邵鵬

摘 要：隨著中醫(yī)藥的發(fā)展，滁菊的需求量逐年增加;滁州市滁菊生產(chǎn)基地的種植面積也不斷增加，滁菊的安全生產(chǎn)也成為了重中之重。因此，建立一種準(zhǔn)確測定滁菊中多種類型農(nóng)藥殘留的分析方法，對滁菊中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行有效的監(jiān)控，并對滁菊中農(nóng)藥殘留進(jìn)行風(fēng)險評估非常重要。

關(guān)鍵詞：滁菊;農(nóng)藥殘留;檢測

中圖分類號：S-3

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

滁菊是中國4大藥菊之首，屬于藥、茶兩用的佳品，主要產(chǎn)于安徽省滁州市南譙區(qū)和全椒縣，隨著中醫(yī)藥的發(fā)展，滁菊的需求量逐年增加;滁州市滁菊生產(chǎn)基地的種植面積也不斷增加，滁菊的安全生產(chǎn)也成為了重中之重。

在滁菊的種植過程中，常見病害有褐斑病、花葉病、葉枯病、根腐病等，常見蟲害有蚜蟲、菊天牛、葉螨、小地老虎、夜蛾等。為了應(yīng)對病蟲害，種植者使用農(nóng)藥進(jìn)行防治保證其產(chǎn)量，所以合理科學(xué)用藥非常重要。如果出現(xiàn)農(nóng)藥殘留情況，不僅影響滁菊的品質(zhì)，菊花的飲用者也會出現(xiàn)蓄積中毒風(fēng)險。根據(jù)調(diào)研，滁菊種植過程中使用的農(nóng)藥種類很多，包括有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、菊酯類、氨基甲酸酯類及煙堿類等所有農(nóng)藥種類。因此選用具有代表性的農(nóng)藥品種進(jìn)行檢測，包括一些高毒禁用或限用農(nóng)藥品種，代謝緩慢半衰期較長的農(nóng)藥品種，檢出率較高的農(nóng)藥品種等。

1 目標(biāo)檢測農(nóng)藥的選取

本研究整理出合適LC-MS/MS檢測的10種農(nóng)藥作為目標(biāo)檢測物。

2 設(shè)備和材料

儀器包括三重四級桿液質(zhì)聯(lián)用儀TQ（美國WATERS公司）;高速離心機(jī);渦旋混合儀;高速均質(zhì)器（德國IKA）;超聲波清洗器;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;氮吹儀;電子天平;多功能破壁機(jī)等。

試劑包括乙腈、甲醇、甲酸，均為色譜級（美國TEDIA公司），無水乙酸鈉、無水硫酸鎂、氯化鈉、PSA、C18、GCB、娃哈哈純凈水等。

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品為天津農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)研究所購買，純度不低于98%。

樣品所用滁菊取自滁州市全椒縣滁菊種植基地。將采集的樣品粉碎、混勻，密封后做好標(biāo)記，在-18℃條件下保存。

3 前處理實(shí)驗(yàn)過程

分別取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，置于50.00mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，制成濃度為200.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲備液。分別取10種農(nóng)藥的單個標(biāo)準(zhǔn)儲備液于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制成濃度為20.0μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。為了減少樣品基質(zhì)效應(yīng)對分析物檢測產(chǎn)生的影響，用空白樣品基質(zhì)提取液加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)混合液制成不同濃度的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

準(zhǔn)確稱取10g均質(zhì)樣品于50mL離心管中，加入4顆玻璃彈珠和15mL 1%乙酸的乙腈溶液，渦旋振蕩提取2min;將其放入-20℃冰箱中冷藏10min（根據(jù)室內(nèi)溫度決定）;從冰箱中取出后，加入1g無水乙酸鈉加4g無水硫酸鎂的混合萃取填料，迅速手搖震蕩30s至充分混勻;然后3800r/min離心3min，待凈化;將樣品進(jìn)行凈化，每毫升提取液的凈化填料分別為PSA 50mg，C18 50mg，GCB 5mg，MgSO4 150mg;準(zhǔn)確吸取6mL上清液至純化管中，渦旋30s，3800r/min離心3min后，分別各吸取1.5mL至玻璃試管中，55℃水浴氮吹至近干，待定容;分別用1mL甲醇或者1mL正己烷加丙酮（9+1）溶解玻璃試管中的殘?jiān)?，分別過親水性0.22μm PTFE濾膜后，待UPLC-MS/MS進(jìn)行分析。

4 UPLC-MS/MS上機(jī)過程

色譜柱：ACQUITY UPLC HSS（2.1mm×100mm，1.8um）;柱溫：40℃;進(jìn)樣量：1μL;流動相：A-0.1%甲酸水，B-100%甲醇。梯度洗脫條件如表2。離子源：ESI;多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）;電噴霧電壓：3000V;霧化器流速：900L/h;輔助氣流速：150L/h;離子源溫度：400℃。

5 方法論證

UPLC-MS/MS將基質(zhì)樣品通過QuEChERS法處理后得到的溶液配制成不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，選擇5個濃度點(diǎn)：5μg/kg、10μg/kg、25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg，在優(yōu)化的色譜質(zhì)譜條件下分析檢測，以色譜峰的峰面積為Y軸，以標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度為X軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)。結(jié)果在滁菊基質(zhì)中，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.990，說明線性關(guān)系良好。以信噪比（S/N）約為3時的空白樣品的添加濃度為方法的檢出限（LOD）;以信噪比（S/N）約為10時的添加水平為方法的定量限（LOQ），滁菊基質(zhì)的檢出限（LOD）為0.12～2.77μg/kg;定量限（LOQ）為0.40～9.52μg/kg，符合農(nóng)藥殘留的檢測要求;質(zhì)譜分參數(shù)如表3。

用添加回收率實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該檢測方法的準(zhǔn)確度和精密度，在滁菊樣品中添加3個不同濃度水平（10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg）農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品經(jīng)QuEChERS法處理后，在UPLC-MS/MS進(jìn)行上機(jī)檢測，每個水平實(shí)驗(yàn)反復(fù)6次。結(jié)果顯示，滁菊基質(zhì)中農(nóng)藥的平均添加回收率范圍在75.5%～115.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD在1.5%～10.5%，能夠滿足實(shí)際檢測的需求。

6 總結(jié)

通過建立滁菊中農(nóng)藥多殘留檢測分析的UPLC-MS/MS的檢測方法，該方法采用乙腈提取，QuEChERS前處理提取凈化，此方法操作非常簡單，分析速度迅速，靈敏度好，準(zhǔn)確度好。通過一系列論證表明該方法完全可以對滁菊中多種農(nóng)藥殘留進(jìn)行準(zhǔn)確的定性和定量檢測分析，可用于實(shí)際樣品的農(nóng)藥殘留檢測工作。

參考文獻(xiàn)

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（責(zé)任編輯 賈燦）