戰(zhàn)鑫

[摘要]從天然植物中提取的有效抑菌成分可用作食品的天然防腐劑，不僅能為食品調(diào)香調(diào)味，還能起到抗菌、防腐等作用。本文通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂三種天然植物提取物的防霉效果突出，且三者存在較強(qiáng)的協(xié)同作用，蛇床子∶山蒼子∶補(bǔ)骨脂為1∶1∶1的復(fù)合樣對(duì)稻谷的防霉效果極為顯著。本文進(jìn)一步將稻谷中最具代表性的黃曲霉、黑曲霉霉菌菌種作為研究對(duì)象，采用濾紙片法做體外抑菌試驗(yàn)，確定此復(fù)合植物防霉劑的具體防霉效果。結(jié)果表明，該復(fù)合樣在1∶10稀釋度時(shí)，對(duì)黃曲霉的抑菌率達(dá)到48.7%;在1∶1稀釋度時(shí)，對(duì)黑曲霉的抑制率達(dá)到52.6%。因此，可大力開(kāi)發(fā)該復(fù)合樣作為稻谷的天然防霉劑。

[關(guān)鍵詞]稻谷;植物提取物;防霉劑;復(fù)合

中圖分類(lèi)號(hào)：S482.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.202004

我國(guó)稻谷主要生產(chǎn)區(qū)和儲(chǔ)備區(qū)在長(zhǎng)江以南，而這些地方因氣候原因十分容易引起微生物及害蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖，因此糧食質(zhì)地極易產(chǎn)生劣變，從而對(duì)生產(chǎn)總量造成嚴(yán)重耗損[1-4]。目前對(duì)植物提取物防霉抑菌性的研究大都停留在植物源的水或乙醇提取物的防霉抑菌上，對(duì)以表面活性劑為溶劑的多種植物復(fù)配提取物的防霉抑菌性的研究還不多見(jiàn)[5-6]。復(fù)合植物防霉劑可以由幾種具有協(xié)同作用的提取物按最適比例復(fù)合而成，其協(xié)同作用可以彌補(bǔ)單一提取物的防霉局限性，增大抑菌力度和范圍，從而提高經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料和方法

1.1 材料和試劑

湘晚秈13號(hào)：湖南金健米業(yè)有限公司。

氯化鈉：分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;葡萄糖、瓊脂：分析純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 主要儀器

QE-200型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)：浙江屹立工貿(mào)有限公司;SB-25-12DT型超聲波清洗儀：寧波新芝生物科技股份有限公司;L530型多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)：湖南湘儀試驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司;IS-RDD3型臺(tái)式恒溫振蕩器：美國(guó)精騏有限公司。

1.3 供試菌及培養(yǎng)基

黃曲霉（A.flavus）、黑曲霉（A.niger）：中南林業(yè)科技大學(xué)食品學(xué)院微生物教研室。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 植物提取物的制備

稱(chēng)取所需無(wú)患子干粉以1∶50的料液比加入純水，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝螅?5℃境環(huán)下超聲提取1h后冷卻，3 500r/min下離心5min，取上清液避光保存?zhèn)溆谩?/p>

稱(chēng)取原料10g以1∶10的料液比加入無(wú)患子提取液或純凈水靜置1h，在35℃環(huán)境下提取3h后冷卻，3 500r/min下離心6min，取上清液煮沸2min，避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 單一植物提取物對(duì)稻谷防霉效果的研究

稱(chēng)取100g/瓶稻谷，空白組加50mL純水，對(duì)照組加20mL無(wú)患子提取液和30mL純水，試驗(yàn)組加20mL無(wú)患子或純水的植物提取物和30mL純水，每組3個(gè)平行樣，35℃恒溫培養(yǎng)48h。

1.4.3 初篩的五種防霉劑間不同組合對(duì)稻谷防霉效果的研究

將五種防霉劑分別按兩兩以及五五平分比進(jìn)行混合提取，其余試驗(yàn)條件均保持不變，分別對(duì)稻谷進(jìn)行防霉噴涂試驗(yàn)，35℃恒溫培養(yǎng)48h，觀察對(duì)比分析。

1.4.4 最佳組合的稻谷復(fù)合植物提取物使用濃度的確定

經(jīng)大量預(yù)試驗(yàn)得出，蛇床子∶山蒼子∶補(bǔ)骨脂為1∶1∶1，按1∶10的料液比進(jìn)行復(fù)合提取，再將復(fù)合液按3個(gè)濃度梯度稀釋?zhuān)?∶1、1∶10、1∶50），其他條件均不變，分別進(jìn)行防霉噴涂試驗(yàn)，48h后觀察。

2 結(jié)果與分析

2.1 稻谷復(fù)合植物防霉劑篩選結(jié)果與分析

2.1.1 無(wú)患子為溶劑的單一植物提取物對(duì)稻谷防霉效果的影響

通過(guò)觀察對(duì)比48h后不同提取液下稻谷長(zhǎng)霉情況可知，提取液對(duì)稻谷的防霉效果不顯著，對(duì)稻谷的防霉效果由優(yōu)到劣依次為蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂、知母、香葉。

2.1.2 無(wú)患子與水為溶劑的初篩植物提取物的稻谷防霉效果對(duì)比分析

24h后觀察發(fā)現(xiàn)五種水性防霉劑對(duì)稻谷的防霉效果均不顯著，且長(zhǎng)霉嚴(yán)重;五種以無(wú)患子提取液為溶劑的提取物對(duì)稻谷的防霉效果較為顯著，基本不長(zhǎng)霉。結(jié)果表明，天然植物中的有效防霉成分只有在無(wú)患子提取液這種具有表面活性物質(zhì)的溶劑中才能被完全提取出來(lái)，發(fā)揮防霉作用[7-8]。

2.1.3 初篩的五種防霉劑間不同組合對(duì)稻谷防霉效果的對(duì)比分析

按1∶1∶1∶1∶1的比例復(fù)合的蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂、知母、香葉復(fù)合樣對(duì)稻谷的防霉作用不顯著，稻谷長(zhǎng)霉嚴(yán)重，這五種樣品間至少存在2種及2種以上樣品間的拮抗作用。

觀察按1∶1的比例兩兩復(fù)合的復(fù)合樣在48h后發(fā)現(xiàn)，蛇床子與山蒼子、蛇床子與補(bǔ)骨脂、山蒼子與補(bǔ)骨脂間復(fù)合時(shí)防霉效果較為顯著，分析得出蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂間復(fù)合不會(huì)存在拮抗作用。

2.1.4 最佳組合的稻谷復(fù)合植物提取物的使用濃度確定

按1∶1∶1的比例復(fù)合的蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂提取液按3個(gè)濃度梯度稀釋?zhuān)?∶1、1∶10、1∶50），48h后觀察發(fā)現(xiàn)，原溶液對(duì)稻谷的防霉效果最好且明顯，而稀釋后的防霉劑對(duì)稻谷的防霉效果變差，說(shuō)明當(dāng)蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂按1∶1∶1的比例復(fù)合，以1∶10的料液比提取時(shí)，防霉效果最好。

2.2 稻谷復(fù)合植物提取物的抑菌效果與分析

2.2.1 黑曲霉抑菌效果與分析

不同稀釋度植物提取物在P<0.05時(shí)，對(duì)黑曲霉（A.niger）的抑制作用存在顯著性差異，其中稀釋度1∶1的復(fù)合樣對(duì)黑曲霉的抑制效果最強(qiáng)，抑制率達(dá)到52.6%。

2.2.2 黃曲霉抑菌效果與分析

不同稀釋度植物提取物在P<0.05時(shí)，對(duì)黃曲霉（A.flavus）的抑制作用存在顯著性差異，其中稀釋度為1∶10的復(fù)合樣對(duì)黃曲霉的抑制效果最強(qiáng)，抑制率達(dá)到48.7%。

3 結(jié) 論

通過(guò)對(duì)比13種植物提取物在稻谷防霉上防霉效果的差異，篩選出5種防霉效果較為顯著的防霉劑，然后對(duì)5種防霉劑進(jìn)行復(fù)配，探索防霉劑間存在的拮抗或協(xié)同作用，成功篩選研制出最為有效的復(fù)配組合為1∶1∶1的蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂復(fù)合樣，最后以黃曲霉、黑曲霉為稻谷中最具代表的霉菌菌種，做體外抑菌試驗(yàn)，論證分析復(fù)合樣的防霉抑菌效果。綜合分析比較所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)，篩選出防霉效果較為顯著的五種防霉劑為蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂、香葉、知母，將這5種防霉劑直接進(jìn)行純水提取，發(fā)現(xiàn)其對(duì)稻谷的防霉效果大為降低，說(shuō)明防霉劑中的一些有效防霉成分必須依靠無(wú)患子提取液這種具有表面活性的溶劑才能被提取出來(lái)，驗(yàn)證了以無(wú)患子提取液為溶劑提取的必要性與意義。通過(guò)對(duì)以上5種防霉劑進(jìn)行復(fù)合研究發(fā)現(xiàn)，蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂之間存在協(xié)同增效作用，將其以1∶1∶1的比例復(fù)合，按1∶10的料液比提取，防霉效果最佳。黃曲霉、黑曲霉為稻谷中最具代表性的霉菌菌種，做體外抑菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，1∶1∶1的蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂復(fù)合樣在1∶1稀釋度時(shí)，對(duì)黑曲霉的抑制率達(dá)到52.6%;在1∶10稀釋度時(shí)，對(duì)黃曲霉的抑制率達(dá)到48.7%，這一數(shù)據(jù)驗(yàn)證了蛇床子、山蒼子、補(bǔ)骨脂復(fù)合樣的有效防霉抑菌性。

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