李棟

摘 要 所謂液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)，就是通過(guò)液相色譜把要分析的混合物分離開(kāi)，再用質(zhì)譜對(duì)某個(gè)或某些分子進(jìn)行定性或定量。它的強(qiáng)大功能使之不僅能輕松面對(duì)單個(gè)分子的研究，更加適合針對(duì)復(fù)雜樣本的“組學(xué)”分析。由于蛋白質(zhì)和小分子性質(zhì)的差異，面向蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)的液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)也有所區(qū)別，我們將在后續(xù)的篇幅中介紹液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在檢測(cè)食品研究中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜;食品安全;分析

隨著我國(guó)社會(huì)的飛速發(fā)展，物質(zhì)生活越來(lái)越豐富，尤其是食品種類的增加，食品安全逐漸成為人們最關(guān)心的話題之一，因?yàn)槭称钒踩珕?wèn)題不但關(guān)系著人民群眾的身體健康，更是會(huì)對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展造成一定的影響。由于我國(guó)發(fā)展較晚，在食品原料供給、生產(chǎn)、加工、包裝、儲(chǔ)存等環(huán)節(jié)工作還不夠到位，特別是近些年一些無(wú)視國(guó)家法律法規(guī)的企業(yè)不按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)食品，以次充好，偷工減料，導(dǎo)致發(fā)生食品安全問(wèn)題，例如阜陽(yáng)假奶粉中毒事件、蘇丹紅事件等，因此，要增強(qiáng)食品的安全性，就要提高食品安全檢驗(yàn)技術(shù)，只有提高檢驗(yàn)食品的相關(guān)技術(shù)，才能讓人們食用更加安全的食品。

1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)概述

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）最開(kāi)始是源于質(zhì)譜儀的發(fā)明，這種儀器是在19世紀(jì)20年代前英國(guó)著名物理學(xué)家湯普森發(fā)明的，其最開(kāi)始的用途檢測(cè)分子質(zhì)量差異的一類儀器。后來(lái)經(jīng)過(guò)多年的研究與發(fā)展，在80年代末90年代初研制出了高分辨飛行時(shí)間的質(zhì)譜儀，并且應(yīng)用到許多行業(yè)里面。而液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)也是由于高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的廣泛應(yīng)用才被應(yīng)用于食品藥品領(lǐng)域中的，又由于其具有良好的分離能力和高效率檢測(cè)等眾多優(yōu)點(diǎn)，尤其在檢驗(yàn)食物中藥品含量方面發(fā)展更加迅速。

2 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的工作原理分析

2.1 電噴式離子化技術(shù)

物質(zhì)離子化是檢測(cè)的最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，所謂物質(zhì)離子化就是將想要進(jìn)行分析的物質(zhì)通過(guò)儀器轉(zhuǎn)化成帶電粒子，只有將取值離子化質(zhì)譜儀才能進(jìn)行分析，這種方法是食品藥品檢測(cè)中最常用的方法。此外還有大氣壓光離子轉(zhuǎn)化法，但是缺點(diǎn)較多，不經(jīng)常使用。

2.2 使用質(zhì)量分析器對(duì)離子進(jìn)行篩選

質(zhì)量分析器是將離子化的物質(zhì)進(jìn)行篩選，把想要進(jìn)行檢測(cè)的離子篩選出來(lái)，其是質(zhì)譜儀的構(gòu)件之一，根據(jù)想要檢測(cè)的離子的性質(zhì)和檢測(cè)方法的不同，還可以將質(zhì)量分析器分成磁分析器、離子迦旋共振分析器等不同類型，并且它們之間能夠相互組合進(jìn)行物質(zhì)的檢測(cè)[1]。

2.3 生物樣本的分析

在對(duì)物質(zhì)進(jìn)行離子化、篩選的環(huán)節(jié)后，就要通過(guò)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)法對(duì)樣本進(jìn)行提純，常用的提純法有液液萃取法、固態(tài)萃取法等。最后就是使用質(zhì)譜儀對(duì)檢測(cè)后的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得出最終結(jié)果。

3 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在食品安全中的應(yīng)用

藥品殘留檢測(cè)是食品安全檢測(cè)中非常重要的項(xiàng)目之一，由于我國(guó)近些年畜牧業(yè)都已經(jīng)開(kāi)始大規(guī)模的工業(yè)化養(yǎng)殖，大型飼養(yǎng)場(chǎng)為了提高工作效率，降低寄生蟲(chóng)、瘟疫等傳染疾病對(duì)其效益產(chǎn)生的影響，一些飼養(yǎng)場(chǎng)就會(huì)在其飼料中加入喹諾酮類抗生素藥物，以提高牲畜對(duì)疾病的抵抗能力。這些藥物雖然對(duì)家畜起到了一定的效果，但是，喹諾酮類抗生素非常容易在體內(nèi)殘留，而人如果在食用了含有超標(biāo)喹諾酮類藥物的家畜，也會(huì)在體內(nèi)殘留，造成人體疾病對(duì)該類抗生素的嚴(yán)重耐藥性的發(fā)生，有研究實(shí)驗(yàn)表明，二氟沙星和單諾沙星還能導(dǎo)致胚胎毒的發(fā)生，嚴(yán)重影響人類對(duì)疾病的防御和對(duì)此類抗生素藥性的研究。而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在食品安全中的應(yīng)用解決了這一難題，這種技術(shù)能夠檢測(cè)出肉類中是否含有超標(biāo)的喹諾酮藥物沉積在體內(nèi)，本文就液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)肉類中諾氟沙星含量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究[2]。

3.1 檢測(cè)范圍和實(shí)驗(yàn)試劑、材料

本實(shí)驗(yàn)用于檢測(cè)肉類中諾氟沙星藥物殘留的檢測(cè)。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀一臺(tái)、實(shí)驗(yàn)用天平一臺(tái)、漩渦振蕩器、實(shí)驗(yàn)用試管，取樣本0.1kg牛肉，其諾氟沙星的檢出限、保留時(shí)間和特征離子見(jiàn)表格1。

3.2 實(shí)驗(yàn)原理

在檢測(cè)的肉類樣本中使用甲醇提取諾氟沙星，經(jīng)過(guò)0.45μm的過(guò)濾膜，進(jìn)行過(guò)濾，再用C18柱進(jìn)行分離，最后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)離子的定性、峰面積定量。

3.3 實(shí)驗(yàn)步驟

取樣本肉0.1kg，放置于10ml試管內(nèi)，加入甲醇溶液進(jìn)行均勻攪拌，使甲醇溶液能夠充分與樣本接觸，其次，將試管放置于漩渦振蕩器中，進(jìn)行樣本的離心，經(jīng)過(guò)漩渦振蕩器離心后，靜止20分鐘，提取試管上層清液用0.45μm的過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后才能進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。

3.4 檢測(cè)結(jié)果

在對(duì)諾氟沙星進(jìn)行定性檢測(cè)中，其結(jié)果如表2所示。定性檢測(cè)后就是對(duì)其進(jìn)行定量檢測(cè)，將離心后的樣本用甲醇稀釋成0～4800ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)過(guò)處理再用正已烷去除脂肪和其他組織，這樣做的目的是能夠獲得非常高的藥物回收率，經(jīng)過(guò)對(duì)樣本進(jìn)行采樣進(jìn)行分析，能夠得到諾氟沙星液相色譜-串聯(lián)只有的檢測(cè)信息，如圖1所示。

通過(guò)上述液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)，C18RP-MS采用電噴霧離子源、方法檢測(cè)。喹諾酮類抗生素在0-75μg/kg范圍內(nèi)呈線性較好，5分鐘內(nèi)完全分離;諾氟沙星檢出率為0.5μg/kg，定量限為2.0μm。回收率為82%～109%。

4 結(jié)束語(yǔ)

綜上所述，民以食為天，食以安為先。食品是我們賴以生存和發(fā)展的基石，食品安全涉及我們最基本的人身權(quán)利。尤其在我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)中，食品工業(yè)占據(jù)著非常重要的地位。利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)能夠滿足對(duì)于食品中藥物殘留分析方面的要求，同時(shí)該方法還有較好的精密度，彌補(bǔ)了食品行業(yè)測(cè)量藥物技術(shù)不足的缺點(diǎn)，間接保障了食品安全。

參考文獻(xiàn)

[1] 周迎楠，高澤岳，王圣博，等.液相色譜——質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J].吉林農(nóng)業(yè)，2019，452（11）：79.

[2] 鄧卿豐.高效液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)在食品安全分析中的應(yīng)用進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品，2018，（20）：93-95.