±0.3）ng/mL（圖4）；空腸及結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞連接裝置得到明顯修復(fù)（圖5）；腸黏膜滲透性降低；occludin和ZO-1蛋白表達(dá)水平亦出現(xiàn)不同程度升高，其中，空腸ZO-1蛋白表達(dá)水平較模型組顯著升高（P＜0.05）（圖6）。

圖5 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠腸黏膜超微結(jié)構(gòu)和滲透性的影響Fig. 5 Effect of NR on intestinal mucosal ultrastructure and permeability in mice

圖6 煙酰胺核糖對(duì)酒精暴露小鼠空腸及結(jié)腸組織occludin和ZO-l蛋白表達(dá)水平的影響Fig. 6 Effect of NR on the expression of occludin and ZO-l in jejunum and colon of mice exposed to alcohol

3 討 論

多項(xiàng)研究表明，NR作為一種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑具有神經(jīng)保護(hù)作用。王柔昕等[22]研究發(fā)現(xiàn)，NR可有效改善母嬰隔離后青春期大鼠抑郁樣行為，并提高其空間學(xué)習(xí)記憶能力。Brenner等[23]研究發(fā)現(xiàn)，與常規(guī)飼料喂養(yǎng)的母鼠相比，飼料里添加了NR的母鼠其乳汁中含有更多的BDNF，其子代的成年后代更少表現(xiàn)出焦慮和抑郁樣行為，且空間記憶力能力更強(qiáng)。Hou Yujun等[15]研究發(fā)現(xiàn)，NR可顯著地恢復(fù)AD模型小鼠神經(jīng)炎癥、突觸可塑性和DNA損傷，并改善小鼠學(xué)習(xí)記憶和運(yùn)動(dòng)功能。上述研究均表明，NR對(duì)部分中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變具有良好的修復(fù)作用，但尚不清楚其對(duì)酒精性抑郁是否同樣具有預(yù)防和保護(hù)作用。本研究以NR為干預(yù)物，通過(guò)一系列行為學(xué)、病理學(xué)和生物標(biāo)志物檢測(cè)，觀察其對(duì)酒精暴露小鼠抑郁樣行為的改善效果；并采用多種腸黏膜通透性檢測(cè)方法，探討NR改善抑郁樣行為可能的腸道屏障功能作用機(jī)制。

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、糖水偏好實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是目前評(píng)價(jià)動(dòng)物模型抑郁樣行為的常用方法[24-27]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酒精暴露導(dǎo)致了小鼠典型抑郁狀態(tài)的發(fā)生。如在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，總運(yùn)動(dòng)距離的減少及其在中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間的縮短，表明酒精暴露小鼠在面對(duì)新環(huán)境時(shí)的探索能力、好奇心及適應(yīng)能力均受到明顯影響；強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間的顯著延長(zhǎng)，表明酒精暴露小鼠表現(xiàn)出一定程度行為絕望狀態(tài)；同時(shí)，糖水偏愛(ài)度的顯著降低也提示酒精暴露小鼠欣快感的缺失。研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，NR補(bǔ)充能夠提高小鼠運(yùn)動(dòng)能力和探索行為，顯著緩解小鼠絕望、淡漠等抑郁樣行為，表明NR對(duì)酒精暴露小鼠抑郁樣行為具有一定預(yù)防和保護(hù)作用。

為了進(jìn)一步明確酒精暴露小鼠的抑郁樣狀態(tài)以及NR對(duì)其的預(yù)防和保護(hù)作用，本研究進(jìn)行了小鼠海馬組織病理學(xué)檢查及BDNF血清學(xué)檢測(cè)。海馬是抑郁癥最常累及的大腦區(qū)域，它對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸的活動(dòng)具有抑制作用，并廣泛地參與機(jī)體認(rèn)知功能和情感處理[28-29]。多項(xiàng)研究表明，抑郁癥患者存在海馬區(qū)神經(jīng)元損傷及死亡[18,30]。BDNF是在腦組織中合成的一種蛋白質(zhì)，廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)[31]。它在抑郁癥的學(xué)習(xí)記憶、認(rèn)知功能和情緒障礙等病理生理學(xué)改變的調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[32-33]。血清BDNF含量可在一定程度上反映腦組織BDNF水平，它被認(rèn)為是抑郁癥發(fā)生發(fā)展及藥物療效評(píng)價(jià)可能的生物標(biāo)志物之一[34-35]。Bus等[34]對(duì)1 751 人持續(xù)2 年的隨訪研究及Molendijk等[36]對(duì)179 項(xiàng)研究進(jìn)行的系統(tǒng)回顧和薈萃分析發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者常伴隨血清BDNF含量的顯著減少，抗抑郁治療后血清BDNF水平隨之恢復(fù)正常。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酒精暴露小鼠海馬組織出現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞損傷，且血清BDNF水平顯著降低，而NR干預(yù)后均得到明顯改善，表明除了典型的抑郁樣行為外，酒精暴露小鼠也出現(xiàn)明顯的抑郁樣病理和生理學(xué)改變，從而進(jìn)一步證實(shí)了本研究已成功建立酒精性抑郁的小鼠模型，并進(jìn)一步肯定了NR對(duì)小鼠酒精性抑郁具有一定的預(yù)防和保護(hù)作用。

近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥會(huì)伴隨腸黏膜屏障損傷[12-13]，修復(fù)腸黏膜屏障也因此成為藥物改善抑郁狀態(tài)潛在的作用靶點(diǎn)。腸黏膜上皮細(xì)胞連接裝置對(duì)于維持腸黏膜屏障的完整性至關(guān)重要[10]，主要由緊密連接、黏附連接、縫隙連接和橋粒組成[11]，其中，緊密連接是腸黏膜上皮細(xì)胞間最主要的連接方式，occludin是緊密連接中主要跨膜蛋白和功能蛋白，它與支架蛋白ZO-1及其他跨膜蛋白及黏附分子共同構(gòu)成細(xì)胞間穩(wěn)定的緊密連接體系，參與腸黏膜屏障功能調(diào)節(jié)[37-38]。LPS是腸道中革蘭氏陰性菌代謝產(chǎn)物，如腸黏膜屏障遭到破壞，腸黏膜通透性增高，LPS等有毒物質(zhì)便可大量釋放入血，引發(fā)腸滲漏及多種炎癥性疾病的發(fā)生[39-41]。本研究檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酒精暴露小鼠存在腸黏膜通透性和血清LPS異常增高的現(xiàn)象，NR補(bǔ)充使腸黏膜緊密連接等細(xì)胞連接裝置得到有效修復(fù)，滲透性降低，血清LPS含量也出現(xiàn)一定程度的下降。以上結(jié)果均表明，NR補(bǔ)充可使小鼠腸黏膜屏障損傷狀況得到有效緩解和改善，這可能是NR對(duì)小鼠酒精性抑郁發(fā)揮預(yù)防和保護(hù)作用的機(jī)制之一。

綜上，NR作為一種重要的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充成分，可有效緩解酒精暴露小鼠抑郁樣行為，其作用機(jī)制可能與NR對(duì)酒精性抑郁小鼠腸黏膜通透性的修復(fù)作用有關(guān)。這些新發(fā)現(xiàn)為合理補(bǔ)充膳食營(yíng)養(yǎng)素以改善人體健康提供了科學(xué)依據(jù)。