姚建聰，梁志剛，楊 晴，劉從敏，夏 天，陳 奇，Marisa Rotolo, Dan Tucker

（1.PIC中國,上海 200233；2.新希望六和，北京 100102；3.劍橋大學，英國 劍橋）

自2018 年8 月3 日非洲豬瘟病毒（ASFV）在中國被發(fā)現(xiàn)并確診以來，已在全國范圍內(nèi)傳播并持續(xù)流行，成為地方性流行疾病。這種疫病的影響巨大，它持續(xù)挑戰(zhàn)著獸醫(yī)專業(yè)人員，同時也增大了養(yǎng)豬業(yè)的風險。文章敘述了如何在一個豬場使用檢測和清除方法，清除ASFV感染陽性豬群和實施局部清群，并最終成功地控制了ASF 的暴發(fā)。

1 材料與方法

文中討論的豬場在生物安全基礎(chǔ)設(shè)施升級后被用作臨時隔離舍，隔離引進的后備母豬。該豬場有5棟豬舍，每棟豬舍分布12 個欄位，每個欄位60 m2可飼養(yǎng)40 ～45 頭后備母豬。原整體規(guī)劃上，該豬場大約能存欄2 800 頭肥豬，為300 km外的大型母豬生產(chǎn)基地提供隔離檢疫服務(wù)。

1.1 后備母豬的調(diào)運和ASFV 檢測

從2019年9月8日至9月20日，總計使用了11 個車次轉(zhuǎn)運了1 400頭后備母豬進入該隔離舍。

11 個車次中有10 車次租賃自第三方，這些車輛在計劃進入專門洗車點之前都進行了采樣和ASFV的PCR 檢測。檢測結(jié)果陰性后，再進入洗車點進行徹底地沖洗、消毒以及56 ℃烘干70 min。所有的洗車工和司機在運輸之前也進行了相應(yīng)的培訓(xùn)，要求遵守和執(zhí)行相應(yīng)的生物安全標準。

在所有豬只到達隔離舍后第13天，其中第1 棟豬舍內(nèi)第4 欄出現(xiàn)1 頭后備豬突然死亡，此外還有一些豬只開始出現(xiàn)食欲降低和采食量下降。這些有問題的豬只都來自于同一輛運輸卡車，這輛卡車當時裝載了70 頭后備母豬。對死亡豬只采集了鼻腔拭子、糞便拭子、腹股溝淋巴結(jié)樣品，并立即送往實驗室檢測。對死亡豬只采用符合生物安全的方式送往焚化爐焚燒。

圖1 隔離豬場場內(nèi)、外布局

圖2 運輸車輛以及隔離豬場棟舍內(nèi)欄位分布情況

在到達隔離舍后第14 天，對該舍第4 欄以及相鄰第3、5 欄內(nèi)所有豬只進行鼻腔拭子采樣；同時對豬場內(nèi)其他欄位豬只，每天進行口腔黏液樣品采集。此外，對隔離場內(nèi)人員、物資、設(shè)備、環(huán)境也進行了不定期采樣監(jiān)測。這些采集的樣品被送到公司專屬實驗室進行ASFV PCR 檢 測，大 約24 ～48 h可獲得檢測結(jié)果。21 d 后，每個欄位內(nèi)的口腔黏液采集改為3 d 采樣檢測1 次?？偣灿? 840 份樣品進行了ASFV 的核酸檢測。

1.2 剔除和消除污染策略

豬只到達隔離舍后第14 天，對所有ASFV 檢測陽性豬只進行電擊安樂死，之后尸體裝在防水塑料袋子內(nèi)移出到豬場外進行焚燒，所有經(jīng)過的路線提前覆蓋上防水塑料膜。在第14 天夜里，棟舍內(nèi)左半部分豬只全部清空（1-6 欄），中間過道用防水塑料帆布密封；左側(cè)的門也密封嚴密，以保護棟舍內(nèi)右半部分的豬只。在左側(cè)欄位清空之后，左側(cè)6 個欄位和過道覆蓋燒堿液，整個棟舍內(nèi)進行熏蒸消毒。隔離場內(nèi)每個棟舍安排專人負責，固定在棟舍內(nèi)負責本棟舍的相關(guān)操作，嚴禁棟舍之間人員的交叉流動。此外嚴格審查場內(nèi)、外生物安全以及執(zhí)行情況，以防止進一步的污染。

2 結(jié)果

在豬只到達隔離舍后第14 天，1 號棟舍內(nèi)第4 欄有4 頭、第3 欄有1 頭、第5 欄有1 頭豬只的PCR結(jié)果顯示ASFV 陽性。但是，之后沒有進一步檢測到陽性。其余的后備母豬仍留在隔離舍內(nèi)進行下一步的隔離。大約55 d 后，這些后備母豬移進了母豬群。此次ASFV 控制中，1 號棟舍內(nèi)左側(cè)6 個欄位內(nèi)250頭后備被清空，這意味著隔離舍內(nèi)豬只總數(shù)量損失了17.86%。

圖3 用塑料帆布建立隔離通道將豬只從棟舍內(nèi)移走

圖4 棟舍內(nèi)ASFV 檢測、疾病進展和清除圖

圖5 環(huán)境采樣

3 結(jié)果與討論

如果能夠做到早期檢測和快速生物安全反應(yīng)，就可以通過在符合當?shù)胤ㄒ?guī)的情況下，使用檢測剔除技術(shù)在一個棟舍和一個豬場實現(xiàn)ASFV 控制。而該操作的關(guān)鍵是要避免漏掉陽性豬只和阻止病毒的污染與傳播。

團隊對豬場可能傳入ASFV 的風險因素進行了分析，包括人員，物資，車輛，飼料，藥品等。運輸?shù)能囕v被確定為是這次病毒引入最大的風險因素。我們制定了相應(yīng)的改進措施，以改進未來的運輸。采用的措施，包括很多生物安全的技術(shù)細節(jié)。

致謝:感謝PIC 顧問Rodney Baker 博士；同時也感謝樊福好博士，因為他是使用口腔黏液做ASFV 早期診斷以及實施ASFV 檢測和剔除實現(xiàn)ASFV 控制的最早實踐者。