傅鈺 桂靜 劉濤

(深圳市慢性病防治中心實驗研究所 廣東 深圳 518020)

根據(jù)CNAS-CL02《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則》和《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》的要求，新設(shè)備在安裝后及在常規(guī)使用中經(jīng)大規(guī)模維修或更換主要部件后，應(yīng)證實其能夠達到規(guī)定的性能標準，即需進行主要的性能驗證。這對保證臨床檢驗質(zhì)量起著重要作用。驗證后性能評價報告如下。

1.資料與方法

1.1 儀器

賽科希德SF-8100全自動凝血分析儀。

1.2 試劑

原廠配套試劑 APTT（R21D17L3）；PT（R10D18C2）；TT（R4D17L1）；Fib（R31D17K3）；原廠配套Ⅰ，Ⅱ水平質(zhì)控血漿（Ⅰ；C11D18A1；Ⅱ；C12D18C1）。

1.3 標本

我院體檢病人靜脈血，用0.109mol/L枸櫞酸鈉與全血1：9抗凝,2500 X g,離心15min,當(dāng)HCT＜20%或者＞55%時，按下列公式調(diào)整血樣與抗凝劑比例；抗凝劑用量=0.00185x血量（ml）x(100-HCT)。

1.4 方法

1.4.1精密度驗證 （1）批內(nèi)精密度：取水平Ⅰ,Ⅱ質(zhì)控標本（含正常值和病理值）的標本各一支，每支標本按常規(guī)方法連續(xù)重復(fù)檢測11次，計算后10次結(jié)果的算術(shù)平平均（±s），標準差(s)和變異系數(shù)（CV）。

（2）日間精密度：依據(jù)EP5-A3取同批次水平Ⅰ,Ⅱ質(zhì)控標本（含正常值和病理值），每日檢測2次，連續(xù)檢測20日，計算結(jié)果的算術(shù)平平均（±s），標準差(s)和變異系數(shù)(CV)。

1.4.2準確度驗證 使用衛(wèi)生部2019年發(fā)放的5個不同水平的室間質(zhì)評樣本進行檢測。其檢測結(jié)果分別與同系列儀器的室間質(zhì)評回報結(jié)果的平平均進行比較，通過公式，偏倚(%)=(測定結(jié)果-靶值)/靶值×100%，計算偏倚，評價其是否在允許范圍。

1.4.3 Fib線性驗證 SF-8100檢測原理為磁珠法。PT、APTT、TT的檢測結(jié)果為直接讀取的凝固時間，因此不適合做線性分析[1]。故只驗證以濃度為結(jié)果的Fib。參照NCCLS EP6-A選取一份接近預(yù)期上限（H）的高值標本和一份接近預(yù)期下限（L）的低值標本[2]，分別按5H，4H+1L，3H+2L，2H+3L，1H+4L，5L的關(guān)系混合而成6個不同濃度的系列評價樣本，每個樣本重復(fù)檢測3次，計算平均，將實測平均（Y）與理論值（X）作直線回歸，計算Y= bX +a驗證線性范圍。

1.4.4攜帶污染率 根據(jù)《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量體系文件編寫指南》選取一份APTT超過檢測上限的高濃度標本（H）等體積分成10個高濃度樣本，另將一份ATPP接近檢測下限的低濃度標本（L）等體積分成11個低濃度樣本，按照L1,L2,L3,H1,H2,L4，H3,H4,L5,L6,L7,L8,H5,H6,L9,H7,H8,L10,H9,H10,L11的順序進行檢測。攜帶污染指標=Mean（H-L）-Mean（L-L）應(yīng)小于3SD（L-L）。

1.4.5標本放置時間影響 分別對同一標本在采集后即時，室溫（25℃）放置4h后及冷藏（4℃）放置4h、

24h后進行測定，應(yīng)用配對t檢驗分別分析 各組間有無差異。

1.4.6參考區(qū)間驗證 本實驗室為新裝機設(shè)備，參考區(qū)間來自廠家提供的試劑說明書，需對該參考區(qū)間進行驗證。按照CLSI C28-A3的小樣本參考個體驗證[3]，選取20名健康者（男女各半，20～50歲，無服藥史及影響本研究檢測活動的疾?。?，同批檢測PT，APTT，TT，F(xiàn)ib，將測定值與廠家提供的參考區(qū)間進行比較，判斷標準R=(測定結(jié)果落在參考區(qū)間的例數(shù)/總測定例數(shù))×100%，R≥90%為合格。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，進行t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 精密度驗證

批內(nèi)及日間精密度均符合行業(yè)標準，見表1。

表1 PT APTT TT Fib批內(nèi)及日間精密度

2.2 準確度驗證

PT，APTT，TT，F(xiàn)ib均參加了2019年衛(wèi)生部室間質(zhì)評，回報結(jié)果顯示均為滿分。衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評評價標準準確度驗證的允許偏差為PT≤7.5%，APTT≤7.5%，TT≤,Fib≤10%，見表2。

2.3 Fib線性驗證

Fib的回歸方程Y=1.003X+0.131，r=0.998檢測平均與理論值呈良好的線性相關(guān)性，線性范圍為(0.96～7.68)g/L，符合廠家給定的線性范圍（0.8～8.0）g/L，線性系數(shù)＞0.98，見表3，圖1。

圖 Fib線性驗證

2.4 攜帶污染率

經(jīng)計算高值干擾組(H-L)平均為28.44,SD為0.195；低值組(L-L)平均為28.36,SD為0.251。攜帶污染指標為0.08遠小于3SD（L-L）=0.753,可以證明儀器運行檢測項目時不受樣品針攜帶污染。

2.5 標本放置時間影響

SF-8100配套試劑說明書要求標本應(yīng)在4h內(nèi)進行檢測。選取20例樣本，應(yīng)用配對t檢驗分別分析，除冷藏放置(4℃)4h的APTT外（P＞0.05），其他項目均有明顯變化，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.6 參考區(qū)間驗證

20例標本，PT為(11.1～13.7)s；ATPP為(27.3-36.4)s；TT為（11.0～15.7)s；Fib為(2.01～3.83)s，均在所引用的試劑的說明書的參考區(qū)間內(nèi)，R≥90。說明本實驗室引用的PT，APTT，TT，F(xiàn)ib的參考值區(qū)間符合臨床檢測要求。

3.討論

凝血四項檢測是臨床應(yīng)用中較為普遍的血液學(xué)檢測指標，對有效評估受檢者的血栓前狀態(tài)，患者出血性、血栓性疾病的診斷，術(shù)前傾向篩查，抗凝藥劑量檢測以及預(yù)后分析具有重要的參考價值[4]。高質(zhì)量的檢測結(jié)果能保證檢測作用和意義得以實現(xiàn)。伴隨臨床對凝血功能檢測項目需求的日益增加，因此對操作簡便、測速快、成本低、準確性高的全自動凝血分析儀的要求也日趨強烈。雖然儀器廠商提供有儀器性能的基本參數(shù)，但由于地區(qū)，實驗室和人員操作之間的差異，出于對方法標準化與質(zhì)量控制的要求，對新檢測系統(tǒng)進行性能驗證是保證實驗室結(jié)果一致性的關(guān)鍵。

SF-8100是一臺具有高速處理能力的全自動凝血分析儀，用于PT、APTT、TT和Fib的檢測原理為磁珠凝固法，判斷方法為渦流感應(yīng)，不使用光源系統(tǒng)，抗干擾能力較強，不易受黃疸，乳糜和溶血等特異性血漿的干擾[5]。因此本文未做干擾試驗。本文經(jīng)驗證，SF-8100批內(nèi)和日間精密度均符合行業(yè)標準，重復(fù)性較好。參加的衛(wèi)生部臨檢中心組織的室間質(zhì)評，成績均為100%，具有可靠的準確度。Fib的線性范圍為0.96～7.68g/L表明Fib能夠滿足臨床檢測需求。高值對低值標本的攜帶污染率遠小于3SD（L-L），反映SF-8100具有良好的自潔系統(tǒng)。室溫放置4h、冷藏放置4h或24h的檢測結(jié)果與采集后即測的結(jié)果之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明采集后標本的送檢速度直接影響測試結(jié)果的準確性。需盡快檢測，以保證數(shù)據(jù)的準確性。按照CLSI文件要求，90%健康者的測定結(jié)果在引用的參考范圍內(nèi)，就可實現(xiàn)生物參考區(qū)間的轉(zhuǎn)移。本文通過驗證表明本實驗室可以直接引用賽科希德試劑說明書提供的參考區(qū)間。

綜上所述，SF-8100全自動凝血分析儀具有精密度好，準確度高，線性范圍寬，攜帶污染率小，性能良好，能夠充分滿足實驗室工作需求，較好地服務(wù)醫(yī)患工作。