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        乙肝肝硬化患者血清中TNF-α、IL-1β的含量與肝纖維化程度的相關(guān)性分析

        2020-06-12 03:04:34冼觀秀馬燕妮卜丹霞黃樹通
        黑龍江醫(yī)藥 2020年5期
        關(guān)鍵詞:膠原乙肝肝細(xì)胞

        冼觀秀,陳 聰,馬燕妮,卜丹霞,黃樹通

        湛江中心人民醫(yī)院,廣東 湛江 324000

        乙肝是一種由乙型肝炎病毒(HBV)感染所致的傳染病,在全球范圍內(nèi)廣泛流行,我國屬于HBV感染流行較為嚴(yán)重的地區(qū),有約9 300萬人為慢性HBV感染者,其中約3 000萬人被確診為慢性乙型肝炎(CHB),其中有10%~20%可進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化、肝癌等嚴(yán)重疾病,對人類生命健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅[1]。肝纖維化是肝硬化發(fā)生發(fā)展過程的必經(jīng)階段,其發(fā)生機制是一個比較復(fù)雜的病理過程,它與膠原和其他細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的合成與降解失衡,導(dǎo)致在肝內(nèi)過量沉積有關(guān)[2]。肝活組織病理學(xué)檢查是診斷肝纖維化的金標(biāo)準(zhǔn),但該檢查屬于有創(chuàng)性檢查,不易在臨床上開展,且隨著近年來對肝纖維化研究的深入,發(fā)現(xiàn)許多細(xì)胞因子參與了肝纖維化的過程,因此細(xì)胞因子成為臨床醫(yī)生們研究的熱點。另外有大量研究表明血清中透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)和層黏蛋白(LN)均可在一定程度反映患者肝細(xì)胞損害和肝纖維化程度[3]。因此本研究通過比較乙肝肝硬化患者與CHB患者血清中TNF-α、IL-1β的含量差異,分析它們與肝纖維化指標(biāo)的相關(guān)性,為防止CHB進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化提供相關(guān)線索。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2017年1月—2018年12月湛江中心人民醫(yī)院傳染病和肝膽科收治的45例乙肝肝硬化患者作為研究組,并選取同期45例慢性乙型肝炎患者作為對照組。根據(jù)2015年中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議上發(fā)布的《慢性乙型肝炎防治指南》(2015年版)中關(guān)于肝硬化和CHB的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷[4],排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并其他肝炎病毒感染患者;(2)伴有其他類型肝臟疾病者;(3)伴有食管胃底靜脈曲張破裂出血、肝性腦病、肝腎綜合征等嚴(yán)重并發(fā)癥者;(4)由其他原因如肝腎綜合征、酒精性肝炎等引起的肝硬化患者。兩組患者的年齡、性別等一般資料均具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)通過,且所有患者均已簽署知情同意書。

        1.2 方法

        抽取患者靜脈血5 ml,將血液標(biāo)本于常溫靜置1 h、3 500r/min離心15 min后,分離抽取上清液,-20℃保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清中TNF-α、IL-1β含量,采用熒光免疫法檢測血清中HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN含量,所有操作均嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

        數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用t檢驗,相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析法,多因素分析采用非條件logistic回歸分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組患者血清中TNF-α、IL-1β含量以及肝纖維化指標(biāo)情況

        研究組患者血清中TNF-α、IL-1β的含量明顯高于對照組,肝纖維化指標(biāo)HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN也均明顯高于對照組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表1。

        2.2 患者血清中TNF-α、IL-1β含量與肝纖維化指標(biāo)的相關(guān)性

        Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,患者血清中TNF-α、IL-1β與肝纖維化指標(biāo)(HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN)均呈直線正相關(guān)關(guān)系,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

        表1 兩組患者血清中TNF-α、IL-1β含量以及肝纖維化指標(biāo)情況(±s)

        表1 兩組患者血清中TNF-α、IL-1β含量以及肝纖維化指標(biāo)情況(±s)

        組別研究組(n=45)對照組(n=45)肝纖維化指標(biāo)tP TNF-α(pg/ml)68.86±13.83 33.42±10.10 13.88<0.01 IL-1β(pg/ml)17.87±3.86 7.61±3.15 13.81<0.01 HA(μg/L)556.92±91.25 301.38±72.34 14.72<0.01 PC-Ⅲ(μg/L)254.56±45.32 187.52±25.63 8.64<0.01Ⅳ-C(μg/L)165.87±23.58 103.53±19.85 13.57<0.01 LN(μg/L)220.94±42.18 164.58±33.65 7.01<0.01

        表2 兩組患者血清中TNF-α、IL-1β含量與肝纖維化指標(biāo)的相關(guān)性

        2.3 CHB患者發(fā)生肝硬化有關(guān)因素的非條件logistic回歸分析

        以是否發(fā)生肝硬化為因變量,以血清中TNF-α、IL-1β、HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN為自變量,行非條件logistic回歸分析結(jié)果顯示,血清中TNF-α、IL-1β、Ⅳ-C和LN是CHB患者發(fā)生肝硬化的影響因素(P<0.05),見表3。

        表3 CHB患者發(fā)生肝硬化有關(guān)因素的非條件logistic回歸分析

        3 討論

        CHB是由HBV持續(xù)感染引起的慢性肝臟炎癥性疾病。大量研究表明,HBV其實并不直接殺傷肝細(xì)胞,而是通過免疫應(yīng)答反應(yīng)對肝臟起作用,機體感染HBV后可使肝臟內(nèi)淋巴細(xì)胞增加、浸潤,產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子及炎性遞質(zhì),這些物質(zhì)雖然可在一定程度幫助機體消滅該病毒,但同時又可造成機體自身肝細(xì)胞的變性和壞死,通過長期、反復(fù)的作用,導(dǎo)致肝葉內(nèi)出現(xiàn)纖維隔、再生結(jié)節(jié),進(jìn)而使肝臟發(fā)生纖維化,若不加以控制,最終可導(dǎo)致肝硬化和(或)肝細(xì)胞癌[5]。CHB患者發(fā)生肝纖維化的過程,涉及許多不同水平的調(diào)節(jié),其主要病理特征是以膠原蛋白為主的ECM在竇周間隙的大量增生與異常沉積,而HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN是ECM的主要成分[6]。在正常情況下,機體的HA是由星狀細(xì)胞合成并通過血液循環(huán)到達(dá)肝臟,然后最終降解于在血竇內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi),但是若肝臟發(fā)生損傷,可使HA到達(dá)肝臟的數(shù)量增加且降解降低,造成其大量沉積于肝臟內(nèi)。而LN在正常肝組織中含量極少,主要分布于肝膽管、血管壁及淋巴管壁等,是基底膜的重要成分,若肝臟發(fā)生損傷,LN與IV-C合成將增加并共同構(gòu)成肝基底膜而形成纖維間隔,是肝纖維化的發(fā)生和早期肝硬化的診斷重要指標(biāo)[7]。而PC-Ⅲ是Ⅲ型膠原的前體,也是由肝星狀細(xì)胞合成的,在肝纖維化早期PC-Ⅲ水平即開始升高。大量研究表明,乙型肝炎患者血清中HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN含量均可升高,且隨著病情加重其血清中含量升高得更明顯,可反映機體肝纖維化程度[8-9]。本研究結(jié)果顯示,乙肝肝硬化患者血清中HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN含量明顯高于CHB患者,同樣也證實HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和LN可作為反映肝硬化程度的良好指標(biāo)。

        ECM的產(chǎn)生受炎癥因子等在內(nèi)的多種因素的影響,這些因素可促進(jìn)肝纖維化的形成與發(fā)展,而炎癥反復(fù)存在也是CHB患者進(jìn)展為肝硬化甚至HCC的重要因素[10]。TNF-α是主要由淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞合成及分泌的一種分子量為17KD的多肽細(xì)胞因子,它可使肝星狀細(xì)胞及纖維母細(xì)胞增殖加快,并可促進(jìn)膠原的合成以及肝纖維化的發(fā)生,另外它還能夠刺激內(nèi)毒素誘導(dǎo)IL-6、IL-8等炎癥因子的生成,進(jìn)而介導(dǎo)肝細(xì)胞炎性反應(yīng),造成肝組織微血管損傷,纖維蛋白量增加,肝細(xì)胞壞死,可導(dǎo)致CHB患者肝纖維化程度進(jìn)行性加重并可促使其發(fā)展為肝硬化[11]。而IL-1β可以通過自分泌或旁分泌方式持續(xù)活化肝星狀細(xì)胞和枯否細(xì)胞,而活化的肝星狀細(xì)胞和枯否細(xì)胞又可反過來刺激單核/巨噬細(xì)胞分泌IL-1β,導(dǎo)致IL-1β在體內(nèi)水平不斷增加,這種雙向反饋機制可使肝內(nèi)ECM的產(chǎn)生大量增加,加重肝臟炎癥及纖維化程度[12]。本研究結(jié)果顯示,乙肝肝硬化患者血清中TNF-α、IL-1β均明顯高于CHB患者,且所有患者血清中TNF-α、IL-1β含量與各項肝纖維化指標(biāo)均呈正相關(guān)關(guān)系,說明血清中TNF-α、IL-1β與肝纖維化程度有著緊密聯(lián)系。另外非條件logistic回歸分析結(jié)果也顯示,TNF-α、IL-1β、LN與IV-C是CHB患者發(fā)生肝硬化的影響因素。

        綜上所述,與CHB患者相比,乙肝肝硬化患者血清中TNF-α,IL-1β以及肝纖維化指標(biāo)含量均明顯升高,TNF-α,IL-1β與肝纖維化指標(biāo)呈正相關(guān)關(guān)系,是CHB患者發(fā)生肝硬化的影響因素,尋找有效的拮抗TNF-α和IL-1β的途徑,有助于防止CHB進(jìn)一步纖維化而導(dǎo)致肝硬化的發(fā)生。

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