李曉偉 楊偉 劉曉靜
(長治市人民醫(yī)院 山西 長治 046000)
肺結(jié)核是臨床常見的呼吸系統(tǒng)疾病之一,其早期并無典型癥狀,起病隱匿,影像學具有多樣表現(xiàn),病理學、分子生物確診率均較低,血沉等輔助性檢查,易受其他因素影響,診斷較困難[1]。因此,臨床迫切需要尋找更為有效的檢測方法。鑒于此,本研究探討結(jié)核感染T細胞檢測試驗在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值。報告如下。
選擇2016年9月—2019年1月就診于我院的疑似肺結(jié)核患者96例,其中,男性、女性患者分別為52、44例;年齡為22~84歲,平均年齡為(52.98±5.23)歲;病程為7~9個月,平均病程為(7.99±0.23)個月。所有患者均簽署知情同意書。
使用羅氏固體培養(yǎng)法培養(yǎng)分支桿菌,取0.1mL處理的痰液并在酸性改良羅氏固體培養(yǎng)基斜面上均勻種植(無菌操作),孵育(37℃);接種后1周內(nèi)觀察,若菌落生長,經(jīng)證實后則可報告抗酸分支桿菌生長,后每周觀察1次,并對菌落生長和污染情況進行記錄,若8周后仍無菌落生長,則報告陰性結(jié)果。
結(jié)核感染T細胞檢測試驗使用試劑盒(Immunotec公司),以斑點形成細胞計數(shù)。采集患者2~8ml靜脈血,加入淋巴細胞分離液,密度梯度離心分離外周血單個核細胞(PBMC),單個核細胞計數(shù),將抗原(CFP-10、ESAT-6)、AIM-V(50μl,無血清培養(yǎng)基)及PBMC(100μl)依次加入微孔培養(yǎng)板,37℃孵育16~20h,洗滌微孔板,加入酶標抗體,孵育1h(2~8℃),洗滌微孔板,加入底物反應(yīng)液(50μl),室溫避光反應(yīng)7min后終止反應(yīng),干燥2h(室溫),斑點計數(shù)。當陰性對照孔≧6個時,測試孔斑點數(shù)為陰性對照孔斑點數(shù)的2倍及以上時;當陰性對照孔斑點數(shù)為0~5個,測試孔斑點數(shù)-陰性對照孔斑點數(shù)≧6個時;當CFP-10及ESAT-6測試孔中任意一個達到以上標準則認為是陽性。
以羅氏固體培養(yǎng)法檢測結(jié)果為金標準,記錄并計算結(jié)核感染T細胞檢測試驗診斷肺結(jié)核的靈敏度、特異度及準確度。比較結(jié)核感染T細胞檢測試驗與羅氏固體培養(yǎng)法檢測結(jié)果。
96例疑似活動性肺結(jié)核患者經(jīng)羅氏固體培養(yǎng)法檢測,結(jié)果顯示:37例為陽性(活動性肺結(jié)核),59例為陰性。
以羅氏固體培養(yǎng)法檢查結(jié)果為金標準,結(jié)核感染T細胞試驗檢測診斷活動性肺結(jié)核的靈敏度為89.19%,特異度為61.02%,準確度為71.88%;結(jié)核感染T細胞試驗檢測的結(jié)果與羅氏固體培養(yǎng)法結(jié)果一致性一般(Kappa系數(shù)=0.458,0.4≤K<0.75)。見表。
表 結(jié)核感染T細胞試驗檢測及羅氏固體培養(yǎng)法檢測結(jié)果分析(n)
以往臨床診斷結(jié)核主要包括血清學檢測、培養(yǎng)、痰涂片鏡檢、結(jié)核菌臨床基因擴增法等,然而對結(jié)核病患者使用這些方法進行診斷時存在諸多缺點,如:操作復雜、檢測周期長、特異度及靈敏度較差等。
結(jié)核感染T細胞檢測試驗在臨床工作中具有較高的指導價值,尤其是缺少細菌學診斷依據(jù)的活動性結(jié)核患者,可起到補充或輔助診斷的作用。其主要使用酶聯(lián)免疫斑點技術(shù),利用CFP-10和ESAT-6作為刺激物,對結(jié)核菌致敏T淋巴細胞的結(jié)合感染進行檢測[2]。本研究通過結(jié)核感染T細胞檢測試驗對肺結(jié)核進行診斷,并對其診斷價值進行分析,結(jié)果顯示,以羅氏固體培養(yǎng)法檢查結(jié)果為金標準,結(jié)核感染T細胞檢測試驗診斷肺結(jié)核的靈敏度為89.19%,特異度為61.02%,準確度為71.88%,可見,結(jié)核感染T細胞檢測試驗可作為一種提高臨床診斷準確率的輔助診斷方法[3]。但結(jié)核感染T細胞試驗的檢測診斷結(jié)果與羅氏固體培養(yǎng)法診斷結(jié)果一致性一般,可見該診斷方法準確度中等,需與臨床資料結(jié)合進行綜合性分析。
綜上所述,在診斷肺結(jié)核時,結(jié)核感染T細胞檢測試驗具有較高的應(yīng)用價值。