姬翔宇，楊繼業(yè)，陳書明*，楊 玉，衛(wèi) 陽，任 娜，陳志敏

（1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山西太谷 030801；2.山西省畜牧遺傳育種中心，山西太原 030027）

阿樸酯（Apo-ester，APO）和斑蝥黃（Canthaxanthin，CXN）是農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《飼料添加劑品種目錄（2013）》中的2 種飼料添加劑[1]，其用途是增加家禽皮膚、腳脛及蛋黃顏色，改善雞肉與雞蛋的商品性能[2]。APO 和CXN 都屬于化學(xué)合成的類胡蘿卜素，具有與大多數(shù)天然類胡蘿卜素相同的生物學(xué)功能，尤其體現(xiàn)在著色效果和抗氧化能力等方面[3-4]。但APO 和CXN 在化學(xué)合成過程中可能會(huì)產(chǎn)生其他副產(chǎn)物，影響飼用安全。目前，國內(nèi)外已有APO 和CXN 飼喂蛋雞的相關(guān)報(bào)道。Surai等[3]研究表明，CXN 是一種非常有效的脂溶性抗氧化劑，可以增加蛋黃顏色的同時(shí)防止蛋黃脂質(zhì)氧化；李俊等[4]研究表明，APO 可以顯著提高蛋黃顏色和蛋雞肝臟抗氧化能力。這些報(bào)道多集中于APO 和CXN 對產(chǎn)蛋高峰期雞蛋著色效果及抗氧化指標(biāo)影響的研究，對產(chǎn)蛋后期雞的飼用效果和安全報(bào)道較少。

相較于新羅曼蛋雞，我國自主選育、適應(yīng)本土環(huán)境的京紅1 號(hào)蛋雞具有抗應(yīng)激能力強(qiáng)、成活率高、產(chǎn)蛋高峰期持續(xù)時(shí)間長、產(chǎn)蛋率高等特點(diǎn)[5]，是一種優(yōu)良的商品蛋雞。但在產(chǎn)蛋后期，不同品種蛋雞都不可避免地出現(xiàn)產(chǎn)蛋率、蛋品質(zhì)及免疫力降低等問題。基于此，本試驗(yàn)旨在研究APO 和CXN 對產(chǎn)蛋后期京紅1 號(hào)蛋雞的飼用效果與安全，以期提高產(chǎn)蛋后期雞生產(chǎn)性能與蛋品質(zhì)，進(jìn)而提高養(yǎng)雞業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 APO 與CXN 為帝斯曼上海有限公司的飼料添加劑產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 選取體況相近的420 日齡京紅1 號(hào)蛋雞225 只，隨機(jī)分為3 組，每組75 只，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15 只，分別設(shè)為對照組（基礎(chǔ)日糧）、APO 試驗(yàn)組（基礎(chǔ)日糧+80 mg/kg APO）和CXN 試驗(yàn)組（基礎(chǔ)日糧+8 mg/kg CXN），APO 與CXN 添加量依據(jù)2 個(gè)產(chǎn)品的說明書，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。預(yù)試期7 d，正試期28 d。根據(jù)預(yù)試期間料蛋比、產(chǎn)蛋率和蛋品質(zhì)調(diào)整分組，使每組生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)處在同一水平。正試期間，每只雞日喂料126 g，每日09:00和16:00 各飼喂1 次，自由采食，自由飲水。根據(jù)上一次飼喂飼料剩余量適當(dāng)增減飼喂量，每日16:00 揀蛋。試驗(yàn)期第7、14、21、28 天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取2 枚雞蛋，每個(gè)試驗(yàn)組共10 枚，做蛋品質(zhì)分析。在正試期結(jié)束后第2 天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2 只健康狀況良好的蛋雞，即每個(gè)試驗(yàn)組10 只，空腹翅靜脈采血5 mL，于 4℃、3 000 r/min 離心20 min，分離血清，分裝至1.5 mL離心管，編號(hào)后置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 日糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能 每日記錄雞蛋數(shù)、總蛋重、軟破畸形蛋數(shù)，計(jì)算產(chǎn)蛋率、平均蛋重、軟破畸形蛋率；每周統(tǒng)計(jì)飼料消耗量，計(jì)算料蛋比。

1.3.2 蛋品質(zhì) 采用多功能蛋品質(zhì)測定儀（ORKA，以色列）測定蛋重、哈氏單位和蛋黃顏色（RCF 值），用蛋殼強(qiáng)度測定儀（ORKA，以色列）測定蛋殼強(qiáng)度，用蛋殼顏色測定儀（QCR，英國）測定蛋殼顏色，用紫外分光光度法測定蛋黃類胡蘿卜素含量[6]。

1.3.3 血液生化指標(biāo) 用鄰苯三酚自氧化法測定超氧化物歧化酶（SOD）的活性[7]，硫代巴比妥酸法測定丙二醛含量（MDA）[8]，總抗氧化能力檢測試劑盒測定總抗氧化能力（T-AOC），肌酐測定試劑盒測定肌酐（CRE）含量，二乙?！匡@色法測定血清尿素氮（BUN）含量，金氏直接顯色法測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性[9]，上述試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 用 SPSS 24.0 進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan′s 法比較各組之間差異，結(jié)果用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 APO 與CXN 對雞生產(chǎn)性能的影響 表2 結(jié)果顯示，與對照組相比，APO 組和CXN 組日采食量分別降低了2.76%（P＜0.05）與 2.53%（P＜0.05），產(chǎn)蛋率、料蛋比、軟破畸形蛋率和平均蛋重差異均不顯著。

表2 阿樸酯和斑蝥黃對雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 APO 與CXN 對雞蛋品質(zhì)的影響 由表3 可知，添加APO 與CXN 后的第7 天，APO 組蛋黃RCF 值顯著高于CXN 組，而后者又顯著高于對照組；在第14、21、28 天均呈相同的規(guī)律；其中，在第28 天，APO 組與CXN 組蛋黃RCF 值比對照組分別提高了11.55 級(jí)和8.16 級(jí)（P＜0.05）。添加APO 與CXN 后，上述各組蛋黃類胡蘿卜素含量變化規(guī)律與蛋黃RCF 值變化規(guī)律相同，其中，在第28 天，APO 組與CXN 組蛋黃類胡蘿卜素含量分別提高了474% 和273%（P＜0.05）。各組蛋殼顏色、蛋殼強(qiáng)度和哈氏單位變化均不顯著。

表3 阿樸酯和斑蝥黃對雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 APO 與CXN 對雞肝腎功能的影響 由表4 可知，與對照組相比，APO 組血清CRE 含量顯著升高，BUN、ALT 和AST 無顯著變化；CXN 組血清ALT 顯著升高，CRE、BUN 和AST 差異均不顯著。在本試驗(yàn)條件下，APO 會(huì)對雞腎功能造成一定損傷，CXN 會(huì)對雞肝功能造成一定損傷。

表4 APO 和CXN 對雞肝腎功能的影響

2.4 APO 與CXN 對雞抗氧化機(jī)能的影響 由表5 可知，與對照組相比，APO 組與CXN 組血清抗氧化指標(biāo)T-AOC、SOD、MDA 差異均不顯著。

表5 阿樸酯和斑蝥黃對雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 APO 和CXN 對雞生產(chǎn)性能的影響 有關(guān)APO 和CXN 對雞生產(chǎn)性能影響研究結(jié)果存在差異。有研究表明，在肉雞飼料中高劑量添加（5 g/kg 和10 g/kg）CXN 會(huì)使雞采食量和體增重顯著低于對照組[10]。Rosa等[11]研究認(rèn)為，CXN 對42 周齡蛋雞日采食量、產(chǎn)蛋率、料蛋比、軟破畸形蛋率和平均蛋重均無顯著影響。梁遠(yuǎn)東等[12]研究表明，在蛋雞日糧中添加10 mg/kg CXN會(huì)顯著降低38 周齡蛋雞產(chǎn)蛋率、平均蛋重和飼料報(bào)酬，10 mg/kg APO 則無顯著影響。Arauj 等[13]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，6 mg/kg CXN 可以提高62 周齡蛋雞產(chǎn)蛋量、總孵化率。本研究結(jié)果表明，添加APO 和CXN 不影響產(chǎn)蛋率、料蛋比、軟破畸形率和平均蛋重，日采食量較對照組顯著降低，原因可能是APO 和CXN 影響了蛋雞的肝腎功能，使蛋雞出現(xiàn)食欲減退等不良反應(yīng)[14]，導(dǎo)致采食量降低。不同學(xué)者研究結(jié)果略有不同，可能與研究選用的雞品種、日齡以及APO 與CXN 添加量不同有關(guān)。

3.2 APO 和CXN 對雞蛋品質(zhì)的影響 蛋黃顏色深淺與飼料中色素種類及含量緊密相關(guān)，蛋黃顏色深，RCF值就大，商品性能就好。王慧文等[15]在飼料中添加60 mg/kg CXN，使蛋黃RCF 值提高9 級(jí)。Sirri 等[16]研究發(fā)現(xiàn)在褐殼蛋雞飼糧中添加120 mg/kg 萬壽菊提取物和40 mg/kg APO 可以顯著提高RCF 值，相較于萬壽菊提取物，APO 著色效果更好。Johnson-Dahl 等[17]在蛋雞飼料中添加6 mg/kg CXN 可使蛋黃中CXN 含量在7 d 后達(dá)到最高。本試驗(yàn)中，APO 組和CXN 組蛋黃RCF 值和蛋黃類胡蘿卜素含量在第7、14、21、28 天均顯著提高，與上述研究結(jié)果相吻合。APO 和CXN 是脂溶性類胡蘿卜素，蛋雞攝入的APO 和CXN 有3%～8%可經(jīng)小腸吸收轉(zhuǎn)運(yùn)至卵巢，隨著蛋黃的形成而沉積到蛋黃中[18]，使蛋黃顏色加深，還有一部分則沉積在皮膚、腳脛等部位，大部分則通過糞便排出體外[1]。

蛋殼顏色和強(qiáng)度主要受遺傳[19]、營養(yǎng)、日齡[20]、應(yīng)激和疾病等[21]因素影響，哈氏單位與雞蛋儲(chǔ)存時(shí)間和蛋雞日齡有關(guān)[22]。本研究結(jié)果顯示，在第14 天時(shí)，APO 和CXN 影響蛋殼顏色，其他時(shí)間均無顯著影響，可能在第14 天左右雞受熱出現(xiàn)了應(yīng)激反應(yīng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，APO和CXN 對蛋殼強(qiáng)度和哈氏單位均無顯著影響。

3.3 APO 和CXN 對雞肝腎功能的影響 CRE 和BUN是反映腎功能的特異指標(biāo)，當(dāng)腎功能受損時(shí)，腎小球過濾能力降低，會(huì)引起血液中CRE 和BUN 含量升高。ALT 和AST 是評價(jià)肝功能的主要指標(biāo)，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，ALT 和AST 就會(huì)透過肝細(xì)胞膜進(jìn)入血液，使血液內(nèi)ALT 和AST 酶活升高。相關(guān)研究表明，CXN 具有吸收快、體內(nèi)分布廣和消除慢等特點(diǎn)[1]。CXN 進(jìn)入機(jī)體后，除部分被代謝外，還有少部分殘留在肝臟中，因此可能會(huì)影響肝功能[23]。馬冬梅等[14]研究表明，當(dāng)雞血清中CRE 和BUN 升高時(shí)，會(huì)使雞出現(xiàn)精神萎靡、食欲減退、不能站立等癥狀。何夢恒等[24]研究表明加麗素紅會(huì)影響腎臟功能指標(biāo)。楊蘭蘭等[25]使用CXN 對小鼠進(jìn)行大劑量灌胃24 h 內(nèi)，發(fā)現(xiàn)ALT 和AST 會(huì)顯著升高，但隨著時(shí)間的延長ALT 和AST 會(huì)逐漸恢復(fù)正常。本試驗(yàn)中，APO 試驗(yàn)組血清CRE 顯著升高，表明APO對雞腎功能造成一定損傷。CXN 組血清ALT 顯著升高，表明CXN 可能對雞肝功能有損傷作用。鑒于以上安全隱患，故作者認(rèn)為，應(yīng)慎用化工合成APO 與CXN 來提高蛋黃色澤及雞蛋商品性能，需要對APO 與CXN 進(jìn)行添加量效關(guān)系、時(shí)長、安全性等更深入系統(tǒng)的研究。從保障動(dòng)物福利與食品安全角度出發(fā)，作者團(tuán)隊(duì)正在研究用食用安全的微生物發(fā)酵產(chǎn)類胡蘿卜素替代有安全隱患的化工合成APO 與CXN 飼料添加劑[26-27]，并試圖通過提高蛋黃中功能性營養(yǎng)物質(zhì)——類胡蘿卜素的沉積，進(jìn)而改善蛋黃色澤與營養(yǎng)，提高雞蛋的商品性能，維護(hù)蛋雞健康福利，并提高養(yǎng)雞業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。

3.4 APO 和CXN 對雞抗氧化機(jī)能的影響 SOD 是機(jī)體抗氧化的主要酶，用來清除體內(nèi)的超氧自由基，保護(hù)機(jī)體細(xì)胞免遭氧化。相關(guān)研究表明，CXN 是一種非常有效的脂溶性抗氧化劑，可以降低雞血漿MDA 含量，提高雞血漿總抗氧化能力[28]。Chang 等[29]研究表明，CXN 有著比β-胡蘿卜素更強(qiáng)的抗氧化活性，對大鼠的神經(jīng)具有保護(hù)作用。Araujo 等[13]認(rèn)為，CXN 可以有效地沉積和分布在卵巢、蛋黃和胚胎中，使胚胎組織免受氧化，并影響雛雞的先天免疫功能和抗氧化能力。但從本試驗(yàn)結(jié)果看，APO 和CXN 對雞血清T-AOC、SOD活性和MDA 含量影響均不顯著，該現(xiàn)象及機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，京紅1 號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋后期飼料中添加80 mg/kgAPO 或8 mg/kg CXN 對蛋雞生產(chǎn)性能影響均不顯著，但可顯著提高蛋黃色澤及類胡蘿卜素含量，使雞蛋的商品性能顯著提高；但APO 會(huì)對雞腎功能造成一定損傷，CXN 會(huì)對雞肝功能造成一定損傷；二者對雞抗氧化機(jī)能均無顯著影響。故從保障動(dòng)物福利與食品安全的角度出發(fā)，在蛋雞生產(chǎn)中應(yīng)慎用化工合成飼料添加劑APO 和CXN，這2 種添加劑的添加劑量、時(shí)長、效果及安全性有待深入研究。